發(fā)布時間：2021-12-24 05:40

　　研究山蒼子油對離體培養(yǎng)的斜紋夜蛾（Spodoptera litura,SL）細(xì)胞的增殖和凋亡的影響,并初步確定山蒼子油主要成分檸檬醛對細(xì)胞具有毒殺活性,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡.分別采用CCK、MTT法和流式細(xì)胞法研究不同濃度的山蒼子油抑制SL細(xì)胞的活性,利用流式細(xì)胞法驗證不同濃度的檸檬醛對SL細(xì)胞凋亡的影響.研究結(jié)果表明,山蒼子油具有抑制SL細(xì)胞的增殖的作用,且隨著山蒼子油濃度的增大和處理時間的延長,SL細(xì)胞的存活率降低,當(dāng)山蒼子油濃度增大至0.015%時,SL細(xì)胞的存活率顯著降低（P<0.01）;當(dāng)處理時間達(dá)到72 h后,SL細(xì)胞的存活率同樣呈現(xiàn)顯著降低.檸檬醛作為山蒼子油的主要活性成分,對SL細(xì)胞亦具有明顯的抑制增殖的作用,且成劑量正相關(guān),當(dāng)檸檬醛濃度大于0.015%時,SL細(xì)胞的存活率顯著降低（P<0.01）.山蒼子油和檸檬醛均具有明顯的促進(jìn)SL細(xì)胞凋亡的作用,并呈劑量依賴關(guān)系,初步確定了檸檬醛是山蒼子油促進(jìn)SL細(xì)胞凋亡的主要活性成分,為山蒼子油基新型植物源農(nóng)藥的開發(fā)與利用提供依據(jù). 

【文章來源】：湖南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2020,47(12)北大核心EICSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

CCK法檢測山蒼子油對SL細(xì)胞存活率的影響

?婊盥實(shí)撓跋煊隒CK法的結(jié)果類似.當(dāng)作用時間均為24h時，隨著山蒼子油濃度的增大，SL細(xì)胞的存活率呈下降趨勢；當(dāng)山蒼子油濃度為0.015%時，SL細(xì)胞的存活率顯著降低（P<0.05）；繼續(xù)增大山蒼子油濃度，SL細(xì)胞存活率略有降低（P>0.05）.當(dāng)作用時間延長至48h時，隨著山蒼子油濃度的提高，SL細(xì)胞的存活率也呈下降趨勢，當(dāng)山蒼子油濃度為0.01%時，SL細(xì)胞的存活率僅為10%；繼續(xù)增大山蒼子油濃度，SL細(xì)胞的存活率略有下降.100806040200細(xì)胞存活率/%24h28h0.0050.0100.0150.0200.025山蒼子油濃度圖2MTT法檢測山蒼子油對SL細(xì)胞存活率的影響Fig.2EffectofSLcellsurvivalrateonLCEObyMTTmethod100806040200細(xì)胞存活率/%24h28h020406080100魚藤酮濃度/（μg·mL-1）圖3MTT法檢測魚藤酮對SL細(xì)胞存活率的影響Fig.3EffectofSLcellsurvivalrateonrotenonebyMTTmethod魚藤酮是從豆科植物的根和莖中提取的一種天然毒素，對螨蟲、線蟲等均具有較好的殺蟲活性[23].由圖3可知，魚藤酮對SL細(xì)胞的增殖也具有抑制作用，抑制效果與其濃度和處理時間有關(guān).對比魚藤酮和山蒼子油抑制SL細(xì)胞的效果可知，0.01%的山蒼子油處理SL細(xì)胞后，其抑制SL細(xì)胞的效果優(yōu)于30μg/mL的魚藤酮，說明山蒼子油對SL細(xì)胞的抑制作用較好，研究結(jié)果與WEN等[24]的基本一致.2.3流式細(xì)胞法檢測山蒼子油對離體SL細(xì)胞的凋亡作用在細(xì)胞凋亡的早期，細(xì)胞膜表面將發(fā)生破損，同時細(xì)胞內(nèi)膜的磷脂腺絲氨酸（PS）出現(xiàn)外翻暴露.AnnexinV是相對分子質(zhì)量為35000的Ca2+依賴的磷脂結(jié)合蛋白，對PS具有很高的親和性，可以與凋亡早期暴露于細(xì)胞外的PS相結(jié)合.因此，可以將標(biāo)記熒光染料的AnnexinV來識別早期的細(xì)胞凋亡.通常?

