真菌病害是制約農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要因素之一,70%以上的植物病害是由真菌造成的。一方面,植物病原真菌感染植株后會導(dǎo)致作物減產(chǎn),帶來經(jīng)濟(jì)損失;另一方面,部分病原真菌還會分泌毒素,從而帶來食品安全問題,危及人類健康。真菌除了引起植物病害,有的還對人類有致病性。其中,由曲霉屬（Aspergillus）、念珠菌屬（Candida）和隱球菌屬（Cryptococcus）的條件致病菌引起的深部真菌感染對人類健康的危害極大。近年來,該類疾病發(fā)病率大幅上升且致死性極高,加上耐藥性菌株的不斷出現(xiàn),對目前臨床上有限的抗真菌藥物提出了挑戰(zhàn)。因此,尋找新型抗真菌藥物或先導(dǎo)化合物具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。藥用植物內(nèi)生菌可作為抗真菌物質(zhì)的重要來源,本研究從石蒜屬藥用植物忽地笑、中國石蒜和紅花石蒜不同組織部位中分離篩選到30株具有拮抗病原真菌能力的內(nèi)生細(xì)菌。其中分離自忽地笑的菌株HDXY-02具有較強(qiáng)的真菌抑制能力,且抑菌譜較廣。經(jīng)16S r DNA和16-23S r DNA間隔區(qū)基因序列分析,結(jié)合伯克霍爾德氏菌的種特異性引物擴(kuò)增和生理生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果,內(nèi)生細(xì)菌HDXY-02被鑒定為唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（Burkholderia ... 

【文章來源】：南京師范大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

毒黃素化學(xué)式（SymyxDraw4.0軟件繪制）

第1章緒論9中物質(zhì)2）合成物質(zhì)3，RibD脫氨基還原物質(zhì)3形成物質(zhì)4，物質(zhì)4脫磷酸合成物質(zhì)5，再形成核黃素（圖1.2A中物質(zhì)6）[111]。毒黃素合成由ToxB轉(zhuǎn)化物質(zhì)2至物質(zhì)3，ToxE脫氨基還原物質(zhì)3形成物質(zhì)4，物質(zhì)4脫磷酸合成物質(zhì)5，物質(zhì)5經(jīng)由一位置途徑由ToxC和/或ToxD轉(zhuǎn)化為物質(zhì)10。最終由ToxA甲基化物質(zhì)10合成毒黃素[112]。圖1.2核黃素和毒黃素生物合成途徑（引自文獻(xiàn)[112]）（A）核黃素生物合成起始步驟。（B）推測的毒黃素合成途徑。（C）改進(jìn)的毒黃素合成途徑。Figure1.2Biosyntheticpathwayfortheformationofriboflavinandtoxoflavin[112](A)Intialstepsinthebiosyntheticpathwayfortheformationofriboflavin.(B)Originalpathwayproposedfortheformationoftoxoflavin[110].(C)Revisedpathwayfortheformationoftoxoflavin.1.4.4.4毒黃素的合成受群體感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)控在B.glumae中，研究表明毒黃素的合成受群體感應(yīng)（QuruomSensing，QS）調(diào)控[113]（圖1.3）。QS通過LuxI家族蛋白TofI合成信號分子──辛�；�-L-高絲氨酸內(nèi)酯（N-octanoyl-homoserinelactone，C8-HSL）并與它的同源受體──LuxR家族蛋白TofR

第1章緒論13圖1.4五個主要細(xì)菌門代表種基因組中與c-di-GMP代謝相關(guān)的GGDEF、EAL和HD-GYP結(jié)構(gòu)域的數(shù)量（引自文獻(xiàn)[159]）Figure1.4Numberofthec-di-GMP-metabolizingGGDEF,EALandHD-GYPdomainsencodedbythegenomesofrepresentativespeciesfromfivemajorbacterialphyla[159]1.6.2c-di-GMP調(diào)控鏈霉菌抗生素的合成鏈霉菌（Streptomyces）中，c-di-GMP還參與了加納鏈霉菌（Streptomycesghanaensis）天然產(chǎn)物moenomycinA的合成調(diào)控[146]。轉(zhuǎn)錄因子BldD是天藍(lán)色鏈霉菌形態(tài)發(fā)育和抗生素合成所必需的[160,161]。BldD控制超過160個基因的轉(zhuǎn)錄，這些基因中有很多是與抗生素和纖維素合成相關(guān)的，其中3個基因（cdgA、cdgB和SCO5511）都編碼含有GGDEF或EAL結(jié)構(gòu)域的蛋白。在天藍(lán)色鏈霉菌M600中過表達(dá)cdgA后，菌株會表現(xiàn)為無氣生菌絲表型，同時其藍(lán)色抗生素——放線菌紫素（actinorhodin）的合成量也有所下降[161]。cdgA基因編碼蛋白具有PAS-GGDEF-EAL結(jié)構(gòu)域，PAS結(jié)構(gòu)域是感知外界信號的結(jié)構(gòu)域，可以調(diào)控C端GGDEF和EAL結(jié)構(gòu)域的活性[162,163]。丟失DGC活力的突變可使無氣生菌絲表型消失和放線菌紫素合成的恢復(fù)，說明胞內(nèi)c-di-GMP濃度可影響氣生菌絲構(gòu)成和放線菌紫素合成。cdgB基因編碼蛋白具有PAS-GAF-GGDEF結(jié)構(gòu)域，PAS結(jié)構(gòu)域或和GAF結(jié)構(gòu)域可感知外界信號，CdgB蛋白含有具有活力的GGDEF結(jié)構(gòu)域并表現(xiàn)出DGC催化活性[160]。敲除或過表達(dá)cdgB抑制氣生菌絲形成，過表達(dá)cdgB抑制放線菌紫素合成。第3個基因SCO5511編碼一個膜定位蛋白且包含PAS、GGDEF和EAL結(jié)構(gòu)域。SCO5511可能全局性或局部調(diào)控胞內(nèi)c-di-GMP濃度，其是否參與次級代謝物合成調(diào)控并不清楚。委瑞內(nèi)拉鏈霉菌（Streptomycesvenezuelae）的BldD的C端與c-di-GMP形成BldD-(c-di-GMP)-DNA復(fù)合物

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]變形三萜海蓬子皂苷甲抗乳腺癌作用及其機(jī)制研究[D]. 管福琴.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016

碩士論文
[1]石蒜堿和小檗堿對植物病原真菌抑制作用及其抑菌生理指標(biāo)分析[D]. 任偉.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]番茄葉霉病菌拮抗細(xì)菌的篩選、鑒定及其發(fā)酵液活性的研究[D]. 孫楊.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]產(chǎn)加蘭他敏內(nèi)生菌的選育及發(fā)酵條件的研究[D]. 楊帥.湖南中醫(yī)藥大學(xué) 2011
[4]忽地笑離體培養(yǎng)與內(nèi)生菌分離產(chǎn)生加蘭他敏的研究[D]. 趙志敏.湖南中醫(yī)藥大學(xué) 2010



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