發(fā)布時(shí)間：2021-11-08 12:44

　　番茄灰霉病是一種嚴(yán)重的番茄真菌病害,主要是由灰霉Botrytis cinerea（B.cinerea）侵染引起,日常生產(chǎn)中番茄灰霉病會(huì)嚴(yán)重降低番茄的品質(zhì)和產(chǎn)量。化學(xué)防治易誘導(dǎo)B.cinerea的耐藥性,且污染環(huán)境和人畜健康;生物防治不會(huì)誘導(dǎo)耐藥,無(wú)環(huán)境污染,對(duì)植株本身和人畜健康友好,是防控灰霉病的極具研發(fā)潛力的途徑之一。粉紅粘帚霉菌Clonostachys rosea（C.rosea）作為粘帚霉屬的一員,可有效防控植物灰霉病、葉霉病等病害,被認(rèn)為是最具潛力的生防真菌之一。C.rosea在誘導(dǎo)番茄對(duì)灰霉病抗性的過(guò)程中,不同激素途徑是如何通過(guò)協(xié)同又拮抗、交叉又獨(dú)立的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑進(jìn)行調(diào)控的尚缺乏詳細(xì)報(bào)道,更缺乏對(duì)機(jī)制的深入探討。為了深入探索C.rosea在引發(fā)番茄對(duì)抗灰霉病的抗病性信號(hào)傳導(dǎo)中,C.rosea對(duì)不同激素調(diào)控路徑下番茄發(fā)病程度、關(guān)鍵防御酶系、第二信使調(diào)控、關(guān)鍵誘導(dǎo)抗性基因變化、葉綠體及保衛(wèi)細(xì)胞氣孔調(diào)節(jié)等的影響,深入分析這些抗性相關(guān)信號(hào)及抗病關(guān)鍵基因之間的互作關(guān)系與調(diào)控機(jī)制;本研究選擇在這一過(guò)程中起到重要調(diào)控作用的4種激素缺失突變體番茄品種Spr2（茉莉酸表達(dá)缺失）、nor（乙烯表... 