細(xì)胞存活率略有降低（P>0.05）.當(dāng)作用時間延長至48h時，隨著山蒼子油濃度的提高，SL細(xì)胞的存活率也呈下降趨勢，當(dāng)山蒼子油濃度為0.01%時，SL細(xì)胞的存活率僅為10%；繼續(xù)增大山蒼子油濃度，SL細(xì)胞的存活率略有下降.100806040200細(xì)胞存活率/%24h28h0.0050.0100.0150.0200.025山蒼子油濃度圖2MTT法檢測山蒼子油對SL細(xì)胞存活率的影響Fig.2EffectofSLcellsurvivalrateonLCEObyMTTmethod100806040200細(xì)胞存活率/%24h28h020406080100魚藤酮濃度/（μg·mL-1）圖3MTT法檢測魚藤酮對SL細(xì)胞存活率的影響Fig.3EffectofSLcellsurvivalrateonrotenonebyMTTmethod魚藤酮是從豆科植物的根和莖中提取的一種天然毒素，對螨蟲、線蟲等均具有較好的殺蟲活性[23].由圖3可知，魚藤酮對SL細(xì)胞的增殖也具有抑制作用，抑制效果與其濃度和處理時間有關(guān).對比魚藤酮和山蒼子油抑制SL細(xì)胞的效果可知，0.01%的山蒼子油處理SL細(xì)胞后，其抑制SL細(xì)胞的效果優(yōu)于30μg/mL的魚藤酮，說明山蒼子油對SL細(xì)胞的抑制作用較好，研究結(jié)果與WEN等[24]的基本一致.2.3流式細(xì)胞法檢測山蒼子油對離體SL細(xì)胞的凋亡作用在細(xì)胞凋亡的早期，細(xì)胞膜表面將發(fā)生破損，同時細(xì)胞內(nèi)膜的磷脂腺絲氨酸（PS）出現(xiàn)外翻暴露.AnnexinV是相對分子質(zhì)量為35000的Ca2+依賴的磷脂結(jié)合蛋白，對PS具有很高的親和性，可以與凋亡早期暴露于細(xì)胞外的PS相結(jié)合.因此，可以將標(biāo)記熒光染料的AnnexinV來識別早期的細(xì)胞凋亡.通常利用AnnexinV-FITC和碘化丙啶（PI）雙染色來區(qū)分凋亡和壞死細(xì)胞.PI的膜通透性很差，因而只能標(biāo)140湖南大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）2020年

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]植物源農(nóng)藥研究進(jìn)展[J]. 張興,馬志卿,馮俊濤,吳華,韓立榮.  中國生物防治學(xué)報. 2015(05)
[2]不同提取方法山蒼子油的化學(xué)成分與抗氧化活性分析[J]. 李芳,Yaru Song,Howard Holness,Kevin O’Shea.  林業(yè)科學(xué). 2015(03)
[3]丙烯菊酯和胺菊酯與DNA相互作用的光譜研究[J]. 吳朝陽,劉引,欒崇林,蔣曉華.  湖南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2010(06)
[4]微波萃取氣相色譜法測定大米中的有機(jī)磷農(nóng)藥[J]. 王玉枝,童玲,崔鑰,熊勁芳,邢麗,黃積輝.  湖南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2007(02)
[5]我國山蒼子資源利用現(xiàn)狀和產(chǎn)業(yè)化前景評述[J]. 陳學(xué)恒.  林業(yè)科學(xué). 2003(04)
[6]魚藤酮、擬除蟲菊酯復(fù)配殺蟲劑[J]. 韋星船,雷雨.  廣州大學(xué)學(xué)報(綜合版). 1999(04)

博士論文
[1]山蒼子油的提取效果及其防腐保鮮研究[D]. 付紅軍.中南林業(yè)科技大學(xué) 2017

碩士論文
[1]生姜精油對黑腹果蠅生存及選擇行為的影響[D]. 徐莉.浙江大學(xué) 2006



本文編號：3549919