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4種綠僵菌素A親和蛋白的真核表達(dá)與功能初步研究

發(fā)布時(shí)間:2021-09-29 22:56
  綠僵菌素A(destruxin A,DA)是金龜子綠僵菌Metarhizium anisopliae產(chǎn)生的一種環(huán)縮羧肽類次生化合物,具有較好的殺蟲活性和抗免疫作用,但其分子作用機(jī)理尚不清楚。在前期研究中,本實(shí)驗(yàn)室采用DA處理家蠶Bm12細(xì)胞,利用蛋白酶解和電泳分離了特異性蛋白條帶,通過質(zhì)譜分析與MOE2014軟件分子模擬技術(shù)鑒定了100多種疑似與DA有親和作用的蛋白質(zhì)。為了進(jìn)一步研究這些蛋白與DA的互作關(guān)系,本實(shí)驗(yàn)選取了其中4種蛋白質(zhì)(Bmnscaf2970087(P07)、Bmnscaf2204140(P20)、Bmnscaf2993029(P27)、Bmnscaf297108(P37))為對(duì)象,首先構(gòu)建其Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng),轉(zhuǎn)染草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda SF-9細(xì)胞,應(yīng)用親和層析技術(shù)分離純化這4種家蠶蛋白;同時(shí),采用昆蟲雙雜系統(tǒng)(insect two-hybrid... 

【文章來源】:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】:95 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

4種綠僵菌素A親和蛋白的真核表達(dá)與功能初步研究


DA處理Bm12細(xì)胞酶解蛋白電泳圖

清道夫受體,結(jié)構(gòu)示意圖,蛋白


圖 1.3 B 類清道夫受體結(jié)構(gòu)示意圖代表 CD36 結(jié)構(gòu)域。為 56339.37Da,含有 493 個(gè)氨基酸。從兩個(gè)蛋白分別是未知蛋白(493 個(gè)氨基圖 1.4),同源性為 100%,兩者均是家蠶,由雙分子脂質(zhì)層構(gòu)成,作為選擇性這兩種蛋白互作的蛋白有 10 種,包括分別是 HP14(血淋巴蛋白)、Scpx()、BGIBMGA013480-TA(膜骨架蛋白005226-TA(ATP 結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體家族成員SCRB3 是目標(biāo)蛋白。HP14 蛋白得分最

同源蛋白,互作,蛋白


P27同源蛋白與其他蛋白的互作圖

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]綠僵菌素對(duì)四種昆蟲細(xì)胞的毒性[J]. 何廣位,胡維娜,胡瓊波.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2015(06)
[2]亞洲玉米螟越冬幼蟲主要寄生性天敵及病原菌致死率的考察[J]. 段小莉,何康來,王振營(yíng),王新穎,李慶.  中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2014(06)
[3]金龜子綠僵菌及其粗毒素對(duì)樟巢螟幼蟲的致病性[J]. 童應(yīng)華,李萬(wàn)里,馬淑娟.  昆蟲學(xué)報(bào). 2014(04)
[4]家蠶B型清道夫受體基因的鑒定及系統(tǒng)發(fā)生與表達(dá)分析[J]. 董占鵬,柴春利,代方銀,潘敏慧,杜周和,胡海,魯成.  蠶業(yè)科學(xué). 2010(05)
[5]昆蟲病原真菌抗血淋巴免疫的機(jī)理[J]. 尹飛,胡瓊波,鐘國(guó)華,張萬(wàn)里,胡美英.  中國(guó)生物防治. 2009(S1)
[6]B類清道夫受體CD36與動(dòng)脈粥樣硬化研究進(jìn)展[J]. 孫穎,常志文.  心臟雜志. 2008(02)
[7]一種體外分析亞洲玉米螟幼蟲血細(xì)胞包囊的改進(jìn)方法[J]. 趙華福,劉佳,胡建.  動(dòng)物學(xué)研究. 2007(06)
[8]陽(yáng)離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞的研究[J]. 李勁松,葉展,趙涵芳,陳詩(shī)書.  上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(10)
[9]綠僵菌素的研究進(jìn)展[J]. 胡瓊波,任順祥.  中國(guó)生物防治. 2004(04)
[10]阿維菌素對(duì)小菜蛾的生物活性研究[J]. 何玉仙,楊秀娟,翁啟勇,黃建.  福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2001(02)

碩士論文
[1]家蠶絲氨酸蛋白酶BmHP14的克隆及表達(dá)分析[D]. 李玉欣.西南大學(xué) 2012
[2]大豆疫霉菌蘇氨酰tRNA合成酶的初步研究及其抑制劑的篩選[D]. 劉翠翠.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]綠僵菌粗毒素的提取、分離和結(jié)構(gòu)鑒定及對(duì)幾種重要害蟲的毒性測(cè)定[D]. 盧艷陽(yáng).揚(yáng)州大學(xué) 2007



本文編號(hào):3414627

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