【目的】建立甘蔗線條花葉病毒（Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV）的RT-LAMP檢測方法,為SCSMV的檢測提供技術支持。【方法】根據(jù)甘蔗線條花葉病毒外殼蛋白基因的保守序列設計特異引物,優(yōu)化RT-LAMP的反應條件,對比分析RT-LAMP的檢測靈敏度和特異性;并在RT-LAMP反應產(chǎn)物中加入SYBR GREEN I進行可視化檢測,方便快速判定結果。【結果】成功建立了一種用于檢測SCSMV的RT-LAMP方法,可在60 ～ 63 ℃下60 min完成對SCSMV的檢測,且具有較高的靈敏度,比傳統(tǒng)RT-PCR高100 倍,最低檢測RNA濃度為167.9×10^-5 ng。此外,該方法具有較高的特異性,可特異檢測SCSMV�！窘Y論】建立了一種靈敏、簡便、快速的SCSMV RT-LAMP檢測方法并用于田間甘蔗樣品的檢測。 

【文章來源】：廣東農(nóng)業(yè)科學. 2020,47(04)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 Materials and methods
    1.1 Source of viruses
    1.2 Total RNA extraction
    1.3 Primer designed for RT-LAMP
    1.4 Virus detection by RT-PCR
    1.5 RT-LAMP assay
    1.6 Specificity of RT-LAMP
    1.7 Sensitivity comparison between RT-LAMP and RT-PCR
    1.8 Detection of field samples by RT-LAMP
2 Results and analysis
    2.1 Reaction condition optimization for SCSMV detection by one-step RT-LAMP assay
    2.2 Specificity of RT-LAMP detection of SCSMV
    2.3 Sensitivity of RT-LAMP amplification
    2.4 Detection of SCSMV in field samples by RT-LAMP
3 Discussion
4 Conclusion


【參考文獻】：
期刊論文
[1]RT-LAMP技術檢測菜豆莢斑駁病毒的研究[J]. 聞偉剛,楊翠云,崔俊霞,張穎.  植物保護. 2010(06)
[2]侵染甘蔗的高粱花葉病毒遺傳多樣性分析[J]. 許東林,周國輝,沈萬寬.  作物學報. 2008(11)
[3]侵染華南地區(qū)甘蔗的SCMV遺傳多樣性初探[J]. 許東林,周國輝.  植物病理學報. 2005(S1)



本文編號：3474361