美國(guó)白蛾Hyphantria cunea（Drury）是重要的多食性檢疫害蟲(chóng),危害寄主多達(dá)600余種。近年來(lái)美國(guó)白蛾在我國(guó)危害范圍以及取食寄主范圍日趨擴(kuò)大,但其對(duì)不同寄主次生代謝物的適應(yīng)機(jī)制方面的研究還很匱乏。本研究通過(guò)研究植物次生代謝物槲皮素、綠原酸1-脫氧野尻霉素和對(duì)美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響及其誘導(dǎo)的解毒酶響應(yīng),結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù),探究美國(guó)白蛾對(duì)植物次生代謝物的解毒機(jī)制。研究結(jié)果如下:1、測(cè)定不同濃度槲皮素、綠原酸和1-脫氧野尻霉素對(duì)美國(guó)白蛾的死亡率。結(jié)果表明三種次生代謝物處理6d后5齡幼蟲(chóng)的死亡率有顯著差異（F=38.415,P<0.05;F=48.634,P<0.05;F=16.662,P<0.05）,在最高濃度時(shí)的死亡率分別達(dá)到了70.00%、67.50%和52.50%。2、測(cè)定不同濃度三種次生代謝物對(duì)美國(guó)白蛾的營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo)。結(jié)果表明槲皮素抑制美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)取食行為,處理組相對(duì)取食量RCR顯著低于對(duì)照組（P<0.05）,除了0.250%濃度,食物轉(zhuǎn)化率ECD則顯著高于對(duì)照組。綠原酸和DNJ降低美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率,其相對(duì)取食量RCR顯著高于對(duì)... 

【文章來(lái)源】：北京林業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

取食不同濃度槲皮素36h后美國(guó)白蛾5齡幼蟲(chóng)5種解毒酶活性Figure.3.1ActivitiesoffivedetoxificationenzymesoftheH.cunea5thinstarlarvaefeedingondifferentcontentsofquercetindietsfor36h

三種次生代謝物對(duì)美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)解毒酶活性影響21時(shí)，CYP450酶的活性被顯著誘導(dǎo)，在1.000%時(shí)活性達(dá)到最大（12.46U/L）。在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)GSTs活性均被顯著誘導(dǎo)，在綠原酸濃度為1.000%時(shí)GSTs活性達(dá)到最大（34.21U/mg·prot）。在試驗(yàn)濃度內(nèi)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性也被不同程度誘導(dǎo)且與對(duì)照組差異顯著，當(dāng)綠原酸濃度為0.500%時(shí)，對(duì)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的活性誘導(dǎo)能力達(dá)到最大。0.125%的綠原酸對(duì)美國(guó)白蛾UGT的活性具有顯著誘導(dǎo)作用，而其余濃度處理的UGT活性與對(duì)照相比均無(wú)顯著差異（圖3.2B）。而由圖3.2C可知，各濃度綠原酸對(duì)美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)CarE活性均未見(jiàn)顯著影響（F=0.166，P=0.970）。圖3.2取食不同濃度綠原酸36h后美國(guó)白蛾5齡幼蟲(chóng)5種解毒酶活性Figure3.2ActivitiesoffivedetoxificationenzymesoftheH.cunea5thinstarlarvaefeedingondifferentcontentsofchlorogenicaciddietsfor36h注a：柱上不同小寫(xiě)字母代表同種酶在不同濃度綠原酸之間差異顯著（Tukey氏檢驗(yàn)，P<0.05）。Differentletteronthebarsshowsignificantdifferenceofthesameenzymeactivityindifferentcontentchlorogenicacid(Tukey’stest，P<0.05).注b：CK:添加10%DMSO人工飼料Artificialdietadded10%DMSO。3.2.3DNJ對(duì)美國(guó)白蛾解毒酶活性的影響用5種不同濃度（0.125%，0.250%，0.500%，1.000%，2.000%）DNJ人工飼料分別飼養(yǎng)美國(guó)白蛾5齡幼蟲(chóng)36h后，腸道內(nèi)5種解毒酶的活性如圖3.3所示。結(jié)果表明，不同濃度的DNJ對(duì)美國(guó)白蛾GSTs（F=19.588,P=0.000）、UGT（F=15.344,P=0.000）、

3種次生代謝物對(duì)美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育及解毒酶活性的影響22CYP450（F=8.589,P=0.001）、ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（F=0.434,P=0.023）和CarE（F=7.410,P=0.002）的活性均有顯著影響。由圖3.3A、3.3D、3.3E可知，DNJ對(duì)美國(guó)白蛾中腸的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、CYP450、和GSTs活性均有不同程度的誘導(dǎo)作用且誘導(dǎo)趨勢(shì)相似。隨著DNJ濃度的升高，上述三種解毒酶的活性也逐漸升高，然后略微降低。當(dāng)DNJ濃度低于0.250%時(shí)，CYP450酶活性被顯著抑制，DNJ濃度為0.250%~2.000%時(shí)，CYP450酶的活性被顯著誘導(dǎo)，在1.000%時(shí)活性達(dá)到最大。在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)GSTs活性均被顯著誘導(dǎo)，在DNJ濃度為0.500%時(shí)GSTs活性達(dá)到最大。在試驗(yàn)濃度內(nèi)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性也被不同程度誘導(dǎo)且與對(duì)照組差異顯著。0.125%的DNJ對(duì)美國(guó)白蛾UGT的活性具有顯著抑制作用，但隨著濃度的升高，DNJ對(duì)UGT活性的抑制作用越來(lái)越弱。而由圖3.3C可知，隨著濃度的升高，DNJ對(duì)美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)CarE活性抑制作用越來(lái)越強(qiáng)，在1.000%時(shí)達(dá)到最強(qiáng)，但在2.000%時(shí)抑制作用減弱。圖3.3取食不同濃度1-脫氧野尻霉素36h后美國(guó)白蛾5齡幼蟲(chóng)5種解毒酶活性Figure3.3ActivitiesoffivedetoxificationenzymesoftheH.cunea5thinstarlarvaefeedingondifferentcontentsofDNJdietsfor36h注a：柱上不同小寫(xiě)字母代表同種酶在不同濃度DNJ之間差異顯著（Tukey氏檢驗(yàn)，P<0.05）。DifferentletteronthebarsshowsignificantdifferenceofthesameenzymeactivityindifferentcontentDNJ(Tukey’stest，P<0.05).注b：CK:添加10%DMSO人工飼料Artificialdietadded10%DMSO。3.2.4槲皮素對(duì)美國(guó)白蛾解毒酶活性的時(shí)間效應(yīng)用0.500%槲皮素飼養(yǎng)美國(guó)白蛾5齡幼蟲(chóng)，分別測(cè)定12h，24h，36h，48h，60h時(shí)段美國(guó)白蛾體內(nèi)5種解毒酶的活性（圖3.4）。結(jié)果表明，不同時(shí)間處理下，0.500%

【參考文獻(xiàn)】：
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