由Acidovorax oryzae引起的水稻細(xì)菌性褐條病（Bacterial brown stripe）是一種重要的細(xì)菌病害,對水稻生產(chǎn)造成了較嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。噬菌體作為細(xì)菌的天敵,其自身所編碼的裂解系統(tǒng)在特異且高效地裂解細(xì)菌細(xì)胞壁殺死細(xì)菌的過程中發(fā)揮著重要作用。因此,深入開展水稻細(xì)菌性褐條病菌噬菌體裂解系統(tǒng)的研究,不僅為全面揭示其裂解機(jī)制提供了新的視野,也為利用噬菌體裂解系統(tǒng)防控水稻細(xì)菌性褐條病菌提供了新途徑。首先,在實(shí)驗(yàn)室前期獲得水稻褐條病菌噬菌體AP1并測定其基因組的基礎(chǔ)上,通過生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)了兩個相鄰且與裂解相關(guān)的基因:穿孔素（HolAP）和裂解素（LysAP）,并且HolAP位于LysAP上游。對HolAP進(jìn)行保守功能域分析發(fā)現(xiàn),HolAP屬于噬菌體穿孔素蛋白Phage_holin₂₃ superfamily家族成員;蛋白跨膜預(yù)測結(jié)果顯示,HolAP具有一個跨膜區(qū),并且N-端分布于細(xì)胞膜外,C-端分布于細(xì)胞質(zhì)內(nèi),具有Ⅲ型穿孔素的結(jié)構(gòu)特征。對LysAP進(jìn)行保守功能域分析,發(fā)現(xiàn)其屬于噬菌體裂解素蛋白家族Lyso... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

幾種主要穿孔素的拓?fù)?br>

圖１．１幾種主要穿孔素的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)（Ｒｅｂｅｃｃａ?ｅｔ?ａ丨．，２０１１）。??圖?１．１?Ｔｏｐｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｍａｊｏｒ?ｈｏｌｉｎｓ．??研宄表明，穿孔素具有兩種作用：一是在噬菌體感染后期，在細(xì)胞膜上大量積累，??隨后以寡聚體形式在細(xì)胞膜上形成允許裂解素穿過的跨膜孔；二是通過引起細(xì)胞膜上??質(zhì)子動力勢的變化，引起細(xì)胞膜去極化從而精細(xì)調(diào)控細(xì)胞裂解觸發(fā)的時間點(diǎn)（Ｔａｅｈｙｕｎ??ｅｔ?ａｌ．，?２００６；?Ｔａｅｈｙｕｎ?ｅｔ?ａｌ．，?２００７）〇??１．３．２抗穿孔素??大腸桿菌Ｘ噬菌體穿孔素Ｓ基因具有雙起始基序，可以編碼兩種蛋白質(zhì)：抗穿孔??素Ｓ１０７和少兩個氨基酸的穿孔素Ｓ１０５�？勾┛姿兀樱保埃繁却┛姿兀樱保埃刀嗑幋a兩個氨??基酸：Ｍｅｔ和Ｌｙｓ。由于Ｌｙｓ帶電荷，在噬菌體感染前期，它可以阻止穿孔素的第一??個跨膜區(qū)域翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜上，此時，穿孔素沒有裂菌活性。當(dāng)膜電位發(fā)生變化時，引??起細(xì)胞膜去極化，這時，抗穿孔素Ｓ１０７的第一個跨膜區(qū)域就能翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜上被激??活，并且大量聚集形成跨膜孔，造成細(xì)菌死亡（圖１．２）。因此，抗穿孔素的作用就??是拮抗穿孔素，防止過早發(fā)生裂解。??Ｓ１０７?Ｓ１０５?Ｓ１０５ｍｔｍ〇１）??

１．３．４依賴于穿孔素的裂解系統(tǒng)??大腸桿菌Ｘ噬菌體裂解系統(tǒng)是最典型的依賴于穿孔素的裂解系統(tǒng)。??大腸桿菌Ｘ噬菌體的裂解模塊包含四個基因：Ｓ，Ｒ，Ｒｚ和Ｒｚｌ，總共編碼５個??蛋白。Ｓ基因具有雙起始基序，可以從第一個蛋白起始位點(diǎn)開始編碼Ｓ１０７，含１０７??個氨基酸的抗穿孔素，也可以從第三個蛋白起始位點(diǎn)開始編碼Ｓ１０５，含１０５個氨基??酸的穿孔素，且這兩個蛋白在功能上相互拮抗（Ｂｌａｓｉ?ｅｔ?ａｌ．，?１９８９；?Ｂｌａｓｉ?ｅｔ?ａＬ，?１９９０）。Ｒ??基因編碼裂解素，其分子量大小為１８?ｋＤａ，該裂解素在胞內(nèi)合成，并且具有水解細(xì)??菌細(xì)胞壁肽聚糖的活性（Ｂｉｅ’ｎｋｏｗｓｋａ－Ｓｚｅｗｃｚｙｋ?ｅｔ?ａｌ．，１９８１）。??６??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]兩種水稻主要病原細(xì)菌噬菌體的分離、鑒定和特征化研究[D]. 王麗.浙江大學(xué) 2016



本文編號：3424985