黑尾葉蟬Nephotettix cincticeps（Uhler）是水稻矮縮病毒（RiceDrawf Dwarf Virus,RDV）的重要傳播媒介。在長(zhǎng)期進(jìn)化過程中,水稻、RDV和黑尾葉蟬之間形成了復(fù)雜的互作關(guān)系。前期研究表明,黑尾葉蟬攜帶RDV后出現(xiàn)若蟲發(fā)育歷期延長(zhǎng)、雌成蟲壽命縮短、產(chǎn)卵量下降以及子代存活率降低等生物學(xué)變化。為探討其內(nèi)在機(jī)制,本論文以黑尾葉蟬類胰島素及其受體為研究對(duì)象,就相關(guān)基因及其在RDV與黑尾葉蟬互作中的功能作用開展了初步研究,獲得主要結(jié)果如下:1.黑尾葉蟬類胰島素及其受體基因克隆與序列分析在黑尾葉蟬轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中篩選獲得10條類胰島素基因（NcILP1-10）和2條胰島素受體基因（NcInR1-2）。這些基因均包含18～26個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)肽序列,都屬分泌蛋白。采用RT-PCR技術(shù)克隆獲得這些基因的全長(zhǎng)cDNA序列。黑尾葉蟬類胰島素及其受體蛋白在進(jìn)化上存在多樣性特征。2.黑尾葉蟬類胰島素及其受體基因表達(dá)分析采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)黑尾葉蟬類胰島素及其受體基因的時(shí)空轉(zhuǎn)錄特征作了分析。除NcILP5在卵、若蟲和成蟲的表達(dá)量均相對(duì)較高外,其他類胰島素及其受體主要在... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１人胰島素和六種昆蟲胰島素氨基酸多重序列的比對(duì)（Ｉ）及類胰島素氨基??酸序列模體（ｎ）??Ｆｉｇ．?１．１?Ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ?ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ?ｏｆ?ｓｏｍｅ?ｉｎｓｕｌｉｎ?ｓｕｐｅｒｆａ?

生長(zhǎng)、發(fā)育、代謝、生殖和免疫等生命活動(dòng)（Ｗｕ和Ｂｒｏｗｎ，２００６）。??目前，有關(guān)昆蟲類胰島素信號(hào)通路在黑腹果蠅中己有較多的研究積累，??主要涉及果蠅ＲＴＫ受體傳導(dǎo)的信號(hào)通路（圖１．２）?（Ｇａｒｏｆａｌｏ，２００２；??Ｇｏｂｅｒｄｈａｎ?和?Ｗｉｌｓｏｎ，２００３；?Ｗｕ?和?Ｂｒｏｗｎ，２００６；?Ｔｅｌｅｍａｎ，２０１０；?Ａｎｔｏｎｏｖａ??等，２０１２；?Ｎａｓｓｅｌ?等，２０１５）?〇??在果蠅中，與人胰島素信號(hào)通路基因同源的類胰島素、類胰島素生??長(zhǎng)因子（ＤＩＲ）、胰島素受體底物（ＩＲＳ／ｃｈｉｃｏ）、ＰＩ３Ｋ、磷酸肌醇依賴的??蛋白激酶（Ｐｈｏｓｐｈｏｉｎｏｓｉｔｉｄｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｋｉｎａｓｅ，ＰＤＫ）、ＡＫＴ／ＰＫＢ??和ＦＯＸＯ等基因已相繼被發(fā)現(xiàn)，表明其信號(hào)通路和哺乳動(dòng)物類似（Ｂ６ｈｎｉ??等，１９９９；?Ｖｅｒｄｕ?等，１９９９；?Ｗｅｉｎｋｏｖｅ?等，１９９９；?Ｊｔｌｎｇｅｒ?等，２００３）。類??胰島素受體在與類胰島素結(jié)合后即發(fā)生Ｐ亞基自磷酸化，激活的ＲＴＫ將??ＩＲＳ的酪氨酸殘基磷酸化

