西花薊馬是世界性農(nóng)業(yè)和園藝作物害蟲(chóng),也是我國(guó)重要的對(duì)外對(duì)內(nèi)檢疫對(duì)象。西花薊馬具有溫室品系和羽扇豆品系兩個(gè)品系,二者在寄主范圍、抗藥性、生存環(huán)境等方面均具有明顯差異,但外部形態(tài)相似,無(wú)法準(zhǔn)確鑒別,生殖隔離及生態(tài)環(huán)境適應(yīng)性未知,明確以上信息對(duì)西花薊馬的靶向性防控具有重要意義。本研究以西花薊馬溫室品系和羽扇豆品系為靶標(biāo),采用基于mtDNA COI基因的種特異性PCR法,研究一步雙重品系快速檢測(cè)技術(shù),并通過(guò)室內(nèi)生態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究?jī)蓚�(gè)品系的生殖生物學(xué)特性和生態(tài)適應(yīng)性,主要研究結(jié)果如下:（1）基于種特異性COI標(biāo)記的西花薊馬溫室品系和羽扇豆品系一步雙重快速鑒定技術(shù)研究。以西花薊馬溫室品系和羽扇豆品系為靶標(biāo),以田間常見(jiàn)的其他14種薊馬為參照,根據(jù)COI序列設(shè)計(jì)篩選獲得特異性組合引物（TF6/GR32/LR12）,其擴(kuò)增片段大小分別為溫室品系362bp、羽扇豆品系541bp。結(jié)果當(dāng)組合引物TF6/GR32/LR12比例為1.0/0.2/0.8、退火溫度為44℃時(shí),擴(kuò)增效果最好。該檢測(cè)鑒定技術(shù)體系,特異性強(qiáng),僅對(duì)西花薊馬的溫室品系和/或羽扇豆品系具有擴(kuò)增能力。靈敏度高,對(duì)單一或混合品系的西花薊馬各蟲(chóng)態(tài)都具有... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線

學(xué)位論文 第二章 基于COI 標(biāo)記的西花薊馬溫室品系和羽扇豆品系化的反應(yīng)體系和擴(kuò)增條件進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，電泳檢測(cè)方法同析蟲(chóng)線粒體DNA COI基因序列擴(kuò)增與分析室品系和羽扇豆品系及其他 14 種田間常見(jiàn)薊馬 DNA 為模1490/HCO2198 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增。電泳檢測(cè)結(jié)果顯示，16 種/品段（圖 2.1），擴(kuò)增片段大小為 629~681bp，與數(shù)據(jù)庫(kù)中對(duì)應(yīng)100%。表明所有薊馬種類的 mtDNA 提取無(wú)誤，可以用于后

當(dāng)組合引物 TF6/GR32/LR12 以 1.0/0.2/0.8 的比例進(jìn)行組合時(shí)，無(wú)論是溫室品系（圖2.2A）還是羽扇豆品系（圖 2.2B）均能擴(kuò)增出清晰的靶標(biāo)條帶（圖 2.2）。


本文編號(hào)：3356683