為建立南方菜豆花葉病毒（southern bean mosaic virus,SBMV）的快速、簡(jiǎn)便、高通量檢測(cè)技術(shù),加強(qiáng)該病毒的口岸檢驗(yàn)檢疫,以提純的SBMV粒子為免疫原免疫BALB/C小鼠,利用雜交瘤技術(shù)獲得3株雜交瘤細(xì)胞株19C3、19H9和20G4,其分泌的SBMV腹水單抗效價(jià)均達(dá)到10-7,且3個(gè)單抗與感染SBMV大豆葉片組織粗提液有強(qiáng)烈的特異性免疫反應(yīng),而不與感染南方豇豆花葉病毒（southern cowpea mosaic virus,SCPMV）的豇豆、健康的大豆、毛豆、豌豆、蠶豆和菜豆葉片組織粗提液發(fā)生免疫反應(yīng)。以制備的單抗為核心,建立了檢測(cè)植物中SBMV的ACP-ELISA和dotELISA兩種血清學(xué)方法。3個(gè)單抗中19H9單抗的檢測(cè)靈敏度最高,以其建立的ACP-ELISA和dot-ELISA方法檢測(cè)大豆病葉粗提液的靈敏度分別達(dá)到1∶163 840和1∶10 240稀釋濃度。利用建立的dot-ELISA方法可從上�？诎督孬@的大豆種子中檢測(cè)出SBMV,且該檢測(cè)結(jié)果得到RT-PCR方法驗(yàn)證。表明制備的SBMV單抗及建立的SBMV血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)可有效用于我國(guó)SBMV的口岸... 

【文章來源】：植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2020,47(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 SBMV的提純和鑒定
        1.2.2 雜交瘤細(xì)胞和單克隆抗體制備
        1.2.3 ACP-ELISA方法建立及其靈敏度和特異性分析
        1.2.4 dot-ELISA方法建立及其靈敏度和特異性分析
        1.2.5 血清學(xué)方法在口岸檢測(cè)中的應(yīng)用
2 結(jié)果與分析
    2.1 SBMV抗原的制備
    2.2 雜交瘤細(xì)胞的融合、篩選和克隆
    2.3 單抗腹水的制備與特性鑒定
    2.4 ACP-ELISA方法建立及其靈敏度和特異性分析
    2.5 SBMV的dot-ELISA方法的建立
    2.6 SBMV的dot-ELISA方法的應(yīng)用
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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