馬鈴薯是世界上最重要的非谷類糧食作物,對國家的糧食安全起重要作用。病害是威脅馬鈴薯產(chǎn)量最主要的原因之一,馬鈴薯黃萎�。≒otato verticillium wilt）是一種真菌性病害,最高可造成每公頃馬鈴薯產(chǎn)量損失5 t-12 t。在生產(chǎn)上,應(yīng)用抗病品種是防控病害最經(jīng)濟(jì)有效的手段。挖掘抗病基因、開發(fā)連鎖標(biāo)記可加速抗病品種的選育。但到目前為止,關(guān)于馬鈴薯黃萎病抗病基因定位和分子標(biāo)記開發(fā)的相關(guān)研究較少。本研究利用二倍體馬鈴薯種間雜種V67為母本,與C545雜交構(gòu)建了BC₁抗性分離群體,獲得的研究結(jié)果如下:1、BC₁群體表型鑒定:經(jīng)過多輪盆栽接種鑒定與莖段培養(yǎng)相結(jié)合,獲得175份表型準(zhǔn)確的單株,其中87個為抗病后代,88個為感病后代,抗感分離比符合1:1。2、Ve基因的定位:重新選擇了23個抗病單株組建抗病混合池,22個感病單株組建感病混合池,進(jìn)行DNA-Seq測序分析,繪制了Δ（SNP-index）分布圖,仍然將馬鈴薯黃萎病抗性基因定位于第五號染色體0 Mb-4.5 Mb的范圍,與本課題組前期的定位結(jié)果一致。在定位區(qū)段內(nèi)重新開發(fā)多態(tài)性標(biāo)記,共篩... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

接種黃萎病菌株Vd18后親本和后代表型CD

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文26以下的群體植株認(rèn)定為抗病植株，以上則為感病植株。共獲得175份表型確定的單株，抗病單株87個，感病單株88個（附錄1），后代中抗、感病單株分離比為1:1，卡方檢驗(yàn)值為0.005，小于3.84，符合一對基因控制下的孟德爾分離規(guī)律（圖3）。表明BC1群體中存在控制表型分離的抗黃萎病基因。圖2莖段培養(yǎng)法鑒定表型培養(yǎng)皿中黑色菌落是通過莖段培養(yǎng)后長出的菌斑；下方數(shù)字代表材料編號，“R”表示在該輪中表型鑒定為抗，“S”表示在該輪中表型鑒定為感。Fig2PhenotypicidentificationbystemsegmentcultureTheblackcolonyintheculturedishistheplaquethatgrowsafterthestemsegmentiscultured;thenumberbelowrepresentsthematerialnumber,“R”representsthephenotypicisresistanceand“S”representsthephenotypicissensitivityinthisround.

馬鈴薯抗黃萎病Ve基因的精細(xì)定位與連鎖標(biāo)記開發(fā)273.2基因組DNA的提取與檢測本實(shí)驗(yàn)中175份群體單株的葉片基因組DNA采用改良版快速小量提取法（CTAB）分離，隨機(jī)選擇10個單株材料的DNA用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測其質(zhì)量，結(jié)果表明主條帶清晰無降解，繼續(xù)使用紫外分光光度計對DNA的OD值進(jìn)行檢測，樣品DNA的在OD260時有明顯吸收峰，OD260/OD280值在1.8左右，以上結(jié)果表明所提的DNA質(zhì)量較好，滿足本實(shí)驗(yàn)研究要求（圖4）。M12345678910圖4瓊脂糖凝膠檢測葉片基因組DNAM：Marker，1-10：隨機(jī)樣品。Fig.4DetectionofleafgenomicDNAbyagarosegelM:Marker,1-10:Randomsamples.M12345678910圖3表型統(tǒng)計結(jié)果A1-A5：多輪重復(fù)下各單株菌斑平均數(shù)，B：基于菌斑平均數(shù)統(tǒng)計抗并感病單株數(shù)量。Fig.3ResultsofphenotypicstatisticsA1-A5:Averagenumberofplaqueofeachindividualundermultipleroundsofrepetition,B:Statisticsofthenumberofdiseaseresistantandsusceptibleindividualsbasedontheaveragenumberofplaque。BA5A2A3A1A4

