棉花黃萎病是一種土傳病害,在我國主要是由大麗輪枝菌（Verticillium dahliaeKleb.）引起的。病害廣泛分布于棉花產(chǎn)區(qū),常造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,已成為棉花產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要障礙。大麗輪枝菌在土壤中主要以微菌核形式存在,可在土壤中存活多年,是生產(chǎn)上最難防治的病害之一。棉花生產(chǎn)上迄今缺乏高抗棉花黃萎病的抗病品種,病害防治長期依賴于化學(xué)農(nóng)藥。隨著人們對(duì)化學(xué)農(nóng)藥殘留對(duì)環(huán)境和人類負(fù)面影響的深入了解,病害的生物防治日益受到重視。因此,本研究試圖從土壤中篩選出防治棉花黃萎病的高效生防菌株,通過形態(tài)和分子序列鑒定,并測(cè)定其防治效果,明確其生物學(xué)特性,為生防菌株的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。另外,在分離棉花黃萎病菌的過程中,經(jīng)常分離到帚霉屬的一個(gè)真菌。該菌形態(tài)學(xué)上不屬于已知的帚霉屬的種類,也不包含在已知棉花內(nèi)生菌的名單中。為此,通過形態(tài)學(xué)與分子系統(tǒng)學(xué)方法鑒定了該真菌,并測(cè)定了其致病力,明確了其與棉花黃萎病病原菌協(xié)同致病力作用。1、棉花黃萎病生防菌的篩選1)通過雙層平板法初篩獲得5個(gè)對(duì)大麗輪枝菌具有抑制效果的菌株,經(jīng)進(jìn)一步瓊脂擴(kuò)散法試驗(yàn),獲得抑制效果最好的1個(gè)菌株SX-3。形態(tài)學(xué)特征結(jié)合16S序列分析以及脂肪... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１?ＳＸ－３菌體及芽孢形態(tài)

藏號(hào)為?ＣＧＭＣＣ?１１６３８。??２３菌株ＳＸ－３生長最適條件??最適溫度生長曲線顯示（圖２．２?Ａ），該菌株在２０－３７°Ｃ下均能生長，最適生長??溫度為３７°Ｃ，在１０°Ｃ和４５°Ｃ條件下該菌株不能生長。??最適ｐＨ生長曲線顯示（圖２．２?Ｂ），只有ｐＨ為７時(shí)，菌株可正常生長，ｐＨ＜５??或ｐＨ＞９均抑制了該菌株的繁殖。??ＯＤ６００??１．６?肩?ＯＤ６０Ｃ??１．４?１８?產(chǎn)??？？?■?１０’Ｃ?１．６?Ｚ??！?／?／＂一＂一＾?—?２０．Ｃ?１４?，?＋ＰＨ：３??／?＋３〇ＩＣ?１２?／??／?／?ＵＸ：?１０?；?ＰＨ＝７??０６?！?／?？?４ＳＣ?０８?／?．?ＰＨ＝９??０４?」？?／?■?５５＇Ｃ?０６?／?■?ＰＨ＝１１??：；?ｙ??２?４?６?ｇ?ｌ〇?１２?１４?坩賽的陽】，?０?Ｉ—喜麝—基?▲?基?龜?Ｉ?Ａ?廉?Ｊ＊？ＦＢｊｒ？）／ｈ??０１２３４５６?７８９??Ａ?Ｂ??圖２．２菌株ＳＸ－３生長溫度、ｐＨ生長曲線。Ａ：溫度生長曲線；丨丨生長曲線??Ｆｉｇ．?２．２?Ｇｒｏｗ?ｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＳＸ－３?ｓｔｒａｉｎ．?Ａ：?Ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ；?Ｂ：?（ｉｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ??ｍ??２．４芽孢形成最適條件??２．４．１芽孢形成最適培養(yǎng)基??通過對(duì)比不同培養(yǎng)基對(duì)多粘類芽孢桿菌ＳＸ－３芽孢形成的影響，結(jié)果顯承：??在ＮＢ和ＬＢ培養(yǎng)基中，菌體僅進(jìn)行營養(yǎng)細(xì)胞的大量生長，培養(yǎng)２４ｈ后仍無芽孢??形成（圖２．３Ａ）。在ＫＢ

?第二章棉花黃萎病拮抗微生物的篩選??后有芽孢形成，但營養(yǎng)細(xì)胞較少，且培養(yǎng)液中有大量肉眼可見碎片產(chǎn)生（圖２．３?Ｂ）。??雖然在ＮＢ培養(yǎng)基中不能形成芽孢，但在分別添加葡萄糖和蔗糖改良的ＮＢ??培養(yǎng)基中，均有大量芽孢形成，只不過初期芽孢形態(tài)有一定差異。添加葡萄糖的??ＮＢＧ與添加蔗糖的ＮＢＳ相比，在培養(yǎng)１８ｈ后，ＮＢＳ中有中生芽孢形成（圖２．３Ｃ，??綠色的為芽孢，紅色的為營養(yǎng)細(xì)胞），ＮＢＧ中僅有端生芽孢形成（細(xì)胞一端細(xì)胞核??被染成綠色）（圖２．３Ｄ），培養(yǎng)２４ｈ后，ＮＢＳ中有大量芽孢和營養(yǎng)細(xì)胞，ＮＢＧ中??有大量芽孢，但無營養(yǎng)細(xì)胞，僅有大量紅色碎片。??此外，在ＤＳＭ培養(yǎng)基中營養(yǎng)細(xì)胞生長狀況差，但添加葡萄糖和蔗糖改良的??ＤＳＭ培養(yǎng)基中

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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本文編號(hào)：3417453