灰飛虱（Laodelphax striatellus）是亞洲地區(qū)重要的農(nóng)業(yè)害蟲,廣食性,可刺吸取食包括水稻、小麥和大麥在內(nèi)的諸多禾本科作物,并可在不同寄主作物間轉(zhuǎn)移為害,由此造成作物產(chǎn)量巨大損失。探尋一條安全高效的灰飛虱防治途徑是當前開展灰飛虱防控工作的關鍵環(huán)節(jié)。昆蟲共生菌在昆蟲生長發(fā)育及繁殖過程中發(fā)揮重要的作用,是害蟲防治中可開發(fā)利用的一類重要資源。為全面掌握灰飛虱體內(nèi)共生菌的資源狀況,以及進一步為后續(xù)研究灰飛虱體內(nèi)共生菌的生態(tài)功能以及開發(fā)基于共生關系的灰飛虱防控新技術奠定基礎,本研究以不同寄主作物來源的灰飛虱種群為研究對象,運用宏基因組和宏轉(zhuǎn)錄組技術全面分析了不同發(fā)育歷期以及不同寄主作物飼養(yǎng)條件下灰飛虱體內(nèi)共生菌多樣性及其差異。具體的研究結果如下:1.不同發(fā)育歷期的灰飛虱體內(nèi)共生菌群落結構及種類多樣性分析:運用基于16S rDNA和ITS測序的宏基因組策略分別檢測了灰飛虱大麥種群1-5齡若蟲和雌雄成蟲體內(nèi)共生細菌和共生真菌的群落結構及種類多樣性。根據(jù)序列相似性對各個樣本測序獲得的有效序列進行聚類分析,灰飛虱大麥種群1-5齡若蟲、雌、雄成蟲體內(nèi)共生細菌（共生真菌）分別獲得79（59）... 

【文章來源】：中國計量大學浙江省

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

灰飛虱不同發(fā)育歷期樣本總基因組凝膠電泳檢測圖

圖 2.1 灰飛虱不同發(fā)育歷期樣本總基因組凝膠電泳檢測圖注：M：DNAMarkerDL15000；1-5：1-5 齡若蟲（B1-B5）；6：雌成蟲（BF）；7：雄成蟲（B2.2.2 細菌 16S rDNA 和真菌 ITS2 序列 PCR 擴增及凝膠電泳檢測對 7 個樣本的宏基因組 DNA16S rDNA 的 V3-V4 區(qū)和 ITS 的 ITS2 區(qū)進增，分別在 500 bp 和 400 bp 大小處獲得到單一目的條帶（圖 2.2），表明所本總基因組 DNA 能完整高效的擴增出 16SrDNA 和 ITS2 目標序列，可用于測序?qū)嶒灐?

