小菜蛾是抗藥性極強的世界性害蟲,不僅對多種化學(xué)殺蟲劑產(chǎn)生抗性,也是第一個報道對Bacillus thuringiensis（Bt）產(chǎn)生田間抗性的昆蟲,其高抗性給小菜蛾的防治帶來了很大的壓力。近年來的研究表明一些昆蟲的腸道微生物與宿主的Bt抗性有關(guān)。我們前期研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)小菜蛾的腸道微生物與宿主的生長發(fā)育密切相關(guān),但關(guān)于小菜蛾腸道微生物與宿主Bt抗性之間的關(guān)系還不清楚。本研究在前期工作的基礎(chǔ)上,進一步深入分析腸道微生物介導(dǎo)小菜蛾Bt抗性的效應(yīng),為小菜蛾的生物防治提供新的視角和思路。主要研究結(jié)果如下:1、腸道細菌介導(dǎo)小菜蛾對Bt敏感性的變化。實驗發(fā)現(xiàn),無腸道菌3齡小菜蛾幼蟲回復(fù)全部腸道細菌（常規(guī)飼養(yǎng)小菜蛾腸道內(nèi)容物經(jīng)LB培養(yǎng)基富集培養(yǎng)后的混合菌株）能夠降低Bt8010的殺蟲活性,且單菌株回復(fù)結(jié)果表明,不同腸道細菌介導(dǎo)小菜蛾Bt敏感性變化的效應(yīng)不同。粘質(zhì)沙雷氏菌Serratia marcescens-IAE6（Sm PXG6）與Bt8010菌株共同作用可以提高Bt8010的殺蟲速率,其與Bt8010存在協(xié)同效應(yīng),而腸桿菌Enterobacter sp.IAE5（Eb PXG5）則降低了小菜蛾對... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

防腐劑平板抑菌測試Fig.2-1BacteriostaticeffcetofantisepticondifferentbacteriaA：Bt8010strain；B：腸桿菌Enterobactersp.IAE5；C：腸球菌Enterococcussp.；D：粘質(zhì)沙雷氏菌Serratiamarcescens-IAE6數(shù)字代表防腐劑濃度，由小到大依次為0%、0.025%、0.05%、0.1%、0.2%、0.4%Thenumberrepresentsthepreservativeconcentration,fromsmalltolargeis0%、0.025%、0.05%、

第二章腸道細菌對小菜蛾Bt敏感性的影響效應(yīng)圖2-2小菜蛾腸道菌檢測Fig.2-2DetectionofgutbacteriainP.xylostellaA：LB培養(yǎng)基LBmedium；B：M：DNAmarkerDL2000；1：陰性對照Negativecontrol；2：第三次漂洗卵的水Waterforthethirdtimetorinsetheeggs；3：卵研磨液Egggrindingfluid；4：陽性對照Positivecontrol；C：M：DNAmarkerDL10000；1-3：SLss腸道內(nèi)容物SLssgutcontents；4：FZss腸道內(nèi)容物FZssgutcontents2.3.3腸道富集菌群及單一EbPXG5菌株降低小菜蛾的Bt敏感性與取食無菌飼料的對照相比，取食含全部腸道細菌Gutbacteria（常規(guī)飼養(yǎng)小菜蛾腸道內(nèi)容物經(jīng)LB培養(yǎng)基富集培養(yǎng)后的混合菌株）和含EbPXG5菌株的飼料對小菜蛾幼蟲存活率沒有影響（表2-1），且取食含Bt8010+EbPXG5菌株和含Bt8010+全部腸道細菌（Bt8010+Gutbacteria）飼料的小菜蛾幼蟲在24h、36h、48h和60h四個檢測點的存活率顯著高于單一取食含Bt8010菌株飼料的小菜蛾（表2-1），腸道細菌延長了小菜蛾幼蟲的生存時間。有意思地是，取食含Bt8010+EbPXG5飼料的小菜蛾幼蟲在36h、60h和72h三個檢測點的存活率分別為90%、25%和18%，均高于取食含Bt8010+Gutbacteria飼料的小菜蛾幼蟲同時刻監(jiān)測點的存活率82%、13%和3%（表2-1），回復(fù)單一腸道細菌EbPXG5的效果比回復(fù)全部腸道細菌的效果好，表明小菜蛾腸道細菌EbPXG5菌株在影響宿主Bt敏感性的過程中發(fā)揮重要作用。18