ＮｃＩＬＰ２－３、ＮｃＩＬＰ６和ＮｃＩＬＰ８，與岡比亞按蚊ＡｇＩＬＰ３和火紅蟻ＳｉＩＬＰ２歸為??一支；（３）?ＮｃＩＬＰｌ、ＮｃＩＬＰ４－５和ＮｃＩＬＰ９－１０，與果蠅ＤＩＬＰ１－２、ＤＩＬＰ５－６??以及褐飛虱Ｎ１ＩＬＰ４聚類在一起（圖２．２）。這表明黑尾葉蟬類胰島素蛋白??的進(jìn)化存在多樣性。??黑尾葉蟬胰島素受體蛋白ＮｃｌｎＲｌ和ＮｃＩｎＲ２的結(jié)構(gòu)域分布較為相似，??從Ｎ端均依次排列有：１個(gè)Ｆｕｒｉｎ－ｌｉｋｅ結(jié)構(gòu)域（Ｆｕｒｉｎ－ｌｉｋｅ?ｃｙｓｔｅｉｎｅ?ｒｉｃｈ??ｒｅｇｉｏｎ）位于２個(gè)Ｒｅｃｅｐ－Ｌ結(jié)構(gòu)域之間、２個(gè)ＦＮ３結(jié)構(gòu)域（Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ?ｔｙｐｅ??３?ｄｏｍａｉｎ）和?１?個(gè)?ＰＴＫｃ?ＩｎｓＲ－ｌｉｋｅ?結(jié)構(gòu)域（Ｃａｔａｌｙｔｉｃ?ｄｏｍａｉｎ?ｏｆ?Ｉｎｓｕｌｉｎ??Ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｌｉｋｅ?Ｐｒｏｔｅｉｎ?Ｔｙｒｏｓｉｎｅ?Ｋｉｎａｓｅｓ）（圖?２．３）。這與褐飛風(fēng)?ＮｃＩｎＲ２?的??結(jié)構(gòu)域組成與排列一致。褐飛虱ＮｃｌｎＲｌ在相同區(qū)域則具有３個(gè)ＦＮ３結(jié)??構(gòu)域，而果蠅則僅有１個(gè)ＦＮ３結(jié)構(gòu)域。??＊?２０?＊?４０?＊?６０?＊?８０?＊?１００?＊??ＫＣＩＬＰ２?：?ＪｖＳ？?ｊＱｌｊ?｜＾Ｇ＇；ＹＱＣＭＦＳＳ?ＳＰＶＳＧ?ＥＱＧＫＦＳＳ?Ｌ?：?＃常崳?ＮＣＩＬＰ３?：??？ｘ｜ＡＡ＾？ＳｌＡ＾Ｃｌｒ？ａＳＦＩ？ｉＴＡＡＶＳｌＫＨＨ？？＇Ｇ?３?ｐｉＧＶＹＪＪＴＶＥＵＲ?Ｖｎ？？Ｓ＼Ｔ？ＺＦＶＥ？Ｖ？ＵｌＳ？Ｊ？ＡＩＴＳＦＩ?：?８３??ＨＣＩＬＰ６?：???Ｍ？Ｔ？｜ｒＩｉＪｓＳＩＪＪａｉｓＹＥＤＤＣＩＹＮＩＤＫＫＳＧＲＦＨ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]無脊椎動(dòng)物胰島素樣蛋白（Insulin-like/related peptides）研究進(jìn)展——以昆蟲為例[J]. 張龍輝,王國棟.  生物技術(shù)通報(bào). 2014(10)
[2]植物病毒病媒介昆蟲的傳毒特性和機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 史曉斌,謝文,張友軍.  昆蟲學(xué)報(bào). 2012(07)
[3]胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、昆蟲發(fā)育與老化[J]. 顧世紅,陳建國.  昆蟲知識(shí). 2009(04)

碩士論文
[1]水稻、黑尾葉蟬與水稻矮縮病毒三者間關(guān)系的初步研究[D]. 梁莉.浙江大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3577796