（Alphaproteobacteria，89.19%~99.56%）、 -變形菌綱（Gammaproteobacteria，0.14%~2.06%）、 -變形菌綱（Betaproteobacteria，0.07%~2.19%）、放線菌綱（Actinobacteria，0.03%~1.30%）、芽孢桿菌綱（Bacilli，0.07%~1.28%）、梭菌綱（Clostridia，0.01%~1.00%）、擬桿菌綱（Bacteroidia，0.01%~0.50%） 、 -變形菌綱（Epsilonproteobacteria，0.01%~0.52%）、鞘脂桿菌綱（Sphingobacteriia，0.02%~0.24%）、黃小桿菌綱（Flavobacteriia，0.01%~0.16%）、 -變形菌綱（Deltaproteobacteria，0.02%~0.10%）和噬纖維菌綱（Cytophagia，0.01%~0.10%）等（圖 2.3）。若蟲樣本注釋到的綱數(shù)目較成蟲樣本注釋到的多�；绎w虱體內(nèi)均以 -變形菌綱為優(yōu)勢菌綱， -變形菌綱、 -變形菌綱和放線菌綱細菌豐度次之。-變形菌綱和 -變形菌綱在 7 個樣本中的相對豐度略有差異，如 1 齡若蟲（B1）體內(nèi) -變形菌綱和 -變形菌綱的豐度分別為 96.98%和 0.77%；2 齡若蟲（B2）體內(nèi)相應豐度分別為 89.19%和 3.30%；3 齡若蟲（B3）體內(nèi)的豐度分別為 98.40%和 0.36%；4 齡若蟲（B4）體內(nèi)豐度分別為 98.33%和 0.47%；5 齡若蟲（B5）體內(nèi)豐度分別為 99.56%和 0.14%；雌成蟲（BF）體內(nèi)豐度分別為 97.80%和 2.06%；雄成蟲（BM）體內(nèi)豐度分別為 97.95%和 0.88%。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]稻縱卷葉螟腸道細菌群落結構與多樣性分析[J]. 劉小改,楊亞軍,廖秋菊,徐紅星,劉映紅,呂仲賢.  昆蟲學報. 2016(09)
[2]基于16S rDNA基因序列的澤蘭實蠅幼蟲腸道細菌多樣性分析[J]. 張某,楊璞,朱家穎,袁遠,桂富榮,高熹,吳國星.  昆蟲學報. 2016(02)
[3]稻飛虱災變和治理研究透析[J]. 呂進,祝增榮,婁永根,程家安.  應用昆蟲學報. 2013(03)
[4]宏轉(zhuǎn)錄組技術及其研究進展[J]. 馬述,劉虎虎,田云,盧向陽.  生物技術通報. 2012(12)
[5]螺旋粉虱體內(nèi)共生菌的研究[J]. 黃武仁,牛黎明,朱文靜,韓冬銀,張方平,符悅冠.  熱帶作物學報. 2012(01)
[6]宏轉(zhuǎn)錄組學在微生物生態(tài)學研究中的應用[J]. 李曉暉,李鑫鑫,張維,燕永亮,陳明,陸偉.  中國農(nóng)業(yè)科技導報. 2011(04)
[7]褐飛虱腸道細菌多樣性分析[J]. 李香香,楊焊,王志偉,蘇建亞.  江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2011(01)
[8]灰飛虱體內(nèi)Wolbachia的感染與其攜帶水稻條紋病毒的相關性分析[J]. 樂文靜,史文琦,季英華,周益軍.  南京農(nóng)業(yè)大學學報. 2011(01)
[9]褐飛虱長短翅型成蟲不同組織內(nèi)Wolbachia的密度[J]. 張慧,張開軍,洪曉月.  南京農(nóng)業(yè)大學學報. 2010(05)
[10]褐飛虱共生菌抗吡蟲啉菌株和敏感菌株解毒酶活性的比較[J]. 李娜,陳建明,張玨鋒,何月平,陳列忠.  浙江農(nóng)業(yè)學報. 2010(05)

博士論文
[1]基因組學分析揭示褐飛虱與體內(nèi)共生微生物的共生關系[D]. 范海偉.浙江大學 2015
[2]小菜蛾中腸微生物多樣性及其功能研究[D]. 夏曉峰.福建農(nóng)林大學 2014

碩士論文
[1]扶桑綿粉蚧共生微生物的分子鑒定及分析[D]. 王震杰.浙江師范大學 2014
[2]褐飛虱體內(nèi)類酵母共生菌的多樣性及其在不同蟲齡和不同抗性水稻上的變化規(guī)律[D]. 侯云.中國計量學院 2013
[3]褐飛虱內(nèi)共生細菌Wolbachia與Arsenophonus的競爭關系分析[D]. 屈呂宇.浙江大學 2013
[4]不同寄主對灰飛虱種群體內(nèi)共生菌和取食行為影響的研究[D]. 周巖巖.中國計量學院 2012
[5]共生菌Wolbachia對褐飛虱生殖和適合度的影響及在其體內(nèi)感染密度的動態(tài)研究[D]. 張慧.南京農(nóng)業(yè)大學 2010



本文編號：3363477