腸道細菌對小菜蛾Bt敏感性的影響2.3.7腸道細菌對Bt8010的體外抑制效應(yīng)利用牛津杯實驗分析發(fā)現(xiàn)，除陽性對照Kna外，其余樣品處理均未見抑菌圈，實驗所用24株腸道細菌包括EbPXG5菌株（圖2-7A）對Bt8010菌株的生長均無抑制作用。圖2-7小菜蛾腸道細菌對Bt8010菌株的對抗培養(yǎng)分析Fig.2-7AnalysisontheresistanceofP.xylostellagutbacteriatoBt8010strainA：1：CK（Kna）；2：SmPXG6；3：EbPXG5；4：Cedeceasp.；5：Pseudomonasfulva；6：Lysinibacillusmacroides；7：Enterococcussp.B：1：CK（Kna）；2：Corynebacteriumpollutisoli；3：Enterobactergallinarum；4：Corynebacteriumxerosis；5：Kocuriapalustris；6：Carnobacteriummaltaromaticum；7：MicrobacteriumarborescensC：1：CK（Kna）；2：Pantoeaagglomerans；3：Enterobacteraerogenes；4：Raoultellaornithinolytica；5：Enterobactercancerogenus；6：Arthrobactersp.；7：EnterobacterasburiaeD：1：CK（Kna）；2：Brachybacteriumsp.；3：Staphylococcussp.；4：Carnobacteriumgallinarum；5：Enterobactersoli；6：Enterobacterludwigii；7：Lysinibacillussp.23

【參考文獻】：
期刊論文
[1]白蟻腸道共生微生物的作用:酵母,一個“隱身”的特別菌群（英文）[J]. Sameh Samir Ali,Rania Al-Tohamy,孫建中,吳建,黃淼.  微生物學(xué)報. 2018(06)
[2]抗生素和腸道細菌對小菜蛾適合度的影響[J]. 沈金紅,王倩,夏曉峰,尤民生.  微生物學(xué)報. 2018(06)
[3]斜紋夜蛾幼蟲腸道細菌分離鑒定及其功能初步分析[J]. 孫博通,藍波妙,王倩,夏曉峰,尤民生.  生物資源. 2017(04)
[4]蘇云金芽胞桿菌V4菌株cry殺蟲基因的鑒定、表達及殺蟲活性分析[J]. 何寶楠,李海濤,劉榮梅,王博,高繼國.  生物技術(shù)通報. 2014(09)
[5]小菜蛾幼蟲中腸細菌的分離鑒定[J]. 夏曉峰,鄭丹丹,林海蘭,尤民生.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2013(03)
[6]電轉(zhuǎn)化法將luxAB基因?qū)攵舅莉缃到饩戮甑难芯縖J]. 王昀璐,花日茂,唐欣昀,李瑞雪,張君,王道勝.  環(huán)境科學(xué)學(xué)報. 2011(01)
[7]蘇云金芽孢桿菌殺蟲機理及害蟲對其抗性機制的研究進展[J]. 李怡萍,梁革梅,仵均祥,陳豪,馬康生,吳孔明,郭予元.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2010(09)
[8]幾種蠟樣芽胞桿菌群微生物的選擇性培養(yǎng)基比較[J]. 周幗萍,胡曉敏,竇建琳,袁志明.  武漢工業(yè)學(xué)院學(xué)報. 2009(04)
[9]昆蟲對Bt殺蟲蛋白的抗性機制及治理策略[J]. 徐艷聆,王振營,何康來,白樹雄.  植物保護學(xué)報. 2006(04)
[10]轉(zhuǎn)Bt基因玉米對亞洲玉米螟的抗性評價[J]. 何康來,王振營,文麗萍,白樹雄,周大榮.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2004(06)

博士論文
[1]小菜蛾中腸微生物多樣性及其功能研究[D]. 夏曉峰.福建農(nóng)林大學(xué) 2014
[2]蘇云金桿菌Cry毒素對褐飛虱無毒原因分析及對褐飛虱有效新型Bt Cry毒素的改造[D]. 邵恩斯.福建農(nóng)林大學(xué) 2013

碩士論文
[1]小菜蛾腸道細菌的來源及傳播途徑[D]. 艾倩倩.福建農(nóng)林大學(xué) 2018
[2]小菜蛾腸道菌群對宿主生長發(fā)育的影響[D]. 林美玲.福建農(nóng)林大學(xué) 2014



本文編號：3424383