發(fā)布時間：2022-01-18 23:17

　　胰島素信號（Insulin/IGF-1 Signaling,IIS）通路是昆蟲體內(nèi)重要的激素調(diào)節(jié)途徑,在調(diào)控昆蟲壽命和營養(yǎng)物質(zhì)代謝、積累等方面發(fā)揮重要作用。研究表明,IIS可以誘導短日照滯育型昆蟲進入生殖滯育,但相關(guān)分子機制尚不明晰,IIS是否通過相似的機制介導長日照誘導的生殖滯育也仍未探明。為此,本研究以長日照誘導生殖滯育的大猿葉蟲Colaphellus bowringi為材料,篩選并克隆大猿葉蟲胰島素信號通路關(guān)鍵基因,探索IIS調(diào)控大猿葉蟲生殖滯育的分子機制,主要結(jié)果如下:1.大猿葉蟲IIS關(guān)鍵基因的克隆與序列分析�？寺×舜笤橙~蟲ILPs（ILP1、ILP2、ILP3）、In R（In R1、In R2）、IRS、PI3K和AKT基因的全長序列,分析表明大猿葉蟲中胰島素信號通路關(guān)鍵基因均與鞘翅目昆蟲中相應基因親緣關(guān)系最高,并且與其他物種具有相同且保守的功能結(jié)構(gòu)域。2.IIS關(guān)鍵基因在大猿葉蟲頭部的時間表達模式。比較誘導生殖與誘導滯育條件下,大猿葉蟲8日齡幼蟲、1-3日齡雌蛹和初羽化雌蟲頭部中IIS關(guān)鍵基因的表達差異,發(fā)現(xiàn)ILP1、ILP3、In R1、IRS、PI3K、AKT均在誘... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

胰島素信號通路模式圖(WuandBrown2006)

圖1）。幼蟲期和蛹期為大猿葉蟲主要滯育誘導期。當溫度處于25℃時，3-5日齡幼蟲對光周期的變化最為敏感(Xueetal2002)。實驗室將初孵幼蟲飼養(yǎng)于光周期為LD12：12h的條件下，獲得注定非滯育個體。成蟲羽化取食4天后，體內(nèi)脂肪體量少且形態(tài)稀疏，大量卵黃原沉積使得卵巢不斷膨大并出現(xiàn)成熟卵粒開始產(chǎn)卵；將初孵幼蟲飼養(yǎng)于光周期為LD16：8h的條件下，獲得注定滯育個體，成蟲初羽化進入滯育準備期，初羽化成蟲取食4天后體內(nèi)脂肪體量多且呈塊狀充滿整個腹部，卵巢不發(fā)育，呈白色絲狀(Xueetal2002,Wangetal2007,Tanetal2016)。圖1-225℃條件下大猿葉蟲生活史示意圖(Tanetal2017a)每一小格代表一天。0表示24h內(nèi)未取食的初羽化成蟲，1-4表示取食天數(shù)（Xueetal2002）。Fig3-2Life-cycleoftheC.bowringithatrearedunder25℃(Tanetal2017a)Eachsmallboxrepresentsoneday.0representsthenewlyemergenceadultthathasnotbeenfedwithin24hours,1-4

和 ILP3，均克隆得到完整的開放閱讀框，分別為 372bp、387bp 和 597bp，編碼 123、128和 198 個氨基酸，蛋白質(zhì)分子質(zhì)量分別為 14.2kDa、14.7kDa 和 23.3kDa，等電點分別為6.25、9.37 和 10.06；預測 ILPs 蛋白序列的功能結(jié)構(gòu)域，結(jié)果顯示 ILPs 蛋白序列均只包含 1 個 insulin-like growth factor（IIGF，SM000078）功能結(jié)構(gòu)域。大猿葉蟲 ILPs 開放閱讀框氨基酸序列構(gòu)建進化樹（圖 3-1），分析發(fā)現(xiàn)，ILP3 與鞘翅目的赤擬谷盜 T. castaneum 聚類到一個分支，ILP1 和 ILP2 則與鞘翅目的馬鈴薯甲蟲 L. decemlineata 親緣關(guān)系最近。蛋白序列比對結(jié)果顯示，大猿葉蟲的ILPs 在多個種類昆蟲中都含有主要功能結(jié)構(gòu)域 IIGF（圖 3-2 B）。

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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[3]大猿葉蟲滯育誘導及滯育后生物學特性的研究[D]. 王小平.湖南農(nóng)業(yè)大學 2004

碩士論文
[1]保幼激素降解酶基因在大猿葉蟲滯育準備中的功能研究[D]. 孫丹.華中農(nóng)業(yè)大學 2018
[2]大猿葉蟲產(chǎn)卵前期和滯育準備期發(fā)育及營養(yǎng)儲備差異研究[D]. 馮蓮.華中農(nóng)業(yè)大學 2014
[3]大豆食心蟲地理種群分化及其越冬幼蟲對低溫環(huán)境適應性研究[D]. 宋鵬翔.吉林農(nóng)業(yè)大學 2014



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