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]我國馬鈴薯病蟲害發(fā)生現(xiàn)狀與防控策略[J]. 高玉林,徐進(jìn),劉寧,周倩,丁新華,詹家綏,成新躍,黃劍,魯宇文,楊宇紅.  植物保護(hù). 2019(05)
[2]防治馬鈴薯黃萎病芽胞桿菌種子處理劑的研制及應(yīng)用[J]. 趙衛(wèi)松,李社增,鹿秀云,郭慶港,王培培,蘇振賀,張曉云,馬平.  中國生物防治學(xué)報. 2019(05)
[3]內(nèi)蒙古自治區(qū)主栽馬鈴薯品種對黃萎病的抗性鑒定[J]. 溫晨陽,趙英杰,東保柱,孟煥文,趙君,周洪友.  植物保護(hù)學(xué)報. 2018(06)
[4]中國七省(自治區(qū))馬鈴薯黃萎病病情及優(yōu)勢病原菌致病力分析[J]. 李社增,周洪友,鹿秀云,年冠臻,郭慶港,趙衛(wèi)松,東保柱,申建芳,王培培,張曉云,閆磊,馬平.  植物病理學(xué)報. 2018(05)
[5]陜北山旱地區(qū)馬鈴薯黃萎病防治的拌種藥劑篩選[J]. 韓升高,張治軍,任正軍,葉彩萍.  陜西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(06)
[6]馬鈴薯遺傳育種研究:現(xiàn)狀與展望[J]. 徐建飛,金黎平.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(06)
[7]馬鈴薯黃萎病與枯萎病防治[J]. 張治軍.  西北園藝(蔬菜). 2016(06)
[8]近幾年我國馬鈴薯晚疫病流行特點(diǎn)分析與監(jiān)測建議[J]. 黃沖,劉萬才.  植物保護(hù). 2016(05)
[9]馬鈴薯黃萎病田間藥劑防治試驗(yàn)報告[J]. 劉普明.  農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2016(13)
[10]我國馬鈴薯病蟲害防治現(xiàn)狀與前景展望[J]. 任彬元,楊普云,趙中華.  中國植保導(dǎo)刊. 2015(10)

博士論文
[1]向日葵響應(yīng)黃萎病菌侵染的轉(zhuǎn)錄組分析及抗病相關(guān)基因挖掘[D]. 郭樹春.內(nèi)蒙古大學(xué) 2017
[2]大麗輪枝菌Vd991致病機(jī)理研究[D]. 何獻(xiàn)君.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]茄科物種全基因組抗病基因鑒定及其進(jìn)化分析[D]. 魏春華.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]棉花抗黃萎病種質(zhì)鑒定及抗病相關(guān)基因表達(dá)分析[D]. 郭寶生.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[5]茄子黃萎病防衛(wèi)相關(guān)microRNA的鑒定及miR482、StoL13a的功能研究[D]. 楊柳.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[6]海島棉抗病相關(guān)ERF轉(zhuǎn)錄因子的克隆與鑒定[D]. 孟憲鵬.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009

碩士論文
[1]水茄抗黃萎病相關(guān)StWRKY-1基因的克隆與功能分析[D]. 李笑.揚(yáng)州大學(xué) 2018
[2]三種生物制劑對馬鈴薯兩種主要土傳病害防治及土壤微生物和肥力影響的研究[D]. 武建華.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[3]馬鈴薯抗黃萎病Ve基因的定位與連鎖標(biāo)記開發(fā)[D]. 肖睿.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[4]棉花抗黃萎病相關(guān)基因GbSTK和GhGST的遺傳轉(zhuǎn)化與表達(dá)研究[D]. 侯純純.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]向日葵黃萎病發(fā)生規(guī)律及向日葵抗黃萎病機(jī)制的研究[D]. 曹雄.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[6]野生茄子黃萎病抗性相關(guān)基因的克隆與表達(dá)研究[D]. 殷玥.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[7]河北省馬鈴薯病害調(diào)查及主要真菌病害研究[D]. 彭學(xué)文.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號：3467720