近年來(lái)隨著工農(nóng)業(yè)的發(fā)展,已有大量農(nóng)田受到重金屬鎘（Cadmium,Cd）的污染,不僅對(duì)作物生長(zhǎng)造成損害,也會(huì)通過(guò)食物鏈危害人體健康。因此如何降低稻米Cd含量以實(shí)現(xiàn)稻米食用安全迫在眉睫。植物類受體蛋白激酶（Receptor-like protein kinases,RLKs）是一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,參與調(diào)節(jié)植物的發(fā)育、激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及抗逆性反應(yīng)。本文以RLK過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因水稻植株（OE）、RLK的RNAi轉(zhuǎn)基因水稻植株（Ri）及野生型水稻植株中花11（ZH11）為材料,研究了RLK（Os02g10100）在水稻響應(yīng)Cd脅迫應(yīng)答中的功能。主要研究結(jié)果如下:1、RLK生物信息學(xué)和時(shí)序表達(dá)特性分析生物信息學(xué)預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)RLK是疏水性蛋白且定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和質(zhì)膜上,存在2個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和信號(hào)肽;利用qRT-PCR方法對(duì)未經(jīng)過(guò)Cd處理的野生型水稻植株中RLK的時(shí)序表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)在苗期、分蘗期及穗分化期,RLK主要在葉片中表達(dá)。抽穗期、灌漿期及成熟期,RLK主要在稻穗及節(jié)中表達(dá)。2、RLK過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因水稻植株與RLK的RNAi轉(zhuǎn)基因水稻植株對(duì)Cd脅迫的響應(yīng)10 μmol·LCdCl₂

【文章來(lái)源】： 中國(guó)計(jì)量大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】：88 頁(yè)

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 前言
    1.2 Cd與水稻
        1.2.1 Cd脅迫對(duì)水稻的影響
        1.2.2 水稻響應(yīng)Cd脅迫的調(diào)節(jié)機(jī)制
    1.3 植物類受體蛋白激酶對(duì)非生物脅迫的響應(yīng)
        1.3.1 RLK的結(jié)構(gòu)特征和分類
        1.3.2 RLK參與非生物脅迫應(yīng)答
    1.4 研究意義與主要內(nèi)容
        1.4.1 研究目的與意義
        1.4.2 研究?jī)?nèi)容
2 RLK生物信息學(xué)和時(shí)序表達(dá)特征分析
    2.1 材料和方法
        2.1.1 生物信息學(xué)相關(guān)網(wǎng)站
        2.1.2 試驗(yàn)材料和試劑
        2.1.3 水稻植株的培養(yǎng)
        2.1.4 水稻樣品的采集
        2.1.5 水稻樣品總RNA的提取
        2.1.6 RNA樣品的逆轉(zhuǎn)錄
        2.1.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.1.8 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 生物信息學(xué)分析
        2.2.2 RLK的時(shí)序特異性表達(dá)
3 RLK過(guò)表達(dá)、RLK的RNAi轉(zhuǎn)基因水稻植株對(duì)Cd脅迫的響應(yīng)
    3.1 材料和方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 水稻植株的培養(yǎng)和處理
        3.1.3 水稻樣品采集
        3.1.4 轉(zhuǎn)基因株系鑒定
        3.1.5 葉綠素含量測(cè)定
        3.1.6 MDA和H₂O₂含量測(cè)定
        3.1.7 POD、SOD、CAT活性測(cè)定
        3.1.8 數(shù)據(jù)處理與分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 轉(zhuǎn)基因株系鑒定
        3.2.2 表型觀察
        3.2.3 葉綠素含量
        3.2.4 MDA和H₂O₂含量
        3.2.5 POD、CAT、SOD活性
    3.3 討論
4 過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因水稻植株與的RNAi轉(zhuǎn)基因水稻植株體內(nèi)的Cd積累特征分析
    4.1 材料和方法
        4.1.1 試驗(yàn)材料和試劑
        4.1.2 水稻植株的培養(yǎng)和處理
        4.1.3 水稻植株Cd含量測(cè)定
        4.1.4 水稻根和地上部亞細(xì)胞Cd含量測(cè)定
        4.1.5 水稻樣品總RNA的提取與逆轉(zhuǎn)錄
        4.1.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        4.1.7 數(shù)據(jù)處理與分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 水稻根、莖和葉中Cd含量分析
        4.2.2 水稻根和地上部亞細(xì)胞中Cd含量分析
        4.2.3 RLK與Cd積累轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因的表達(dá)分析
    4.3 討論
5 iTRAQ技術(shù)篩選水稻植株中RLK下游基因
    5.1 材料和方法
        5.1.1 試驗(yàn)材料和試劑
        5.1.2 水稻植株的培養(yǎng)和處理
        5.1.3 水稻樣品總RNA的提取與逆轉(zhuǎn)錄
        5.1.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        5.1.5 數(shù)據(jù)處理與分析
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 差異蛋白數(shù)
        5.2.2 差異蛋白GO富集分析
        5.2.3 差異蛋白KEGG富集分析
        5.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證
    5.3 討論
6 研究總結(jié)與展望
    6.1 研究總結(jié)
    6.2 論文創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 研究展望
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3480110