為明確吉林省公主嶺和敦化的大豆根腐病鐮孢菌種類,分離93份根腐病標(biāo)樣的病原真菌,利用ITS、TEF1-α、RPB2基因序列比對和多基因位點(diǎn)系統(tǒng)發(fā)育分析,結(jié)合形態(tài)學(xué)鑒定方法,鑒定出104株鐮孢菌,共分4種,腐皮鐮孢菌占64.42%,尖鐮孢菌占33.65%,輪枝鐮孢菌占0.96%,層出鐮孢菌占0.96%。在公主嶺罹病植株上分離鑒定出57株鐮孢菌,腐皮鐮孢菌占91.23%,尖鐮孢菌占5.27%,輪枝鐮孢菌占1.75%,層出鐮孢菌占1.75%;在敦化罹病植株上分離鑒定出47株鐮孢菌,腐皮鐮孢菌占31.91%,尖鐮孢菌占68.09%。結(jié)果表明:公主嶺優(yōu)勢病原菌為腐皮鐮孢菌,而敦化優(yōu)勢病原菌為尖鐮孢菌。致病性試驗(yàn)結(jié)果表明,僅有3株腐皮鐮孢菌對合豐55無致病性,其余101株鐮孢菌對合豐55均有不同程度的致病性。 

【文章來源】：大豆科學(xué). 2020,39(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

吉林省公主嶺和敦化地區(qū)大豆根腐病鐮孢菌典型菌落和分生孢子

分別對ITS、TEF1-α和RPB2 3基因數(shù)據(jù)矩陣序列進(jìn)行比對分析,最終獲得了3個(gè)基因矩陣,序列總長度為2 553 bp。其中,ITS基因624 bp,保守位點(diǎn)75個(gè),變異位點(diǎn)528個(gè),簡約信息位點(diǎn)346個(gè);TEF1-α基因960 bp,保守位點(diǎn)177個(gè),變異位點(diǎn)779個(gè),簡約信息位點(diǎn)685個(gè);RPB2基因969 bp,保守位點(diǎn)124個(gè),變異位點(diǎn)845個(gè),簡約信息位點(diǎn)768個(gè)。DAMBE(xia"test)對聯(lián)合序列進(jìn)行核酸飽和度檢測的結(jié)果表明:聯(lián)合序列未飽和,可以建樹(Iss<Iss.c)。PAUP的異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果表明,3個(gè)保守基因序列間不沖突(P=0.01)可以合并分析,利用PhyloSuite v1.1.1.6完成ML樹構(gòu)建,總共55條序列參與系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建,其中27條序列為本研究分離純化的鐮孢菌序列,27條序列源自于NCBI具有代表性的鐮孢菌序列,并以Bipolaris oryzae作為外群。ML樹3個(gè)數(shù)據(jù)集ITS、TEF1-α、RPB2的最佳核苷酸替換模型為K2P+R2、TN+F+G4、TNe+R3。參與ML法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹的55條序列主要被分為5個(gè)類群。在類群Ⅰ中6-38與層出鐮孢菌以較高的自舉值(93.1/99)聚為一類;在類群Ⅱ中DH-A1-2、DH-A1-4、DH-A1-9、DH-A1-10、DH-A1-14、DH-R-5、DH-R-9、DH-A3-9、DH-A10-7、DH-A10-9、DH-A10-13、DH-A10-14、DH-A10-15、DH-A6-30、GZL-B-31與尖鐮孢菌以極高的自舉值(100/100)聚為一類;在類群Ⅲ中GZL-B-17與輪枝鐮孢菌以極大的自舉值(100/100)聚為一類;在類群Ⅴ中GZL-Y-8-2、GZL-B-5、GZL-B-、GZL-B-10、GZL-B-12、DH-A3-10與腐皮鐮孢菌以自舉值(98.2/68)聚為一類(圖2)。2.4 鐮孢菌分離物的致病性分析

除了分離物GZL-A-7、GZL-A-9、GZL-A-21對合豐55無致病性之外,其余101株分離物對合豐55均具有不同的致病性。在67株腐皮鐮孢菌中,無致病性占4.5%,中度感病占49.3%,感病占23.9%,高度感病占22.3%;在35株尖孢鐮孢菌中,中度感病占2.9%,感病占14.2%,高度感病占82.9%;輪枝鐮孢菌和層出鐮孢菌均對寄主造成感病。培養(yǎng)的分離物能造成接種部位表面輕微變褐,莖內(nèi)部無明顯癥狀,嚴(yán)重的能造成接種植株根系幾乎全部變褐、腐爛壞死,植株死亡(圖3)。3 討 論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]黃淮地區(qū)大豆品種對根部主要病原真菌的抗性研究[D]. 姚艷.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]大豆鐮刀菌根腐病病原種類及大豆抗病種質(zhì)資源篩選[D]. 楊帥.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012



本文編號：3607138