熒光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens）是一種具有巨大應(yīng)用潛力的植物病害生防細(xì)菌和植物根際促生菌,它們分布廣泛并且能夠適應(yīng)多種生態(tài)環(huán)境。但是,熒光假單胞菌在制劑生產(chǎn)加工過程中不耐高溫,極易失活,產(chǎn)業(yè)化難度大且其制劑的貨架期短。這限制了熒光假單胞菌的制劑生產(chǎn)和有效應(yīng)用。因此,研究提高熒光假單胞菌耐熱性的方法及其機(jī)理探索對(duì)于熒光假單胞菌未來的商業(yè)化應(yīng)用具有重要的理論價(jià)值和重大的產(chǎn)業(yè)化意義。用短時(shí)的逆環(huán)境脅迫來提高生物防治細(xì)菌的生防能力和抗逆性的方法已有報(bào)道,但未見針對(duì)熒光假單胞菌的研究。由我們實(shí)驗(yàn)室分離、篩選的熒光假單胞菌SN15-2展現(xiàn)出了良好的生防能力,其代謝產(chǎn)物對(duì)青枯勞爾氏菌等多種病原菌具有良好的抑制效果。為了提高熒光假單胞菌SN15-2的抗逆性,我們?cè)跓晒饧賳伟鶶N15-2生長到穩(wěn)定期時(shí)用酸脅迫,氧化脅迫和鹽脅迫對(duì)其進(jìn)行短時(shí)間的刺激,觀察測(cè)定不同處理方式對(duì)熒光假單胞菌SN15-2的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),用300 mM NaCl,25 mM H2O2分別脅迫45 min和30 min后能夠不同程度的提高熒光假單胞菌SN15-2的耐熱性,而酸脅迫不能提高熒光假單胞菌S... 

【文章來源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２?ＴＭＴ技術(shù)流程圖??Ｆｉｇ．?１．２?ＴＭＴ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?ｆｌｏｗ?ｃｈａｒｔ??

?１２?１６?２０?２４?２８?３２?３６??Ｔｉｍｅ?（ｈ）??圖２．１熒光假單胞菌ＳＮ１５－２在不同的培養(yǎng)溫度下的生長曲線??Ｆｉｇ．?２．１?Ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｐ．?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ?ＳＮ１５－２?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｕｌｔｕｒｅ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ??２．２．２鹽脅迫對(duì)熒光假單胞菌ＳＮ１５－２生長的影響??鹽脅迫對(duì)熒光假單胞菌ＳＮ１５－２生長的影響如圖２．２所示。對(duì)照組的菌含量為??４．５７ｘｌ〇１３ｃｆＷｍＬ，隨著ＮａＣｌ濃度的增加，熒光假單胞菌ＳＮ１５－２的菌含量有所下降，在??ＮａＣｌ?濃度為?１７０ｍＭ?時(shí)，菌含量為?６．４３＞＜ｌ〇１２ｃｆＵ／ｍＬ、３１０ｍＭ?時(shí)，菌含量為?４．７３＞＜１０１Ｑ??ｃｆｉｉ／ｍＬ、當(dāng)ＮａＣｌ濃度達(dá)到４５０?ｍＭ時(shí)，菌含量下降到５．３９ｘ１０９?ｃｆｌｉ／ｍＬ。隨著培養(yǎng)時(shí)間??的延長，菌含量有輕微降低，但是比較各個(gè)時(shí)間點(diǎn)下ＮａＣｌ脅迫適應(yīng)后的菌含量基本保??持不變，可以看到逆環(huán)境適應(yīng)的時(shí)間長短對(duì)菌含量的影響不大。??Ｈ〇ｍＭ?Ｓｌ７０ｍＭ?皿?２４０ｍＭ?Ｓ?３１?ＯｍＭ?Ｂ３８０ｍＭ?０?４５ＯｍＭ??２ｓ?１６?－１?ａ?ａ??？ｉｂＡ＾?ｊｉ＾ｂｃ?ｉｉＴｂｂｃ?ｊｘ＾ｂ??１１?ｉ?ｉ??１５?３０?４５?６０??Ｔｉｍｅ（ｍｉｎ）??圖２．２鹽脅迫下熒光假單胞菌ＳＮ１５－２菌含量變化??Ｆｉｇ．?２．２?Ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?Ｐ．?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ?ＳＮ１５－２?ｕｎｄｅｒ?ｓａｌｔ?ｓｔｒｅｓｓ?ａｄａ

Ｆｉｇ．?２．４?Ｃｈａｎｇｅｓ?ｉｎ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ?ＳＮ１５－２?ｕｎｄｅｒ?ａｃｉｄ?ｓｔｒｅｓｓ?ａｄａｐｔａｔｉｏｎ??２．２．５鹽脅迫適應(yīng)對(duì)熒光假單胞菌ＳＮ１５－２耐熱性的影響??不同濃度的鹽脅迫適應(yīng)對(duì)熒光假單胞菌ＳＮ１５－２耐熱性的影響如圖２．５所示�？梢�??看到，在加入２４０ｍＭ及更大濃度的ＮａＣｌ時(shí)，熒光假單胞菌ＳＮ１５－２的損傷指數(shù)（ＤＩ）更??小，例如在脅迫適應(yīng)時(shí)間為３０ｍｉｎ時(shí)，對(duì)照組的ＤＩ值為３．５９、鹽濃度為１７０ｍＭ的ＤＩ??值為３．１８、加入３１〇１１＾燦（：１時(shí)〇１值為１．９１、當(dāng)鹽濃度達(dá)到４５〇１１＾時(shí)０１值則為２．５３。??說明經(jīng)過鹽脅迫適應(yīng)的熒光假單胞菌ＳＮ１５－２的耐熱性有所提高，其中加入３１０ｍＭＮａＣｌ??脅迫適應(yīng)４５?ｍｉｎ后損傷指數(shù)值最低，效果最明顯。??ＨＯｍＭ?Ｂ１７０ｍＭ?Ｅ２４０ｍＭ?目３１０ｍＭ?Ｂ３８０ｍＭ?Ｂ４５０ｍＭ??４?－ｉ??ａ?ａ?ａ?ａ??５?＊ｂ?Ｉ?ｉ?ｃ?Ｉ??ｉｎ?ｌｉｉｌ?１１?ｌｉ??１５?３０?４５?６０??Ｔｉｍｅ（ｍｉｎ）??圖２．５鹽脅迫適應(yīng)后熒光假單胞菌的損傷指數(shù)??Ｆｉｇ．?２．５?Ｄａｍａｇｅ?ｉｎｄｅｘ?ｏｆ?Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ?ａｆｔｅｒ?ｓａｌｔ?ｓｔｒｅｓｓ?ａｄａｐｔａｔｉｏｎ??

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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本文編號(hào)：3458485