本研究以番茄（Solanum lycopersicum）為實(shí)驗(yàn)材料,研究植物內(nèi)生芽孢桿菌對南方根結(jié)線蟲（Meloidogyne incognita）的防治效果及其作用機(jī)制。篩選到3株有較強(qiáng)線蟲致死活性的內(nèi)生細(xì)菌,經(jīng)觀察菌落形態(tài),顯微結(jié)構(gòu)特征,16S rDNA和gyrB基因擴(kuò)增及聚類分析,確定3株內(nèi)生細(xì)菌分別為Bacillus cereus BCM2,B.cereus SZ5和B.altitudinis CCM7。采用鏈霉素標(biāo)記的方法構(gòu)建抗性突變株,通過傷根接種、組織研磨、稀釋涂布的方法測定3株內(nèi)生細(xì)菌在番茄根內(nèi)50 d的定殖動(dòng)態(tài)。結(jié)果表明,3株內(nèi)生細(xì)菌在根內(nèi)的數(shù)量在50 d內(nèi)均維持在103cfu/g以上,BCM2的定殖能力最強(qiáng),在接種后的第9 d達(dá)最大定殖量,為3.53×106 cfu/g鮮重根。通過盆栽和病圃實(shí)驗(yàn)測定內(nèi)生細(xì)菌對南方根結(jié)線蟲的防治效果,發(fā)現(xiàn)提前接種BCM2對M.incognita根結(jié)和卵塊的抑制效果最好,分別為81.2%和75.6%,定殖能力與防治根結(jié)線蟲效果之間呈正相關(guān)。提前接種BCM2還能顯著增加番茄的莖高和鮮重。病圃調(diào)查發(fā)現(xiàn)BCM2能夠顯著降低根結(jié)線蟲發(fā)病嚴(yán)重度,... 

【文章來源】：南京師范大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：143 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１?Ｍ?在植物根中的生活史??Ｆｉｇ．?１．１?Ｌｉｆｅ?ｃｙｃｌｅ?ｏｆ?Ｍ．?ｉｎｃｏｇｎｉｔａ?ｉｎ?ｐｌａｎｔ?ｒｏｏｔ??１??

，微生物和病原相關(guān)的分子模式（ＭＡＭＰｓ和ＰＡＭＰｓ）感知是植物基礎(chǔ)免??疫的第一道屏障，啟動(dòng)模式誘發(fā)的免疫（Ｐａｔｔｅｒｎ－ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ?ｉｍｍｕｎｉｔｙ，ＰＴＩ），病原??和昆蟲已經(jīng)進(jìn)化出效應(yīng)子來克服這些ＰＴＩ［ｗ，７Ｃ）］。最近，有證據(jù)表明ＰＰＮｓ能夠通??過分泌效應(yīng)子干擾寄主的ＰＴＩ反應(yīng)。南方根結(jié)線蟲產(chǎn)生的Ｍｉ－ＣＲＴ和北方根結(jié)線??蟲產(chǎn)生的ＭｊＴＴＬ５作為ＰＰＮｓ的效應(yīng)子，抑制ＰＴＩ反應(yīng)［７Ｎ７４］。近期的研宄表明，??植物的免疫過程可以表示為“ｚｉｇｚａｇ”的模式，如圖１．２。??Ｈ：ｇｈ?ＰＨ?ＥＴＳ?ＥＴ１?ＥＴＳ?ＥＨ??＼?Ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ?ｆｏｒ?ＨＲ??＾???＼?？????＇??Ｐａｔｈｏｇｅｎ?＼?？?？??ｅｆｆｅｃｔｏｒｓ?＼?？??Ｎ．?Ｐａｔｈｏｇｅｎ??？?Ａｖｒｆｌ?Ｅｆｆｅｃｔｏｒｓ?Ａｖｒ－Ｒ??Ｉ?ｅ?Ｖ?＾?＼??＾?＼?Ｔｒｉ？＾￥ｈｏ－ｄ?ｌｏｒ??Ｌｏｗ??ｖ?ＰＡＭＰＳ??圖１．２植物免疫系統(tǒng)的“ｚｉｇｚａｇ”模型。階段１，植物識(shí)別ＰＡＭＰｓ／ＭＡＭＰｓ?（紅色菱形）觸發(fā)??ＰＴＩ；階段?２，病原體成功釋放?ｅｆｆｅｃｔｏｒｓ，干擾寄主的?ＰＴＩ，導(dǎo)致?ｅｆｆｅｃｔｏｒ－ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ?ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ??（ＥＴＳ）；階段３，效應(yīng)子被ＮＢ－ＬＲＲ蛋白特異地識(shí)別，激活ＥＴＩ：階段４，病原丟棄原有ｅｆｆｅｃｔｏｒ??（紅色圓形），產(chǎn)生新的ｅｆｆｅｃｔｏｒ?（藍(lán)色圓形），新的ｅｆｆｅｃｔｏｒ被植物識(shí)別，導(dǎo)致再一次的ＥＴＩ。??Ｆｉｇ．?１．２?ｚｉｇｚａｇ?ｍｏｄｅｌ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｅｓ?ｔｈｅ?ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?ｏｕ

