菲牛蛭Poecilobdella manillensis Lesson,別名為馬尼拉醫(yī)蛭,是環(huán)節(jié)動(dòng)物門蛭綱無(wú)吻蛭目醫(yī)蛭科牛蛭屬動(dòng)物,藥材名金邊螞蟥。具有破血通經(jīng),逐瘀消癥之功效。以吸食脊椎動(dòng)物鮮血為生,其唾液腺分泌物中含有抗凝、抗栓、抗炎、麻醉等活性成分。在吸食期間,吸血蛭通過(guò)將大量生物活性物質(zhì)轉(zhuǎn)移到寄主體內(nèi),阻止傷口過(guò)早的止血和血液凝固,促使吸血蛭順利吸食血液,目前對(duì)于吸血蛭的研究主要集中在活性物質(zhì)的挖掘及藥理作用方面,而吸血蛭吸食階段抗凝活性的變化及吸食相關(guān)基因表達(dá)模式方面的研究較少。本研究從菲牛蛭藥材采收加工、吸食階段各組織抗凝血酶活性及吸食相關(guān)基因表達(dá)的變化規(guī)律等方面入手,為科學(xué)地進(jìn)行藥材采收加工和吸食相關(guān)基因表達(dá)模式提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:（1）在菲牛蛭藥材采收及不同加工方法中,采用凝血酶滴定法對(duì)不同加工方法、不同采收部位和體重等級(jí)樣品進(jìn)行抗凝血酶活性測(cè)定。結(jié)果表明,在不同加工方法對(duì)菲牛蛭抗凝血酶活性影響試驗(yàn)中,菲牛蛭鮮品經(jīng)冷凍干燥處理后其抗凝血酶活性最高,達(dá)到1303.56 U·g-1,而90 ℃烘干樣品最低,為15.44 U·g-1;在不同采收部位抗凝血酶活性比較... 

【文章來(lái)源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－１吸食階段對(duì)菲牛蛭組織抗凝血酶活性的影響??Ｆｉｇ．?３?

ＮＣＢ１在線對(duì)菲牛蛭ＰＭＥ基因編碼的氨基酸序列與其他物種Ｅｇｌｉｎ基因編碼的氨??基酸序列進(jìn)行比對(duì)分析，通過(guò)ＭＥＧＡ?７．０軟件，采用Ｔｅｓｔ?Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－Ｊｏｉｎｉｎｇ法構(gòu)建系??統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)（見(jiàn)圖４－５）。結(jié)果表明，菲牛蛭ＰＭＥ基因編碼氨基酸序列與已報(bào)道菲牛蛭??和歐洲醫(yī)蛭Ｅｇｌｍ基因編碼氨基酸序列同源性很高，與歐洲醫(yī)蛭??的Ｅｇｌｉｎ?Ｃ氨基酸序列的同源性為８１％，與其它科屬動(dòng)植物同源性均較低。從進(jìn)化樹(shù)??上可看出菲牛輕ＰＭＥ基因與歐洲醫(yī)輕ｗｅｄ／ｃ／ｎａｆｅ）、大麥（／／ｏｎｓｆｅｗｗ?ｖｗ／ｇａｒｅ）、??化胺鏈球菌（＊ＳＹｒｅｐｔｏｃｏｃｏ？／７＿ｙｏｇｅｎｅｉ’ＭＧＡＳ１５２５２）的Ｅｇｌｉｎｓ基因在進(jìn)化關(guān)系上較近；??同科屬之間Ｅｇｌｍｓ基因進(jìn)化比較保守。??３６??

