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MaCreA參與蝗綠僵菌產(chǎn)孢方式的功能研究

發(fā)布時(shí)間:2021-11-07 07:38
  絲狀真菌無性產(chǎn)孢方式分為正常產(chǎn)孢和微循環(huán)產(chǎn)孢兩種方式,正常產(chǎn)孢是絲狀真菌常見的產(chǎn)孢方式,在營養(yǎng)生長的后期,由菌絲的頂端或者頂端兩側(cè)通過“出芽”方式產(chǎn)生孢子,而微循環(huán)產(chǎn)孢則是真菌在逆境環(huán)境下的一種生存機(jī)制,在逆境條件下,真菌的營養(yǎng)生長受限,孢子不再經(jīng)過菌絲延伸階段,而是由孢子或芽管直接產(chǎn)生孢子的現(xiàn)象。微循環(huán)產(chǎn)孢方式產(chǎn)生孢子的特點(diǎn)是產(chǎn)孢快、產(chǎn)孢量大、產(chǎn)生的孢子抗逆性高、孢子的生理狀況一致,基于這種產(chǎn)孢方式的優(yōu)點(diǎn),對微循環(huán)產(chǎn)孢方式進(jìn)行研究和利用,具有很好的生產(chǎn)實(shí)踐意義;染G僵菌,作為金龜子綠僵菌的變種,是蝗蟲專一性的病原真菌,也是昆蟲病原真菌中的模式生物;染G僵菌在營養(yǎng)條件改變的情況下可由正常產(chǎn)孢方式向微循環(huán)產(chǎn)孢方式轉(zhuǎn)換。在蝗綠僵菌中,存在與構(gòu)巢曲霉同源的CreA基因,我們將其命名為MaCreA基因,該基因?yàn)镃2H2型轉(zhuǎn)錄因子,開放閱讀框全長1131bp,由376個(gè)氨基酸構(gòu)成。前期研究中發(fā)現(xiàn),該基因缺失可導(dǎo)致菌株產(chǎn)孢量明顯下降。在本研究中,敲除菌株ΔMaCreA菌落變得蓬松,呈白色,菌絲發(fā)達(dá),產(chǎn)孢明顯推遲,且ΔMaCreA無法在營養(yǎng)條件的誘導(dǎo)下由正...

【文章來源】: 重慶大學(xué)重慶市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:78 頁

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
1 緒論
    1.1 引言
    1.2 研究背景
        1.2.1 絲狀真菌產(chǎn)孢概述
        1.2.2 CreA基因的前期研究
        1.2.3 Solexa測序技術(shù)
        1.2.4 CreA在蝗綠僵菌中的前期探究
    1.3 研究目的與意義
        1.3.1 研究目的
        1.3.2 研究意義
    1.4 研究內(nèi)容
    1.5 技術(shù)路線
    1.6 課題創(chuàng)新點(diǎn)
2 MaCreA功能研究
    2.1 材料
        2.1.1 供試菌株
        2.1.2 載體信息
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
        2.1.4 主要試劑及配方
    2.2 研究方法
        2.2.1 蝗綠僵菌產(chǎn)孢時(shí)間點(diǎn)的確定
        2.2.2 蝗綠僵菌菌絲樣品制備
        2.2.3 蝗綠僵菌RNA提取
        2.2.4 cDNA的獲得
        2.2.5 定量實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 MaLsdA敲除載體構(gòu)建
        2.2.7 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化
        2.2.8 大腸桿菌或農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化子驗(yàn)證
        2.2.9 根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備方法
        2.2.10 根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)化子驗(yàn)證
        2.2.11 蝗綠僵菌轉(zhuǎn)化方法
        2.2.12 蝗綠僵菌基因組微量提取
        2.2.13 二代測序方法
        2.2.14 測序數(shù)據(jù)分析方法
    2.3 結(jié)果和分析
        2.3.1 MaCreA基因的確定
        2.3.2 MaCreA影響蝗綠僵菌產(chǎn)孢
        2.3.3 RNA樣品及測序質(zhì)量鑒定
        2.3.4 差異表達(dá)基因分析
        2.3.5 MaLsdA基因的初步分析
    2.4 討論
3 全文小結(jié)及后續(xù)工作建議
    3.1 主要實(shí)驗(yàn)結(jié)論
    3.2 后續(xù)工作建議
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄A
    附錄B


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]我國利用真菌防治害蟲的歷史、進(jìn)展及現(xiàn)狀 [J]. 李增智.  中國生物防治學(xué)報(bào). 2015(05)
[2]太原市污灌區(qū)有機(jī)氯農(nóng)藥垂直分布特征及源解析 [J]. 廖小平,張彩香,趙旭,向青清,李佳樂.  環(huán)境科學(xué). 2012(12)
[3]農(nóng)藥誘導(dǎo)害蟲再猖獗機(jī)制 [J]. 吳進(jìn)才.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2011(04)
[4]昆蟲對農(nóng)藥抗性的研究進(jìn)展 [J]. 黃艷君,浦冠勤.  長江蔬菜. 2011(06)
[5]上海農(nóng)田土壤中六六六和滴滴涕污染分布狀況研究 [J]. 孟飛,張建,劉敏,吳永興.  土壤學(xué)報(bào). 2009(02)



本文編號:3481449

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