結球甘藍（Brassica oleracea var.capitata L.）是世界范圍內廣泛栽培的一種重要的十字花科蔬菜作物。甘藍枯萎病是一種典型的土傳病害,嚴重影響著甘藍的產量和品質,并難以通過藥劑等措施來防治,培育抗病品種是應對甘藍枯萎病最為行之有效的方法。本研究采用農桿菌介導轉化的方法將甘藍抗枯萎病基因FOC1導入高感枯萎病的甘藍自交系材料,以期轉化后的感病材料獲得枯萎病抗性,驗證FOC1基因的抗病功能;利用亞細胞定位實驗明確FOC1編碼蛋白的性質,并利用生物信息學軟件對目的蛋白的組成、結構及可能的生物學功能和參與的生物學途徑進行預測分析,為探明抗病基因的抗病機理提供理論依據(jù);綜合運用小孢子培養(yǎng)、全基因組背景選擇和抗性特異分子標記輔助選擇對骨干親本01-20進行枯萎病抗性轉育,以期快速獲得優(yōu)良抗病育種材料。主要研究結果如下:1、通過對本課題11份高感枯萎病甘藍自交系材料的篩選,其中由XW自交系獲得的外植體材料褐化程度最低,分化出芽率最高,是用于遺傳轉化的優(yōu)良受體材料。將抗枯萎病基因FOC1通過農桿菌介導法轉入甘藍自交系材料XW,共獲得6株陽性植株,對陽性植株進行PCR檢測,有4... 

【文章來源】：中國農業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

經測序驗證序列無誤后轉入農桿菌菌株EHA105

2103962.5 50 203828225 30 254SiLiuSheng30 20 355Minicole82.5 82.5 06XiaJie97.5 60 107LvQiu92.5 37.5 258CB20137.5 75 5987-53465 25 32.5002-1295 87.5 01XW90 10 45綜合種子芽率、外植體褐化情況和外植體分化出芽情況我們發(fā)現(xiàn) 11 份材料中，XW 品種藍材料在播種后 5d 種子出芽整齊且芽率較高，達到 90%；外植體褐化程度低，只有 10%；成苗能力最強，達到 45%。因此，本研究選用 XW 品種的甘藍自交系材料作為抗枯萎病基C1 轉化的受體材料。3.2 轉抗枯萎病基因甘藍植株的獲得本研究以高感枯萎病的甘藍自交系材料 XW 為轉化受體通過農桿菌介導轉化的方法，共獲潮霉素抗性的轉基因植株，轉化各階段情況如圖 2-2 所示

圖 2-3 轉化植株的 PCR 檢測。左圖：引物 FOC1-P 擴增結果；右圖：引物 HYG 擴增結果；CK：載體對照；A：轉基因植株 A；B：轉基因植株 B；C：轉基因植株 C；D：轉基因植株 D；E：轉基因植株 E；F：轉基因植


本文編號：3361041