３．３?ＰＭＥ表達(dá)量特征分析??３．３．１菲牛蛭ＰＭＥ基因的組織表達(dá)量特征分析??如圖４－７?（Ａ）所示，吸食前ＰＭＥ基因在菲牛蛭唾液腺、前吸盤、嗉囊、肌肉、??直五個(gè)組織中的相對(duì)表達(dá)量差異顯著（戶＜０．０５）。其中，嗉囊ＰＭＥ基因的相對(duì)表達(dá)??量是唾液腺的１３１２倍，顯著高于其他組織（Ｐ＜０．０５），前吸盤的相對(duì)表達(dá)量顯著低??于其他組織（Ｐ＜０．０５）。??吸食后ｌｄ，ＰＭＥ基因在菲牛睡五個(gè)組織中相對(duì)表達(dá)量差異顯著（Ｐ＜０．０５），如??圖４－７?（Ｂ）。其中嗉囊ＰＭＥ基因的相對(duì)表達(dá)量是唾液腺的７倍，顯著高于其他組織??（Ｐ＜０．０５），肌肉的相對(duì)表達(dá)量顯著低于其他組織（Ｐ＜０．０５）。??吸食后５ｄ，菲牛蛭五個(gè)組織的ＰＭＥ基因相對(duì)表達(dá)量差異顯著（Ｐ＜０．０５），唾液??腺ＰＭＥ基因的相對(duì)表達(dá)量顯著高于其他組織（尸＜０．０５），肌肉相對(duì)表達(dá)量顯著低于??其他組織（Ｐ＜０．０５）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]組織蛋白酶與中藥[J]. 劉楊,陳鳳彩,楊長(zhǎng)福,林昶.  中草藥. 2015(22)
[2]菲牛蛭近20年的研究進(jìn)展[J]. 潘雪,嚴(yán)亞萍,林亞明.  中西醫(yī)結(jié)合研究. 2015(04)
[3]水蛭的本草考證及現(xiàn)代研究[J]. 曹靜,趙文靜,旺建偉,袁帥,高長(zhǎng)久.  中醫(yī)藥信息. 2015(04)
[4]溫度、密度、喂食周期對(duì)菲牛蛭育苗影響的研究[J]. 程搏幸,劉飛,郭巧生,史紅專,李蒙蒙,盧昱希.  中國(guó)中藥雜志. 2015(06)
[5]中藥材產(chǎn)地加工的研究現(xiàn)狀及展望[J]. 陳林偉,秦昆明,朱艷匯,蔡皓,李偉東,蔡寶昌.  中國(guó)中藥雜志. 2015(04)
[6]菲牛蛭提取物體外抗腫瘤活性的研究[J]. 黃紅坤,鄭佳琳,王諾,黃小紅,許惠英,王弋,任海濤,鄺少松.  時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2014(12)
[7]4種水蛭粗提物抗凝活性及凍存時(shí)間對(duì)菲牛蛭抗凝活性影響[J]. 李軍,于翔,張健,張濤,龔元,金廣海.  水產(chǎn)科學(xué). 2014(09)
[8]不同溫度和密度對(duì)菲牛蛭越冬成活率的影響[J]. 張濤,于翔,龔元,宋文華,李軍,張健.  水產(chǎn)學(xué)雜志. 2014(04)
[9]螞蟥不同月齡口器組織學(xué)及組織化學(xué)研究[J]. 劉宏,郭巧生,史紅專,王嘉,李燕嫻.  中國(guó)中藥雜志. 2014(12)
[10]中藥材商品規(guī)格等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究現(xiàn)狀及幾個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題的商榷[J]. 楊光,曾燕,郭蘭萍,黃璐琦,金艷,鄭玉光,王永炎.  中國(guó)中藥雜志. 2014(09)

博士論文
[1]活血化瘀中藥抗腎間質(zhì)纖維化的實(shí)驗(yàn)及臨床研究[D]. 許慶友.河北醫(yī)科大學(xué) 2002

碩士論文
[1]水蛭對(duì)大鼠肺纖維化模型干預(yù)作用及機(jī)制的研究[D]. 李曉娟.河北醫(yī)科大學(xué) 2007
[2]水蛭桃仁煎劑對(duì)小鼠肝纖維化的治療作用及機(jī)理研究[D]. 陳姝.武漢科技大學(xué) 2006
[3]水蛭微粉治療早期腦梗死的臨床研究及對(duì)急性腦缺血保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 吳玉生.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2003
[4]腦出血后腦水腫機(jī)制及水蛭治療的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 何宇平.浙江大學(xué) 2001



本文編號(hào)：3509205