第２章植物內(nèi)生細(xì)菌在番茄中的定殖動(dòng)態(tài)及對根結(jié)線蟲的防效??２．?２內(nèi)生細(xì)菌菌株鑒定結(jié)果??２．?２．１三株內(nèi)生細(xì)菌形態(tài)特征及革蘭氏染色結(jié)果??三株細(xì)菌在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上的菌落特征見圖２．１及表２．４，顯微??鏡下菌體形態(tài)見圖２．２，革蘭氏染色結(jié)果見圖２．３。??ＵＫ??圖２．１三株細(xì)菌的菌落特征，Ａ．ＢＣＭ２，?Ｂ．?ＳＺ５，?Ｃ．ＣＣＭ７??Ｆｉｇ．?２．１?Ｃｏｌｏｎｙ?ｆｅａｔｕｒｅ?ｏｆ?３?ｉｓｏｌａｔｅｓ．?Ａ．?ＢＣＭ２，?Ｂ．?ＳＺ５，?Ｃ．?ＣＣＭ７??三株內(nèi)生細(xì)菌在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落特征及其他培養(yǎng)特征的描述如??表?２．４。??表２．４三株內(nèi)生細(xì)菌菌落特征??Ｔａｂｌｅ?２．４?Ｃｏｌｏｎｙ?ｆｅａｔｕｒｅ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ?ｂａｃｔｅｒｉａ?ｓｔｒａｉｎｓ??菌株編號?菌落特征??Ｓｔｒａｉｎ?Ｎｕｍｂｅｒ?Ｃｏｌｏｎｙ?Ｆｅａｔｕｒｅ??菌落圓形，較大，邊緣缺刻，淡黃色，無透明，表面光滑有蠟狀物質(zhì)，??ＢＣＭ２??培養(yǎng)基上易挑起，無粘性??菌落圓形至不規(guī)則，很大，邊緣較不規(guī)則，白色，無透明，表面光滑??ＳＺ５??有蠟狀物質(zhì)，培養(yǎng)基上易挑起，無粘性，時(shí)間長有淡褐色色素沉積??菌落圓形，不大，邊緣整齊，乳白色，無透明，表明光滑凸起，培養(yǎng)??ＣＣＭ７???基上易挑起，輕微粘性???三株內(nèi)生細(xì)菌ＢＣＭ２，ＳＺ５和ＣＣＭ７光學(xué)顯微鏡照片如圖２．２所示。??２０??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]植物誘導(dǎo)抗病性及其在果蔬上的初步應(yīng)用概述[J]. 丁志祥,姚永紅,敬廷桃,易婧.  南方農(nóng)業(yè). 2016(10)
[2]植物寄生線蟲生物防治研究新進(jìn)展[J]. 金娜,劉倩,簡恒.  中國生物防治學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]植物內(nèi)生菌防治植物寄生線蟲的研究進(jìn)展[J]. 江緒文,李賀勤.  生物技術(shù)通報(bào). 2014(09)
[4]野生大豆內(nèi)生細(xì)菌多樣性及其殺線蟲活性分析[J]. 史鳳玉,武云鵬,張瑞敬,吳楠,朱英波.  植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2013(04)
[5]Bacillus cereus X5 Enhanced Bio-Organic Fertilizers Effectively Control Root-Knot Nematodes（Meloidogyne sp.）[J]. XIAO Tong-Jian,CHEN Fang,GAO Chao,ZHAO Qing-Yun,SHEN Qi-Rong,RAN Wei.  Pedosphere. 2013(02)
[6]殺線蟲植物內(nèi)生細(xì)菌和根際放線菌對根結(jié)線蟲的防效[J]. 彭雙,楊茹,閆淑珍,陳雙林.  植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2012(01)
[7]植物與病原微生物互作分子基礎(chǔ)的研究進(jìn)展[J]. 程曦,田彩娟,李愛寧,邱金龍.  遺傳. 2012(02)
[8]生防細(xì)菌YC-10的殺線蟲活性及其鑒定[J]. 成飛雪,張德詠,劉勇,王忠勇,程菊娥,何明遠(yuǎn),肖啟明.  植物病理學(xué)報(bào). 2011(02)
[9]具殺線蟲活性植物內(nèi)生細(xì)菌的篩選和活性產(chǎn)物[J]. 彭雙,閆淑珍,陳雙林.  微生物學(xué)報(bào). 2011(03)
[10]根結(jié)線蟲生防菌snef8對番茄誘導(dǎo)抗性的初步研究[J]. 譚可菲,段玉璽,朱曉峰,羅寶君,趙秀梅,王連霞,姜曉軍.  黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(01)

碩士論文
[1]蠟質(zhì)芽孢桿菌AR156及其合劑對青枯病生防機(jī)理的研究[D]. 王勇.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]海南島茄果類蔬菜根結(jié)線蟲病病原鑒定及穿刺巴氏桿菌防效測定[D]. 賈本凱.海南大學(xué) 2012
[3]具殺線蟲活性植物內(nèi)生細(xì)菌和根際放線菌的篩選及防效研究[D]. 彭雙.南京師范大學(xué) 2011



本文編號：3552946