【文章來(lái)源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：126 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 研究的目的與意義
    1.2 番茄灰霉病的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展
        1.2.1 灰霉病的危害與現(xiàn)狀
        1.2.2 灰霉病的防治策略
        1.2.3 生防菌粉紅粘帚霉的研究進(jìn)展
    1.3 植物的抗病機(jī)制及誘導(dǎo)抗性研究進(jìn)展
        1.3.1 植物的內(nèi)生免疫抗病機(jī)制
        1.3.2 植物的獲得性免疫誘導(dǎo)抗病機(jī)制
    1.4 植物對(duì)抗病原菌的信號(hào)傳導(dǎo)
        1.4.1 JA途徑及相關(guān)信號(hào)的激活
        1.4.2 ET途徑及相關(guān)信號(hào)的激活
        1.4.3 SA途徑及相關(guān)信號(hào)的激活
        1.4.4 抗性轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中各路徑的互作
        1.4.5 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的ROS及 NO
        1.4.6 植物防御反應(yīng)的啟動(dòng)
    1.5 研究?jī)?nèi)容與技術(shù)路線
        1.5.1 研究?jī)?nèi)容
        1.5.2 研究技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)菌株
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 試驗(yàn)植株
        2.1.4 主要試劑和儀器
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 C.rosea的復(fù)壯及鑒定
        2.2.2 B.cinerea復(fù)壯及鑒定
        2.2.3 平板對(duì)峙試驗(yàn)
        2.2.4 孢子萌發(fā)抑制試驗(yàn)
        2.2.5 關(guān)鍵激素缺失時(shí)C.rosea抗灰霉病的廣譜抗性試驗(yàn)
        2.2.6 臺(tái)盼藍(lán)染色
        2.2.7 不同處理下超微結(jié)構(gòu)的透射電鏡觀測(cè)
        2.2.8 組織樣本前處理
        2.2.9 總蛋白含量測(cè)定
        2.2.10 PAL、PPO、CAT活性測(cè)定
        2.2.11 NO、H_2O_2、O_2~-含量測(cè)定
        2.2.12 RNA提取純化
        2.2.13 反轉(zhuǎn)錄
        2.2.14 抗性相關(guān)基因引物設(shè)計(jì)
        2.2.15 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.2.16 掃描電鏡樣本前處理
        2.2.17 氣孔變化測(cè)定分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 C.rosea與 B.cinerea的復(fù)壯及鑒定
        3.1.1 C.rosea目標(biāo)基因PCR及形態(tài)學(xué)鑒定
        3.1.2 B.cinerea形態(tài)學(xué)確認(rèn)及質(zhì)譜鑒定
    3.2 C.rosea與 B.cinerea的體外拮抗分析
        3.2.1 平板對(duì)峙分析
        3.2.2 C.rosea代謝產(chǎn)物對(duì)B.cinerea孢子萌發(fā)的抑制作用
    3.3 JA、ET、SA、GA對(duì)不同處理下的廣譜抗性的影響分析
        3.3.1 JA對(duì)灰霉病廣譜抗性的影響
        3.3.2 ET對(duì)灰霉病廣譜抗性的影響
        3.3.3 SA和 GA對(duì)灰霉病廣譜抗性的影響
    3.4 不同處理下的植物病理分析
        3.4.1 C.rosea抗番茄灰霉病的臺(tái)盼藍(lán)染色分析
        3.4.2 JA對(duì) C.rosea抗灰霉病葉片細(xì)胞及葉綠體超微結(jié)構(gòu)的影響
    3.5 C.rosea誘導(dǎo)抗性中激素與保護(hù)酶PAL、PPO、CAT調(diào)控關(guān)系
        3.5.1 JA與保護(hù)酶系調(diào)控關(guān)系研究
        3.5.2 ET與保護(hù)酶系調(diào)控關(guān)系研究
        3.5.3 SA與保護(hù)酶系調(diào)控關(guān)系研究
        3.5.4 GA與保護(hù)酶系調(diào)控關(guān)系研究
    3.6 C.rosea誘導(dǎo)抗性中激素與第二信使H_2O_2、NO和 O_2~-調(diào)控關(guān)系
        3.6.1 JA與第二信使調(diào)控關(guān)系研究
        3.6.2 ET與第二信使調(diào)控關(guān)系研究
        3.6.3 SA與第二信使調(diào)控關(guān)系研究
        3.6.4 GA與第二信使調(diào)控關(guān)系研究
    3.7 JA與關(guān)鍵基因調(diào)控關(guān)系研究
        3.7.1 JA與 WRKY的調(diào)控關(guān)系研究
        3.7.2 JA與 MAPK的調(diào)控關(guān)系研究
        3.7.3 JA與 Lexyl2 基因的調(diào)控關(guān)系研究
        3.7.4 JA與 atpA基因的調(diào)控關(guān)系研究
    3.8 不同處理下JA與氣孔運(yùn)動(dòng)調(diào)控關(guān)系研究
4 討論
    4.1 C.rosea對(duì) B.cinerea的體外互作拮抗特征
    4.2 C.rosea對(duì) B.cinerea體內(nèi)廣譜抗性及植物病理抗性特征
        4.2.1 關(guān)鍵激素對(duì)廣譜抗性的影響
        4.2.2 C.rosea誘導(dǎo)抗病的植物病理分析
    4.3 C.rosea誘導(dǎo)抗性中關(guān)鍵激素與保護(hù)酶的調(diào)控機(jī)制探討
        4.3.1 JA、ET、SA與抗病信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
        4.3.2 JA、ET、SA、GA與保護(hù)酶系的調(diào)控關(guān)系探討
    4.4 C.rosea誘導(dǎo)抗性中關(guān)鍵激素與第二信使調(diào)控機(jī)制探討
        4.4.1 第二信使與抗病信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
        4.4.2 JA、ET、SA、GA與第二信使的調(diào)控關(guān)系探討
    4.5 C.rosea誘導(dǎo)抗性中關(guān)鍵基因介導(dǎo)的JA通路分析
    4.6 不同處理下JA與氣孔調(diào)控的關(guān)系
    4.7 本試驗(yàn)的創(chuàng)新點(diǎn)
    4.8 展望
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[2]番茄抗葉霉病Cf-12候選基因的篩選及抗性應(yīng)答機(jī)制分析[D]. 薛東齊.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]外源水楊酸誘導(dǎo)RNAi與MAPK3級(jí)聯(lián)信號(hào)抗番前黃化曲葉病毒研究[D]. 李云洲.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[4]小麥孢囊線蟲(chóng)病的生防微生物鑒定及球孢白僵菌08F04菌株對(duì)土壤微生物多樣性的影響[D]. 張潔.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016

碩士論文
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[2]降解稻曲病菌菌核的真菌篩選及其作用機(jī)制分析[D]. 李丹陽(yáng).浙江大學(xué) 2016
[3]甘肅省紫花苜蓿根腐病的病原研究[D]. 安歡樂(lè).蘭州大學(xué) 2016
[4]六種中藥材內(nèi)生真菌的分離純化及其發(fā)酵產(chǎn)物活性研究[D]. 王帆.蘭州理工大學(xué) 2016
[5]粉紅粘帚霉防治果蔬灰霉病的研究[D]. 趙士振.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[6]樹(shù)莓葉果中水楊酸含量評(píng)價(jià)及抑菌性分析[D]. 王倩倩.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]粉紅粘帚霉誘導(dǎo)番茄果實(shí)對(duì)灰霉病的非寄主抗性研究[D]. 王瑞虎.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[8]茉莉酸甲酯對(duì)丹參酶活及酚酸化合物的含量和抗氧化活性影響[D]. 李靜.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[9]乙烯、MAPK和Ca～（2+）在UV-B輻射誘導(dǎo)蠶豆氣孔關(guān)閉中的作用及其與H2O2和NO的關(guān)系[D]. 王瑞斌.陜西師范大學(xué) 2007



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