在擬南芥中,位于細(xì)胞質(zhì)膜上的受體類激酶（receptor-like kinase,RLKs）識(shí)別病原菌相關(guān)蛋白、啟動(dòng)防御反應(yīng)。FLS2（FLAGELLIN SENSING 2）作為最早克隆的RLKs,它能夠識(shí)別細(xì)菌鞭毛蛋白N端的由22個(gè)氨基酸組成的肽段（flg22）;BAK1（BRI1-ASSOCIATEDKINASE1）是 FLS2 的共受體（co-receptor）,它通常與 FLS2 或其他PRRs結(jié)合形成二聚體識(shí)別病原菌中的配體。雖然RLKs在擬南芥中的研究相對(duì)較為詳細(xì),但在作物中的研究才剛剛開始。本研究利用菜豆豆莢斑駁病毒（Beanpod mottlevirus,BPMV）誘導(dǎo)的基因沉默技術(shù)（BPMV-VIGS）分別沉默大豆GmFLS2和GmBAK1兩個(gè)基因。經(jīng)RT-PCR分析確證GmFLS2及GmBAK1的確被沉默后,對(duì)沉默株分別進(jìn)行表型觀察與鑒定。表型分析表明GmFLS2沉默株在表型上與空載體對(duì)照株無顯著區(qū)別,但沉默GmBAK1后嚴(yán)重影響植株的生長,植株出現(xiàn)嚴(yán)重矮化,葉片表面出現(xiàn)HR細(xì)胞死亡（Hypersensitive response cell death）,莖部出現(xiàn)... 

【文章來源】：浙江師范大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

植物模式受體與配體結(jié)合的方式poi

圖３．１?目的片段的擴(kuò)增??Ｆｉｇ．?３．１?Ｔｈｅ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＧｍＦＬＳ２??Ｍａｒｋｅｒ；?Ｇｌ：?Ｇｌｙｍａ０５ｇ２５８３０．１?基因片段，片段，片段大小為３８４ｂｐ。??

?■??圖３．?２?ＧｗｔＢＡＯ目的片段的擴(kuò)增??Ｆｉｇ．?３．２?Ｔｈｅ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＧｍＢＡＫｌ??注?Ｍ：?ＤＭ２０００ＤＮＡＭａｒｋｅｒ；?Ｇ３：?Ｇｌｙｍａｌ８ｇ４８１７０．１?基因片段，片段大小為?４７２ｂｐ；?Ｇ４：??Ｇｌｙｍａ０９ｇ３８２２０．１，基因片段片段大小為４８１ｂｐ。??（３）將得到的目的片段進(jìn)行酶切，連接，熱激轉(zhuǎn)化后構(gòu)建得到沉默載體。為??了確保得到的沉默載體正確，首先需進(jìn)行菌落ＰＣＲ驗(yàn)證初步確定目的片段已經(jīng)成??功的克隆至載體（圖３．３?Ａ，Ｃ）然后提取驗(yàn)證正確的單克隆菌落的質(zhì)粒進(jìn)行及酶切??驗(yàn)證分析再次證明沉默載體構(gòu)建成功（圖３．３?Ｂ，Ｄ）。綜合這兩方面的結(jié)果我們基??本可以確定已經(jīng)得到了正確的沉默載體，最后為了保證堿基序列沒有發(fā)生點(diǎn)突變，??將得到的載體送去基因公司測(cè)序

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3480548