煙草叢頂病是由番茄叢矮病毒科（Tombusviridae）幽影病毒屬（Umbravirus）成員煙草叢頂病毒（Tobacco bushy top virus,TBTV）和黃癥病毒科（Luteoviridae）成員煙草扭脈病毒（Tobacco vein distorting virus,TVDV）復合侵染引起的一種系統(tǒng)性侵染病害。TBTV基因組為一條正義單鏈RNA,全長4,152個核苷酸,5’端沒有帽子,3’端沒有poly（A）尾,共有4個開放閱讀框（ORF）。ORF1編碼35 KDa蛋白,ORF1的C末端與ORF2的N端有8個密碼子的重疊區(qū),ORF2編碼63 KDa蛋白。ORF1通過-1位的移碼翻譯機制表達產(chǎn)生TBTV RNA依賴的RNA聚合酶（RNA-dependent RNA polymerase,RdRp）,其分子量約等于ORF1和ORF2的分子量之和。本研究在已經(jīng)完成TBTV RdRp-1位移碼翻譯表達的定性分析基礎(chǔ)上,主要對TBTV RdRp的-1位移碼翻譯機制的多層次調(diào)控元件進行定位和結(jié)構(gòu)特征分析。首先通過序列分析,初步定位了-1型移碼必需的七核苷酸滑動序列（特征為:XXx... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學山東省

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

RNA病毒采用的常規(guī)和非常規(guī)翻譯機制示意圖(FirthandBrierley,2012)

Hentze et al., 1997; Le et al., 1997; Dreher and Miller, 2006; Wang et al., 2009）。翻譯過程包括四個步驟：翻譯的起始，蛋白的延伸，翻譯的終止，以及核糖體的再循環(huán)(圖 1-2)。圖1-2 真核生物mRNA的翻譯機制示意圖（Dreher and Miller, 2006）Fig.1-2 Translational mechanism in eukaryotic mRNAs.1.2.1 翻譯的起始真核生物的蛋白翻譯起始是由許多翻譯起始因子（eIF）調(diào)控的。首先是翻譯起始因子（eIF）4E 識別并結(jié)合 5’端帽子結(jié)構(gòu)然后招募 eIF4G，繼續(xù)結(jié)合 eIF4A、eIF4B 以及poly（A）結(jié)合蛋白（PABP），最終使得 mRNA 連同核糖體形成一個環(huán)狀結(jié)構(gòu)復合體。核糖體 40S 亞基與各種翻譯起始因子 eIF3，eIF1，eIF1A，eIF5 以及 eIF2-Met-tRNAi-GTP結(jié)合形成 43S 核糖體復合物。在翻譯起始因子 eIF4G 和 eIF3 的作用下，43S 核糖體復合物與環(huán)狀結(jié)構(gòu)復合體結(jié)合，核糖體被招募到 mRNA 的 5’端并在解旋酶 eIF4A 和輔助因子 eIF4B 的作用下沿 mRNA 的 5’→3’方向滑動

圖1-3四種不同類型的IRES元件（Jeffrey, 2008）Fig.1-3 Four different IRES groups.1.3.2 滲漏掃描（Leaky scanning）策略滲漏掃描是一種翻譯同一條 mRNA 鏈上具有重疊區(qū)開放閱讀框（O立的兩個蛋白時發(fā)生的翻譯機制。在蛋白翻譯的起始階段，40S 核糖體亞的帽子結(jié)構(gòu)之后，會沿著 mRNA 從 5’端往 3’端方向掃描，直到遇到起始開始翻譯（Kozak, 2002）。但是在有些情況下，會有一定比例的核糖體在始密碼子時不發(fā)生翻譯的起始，而是繼續(xù)向 3’端方向滑動，直到遇到后面才開始進行翻譯（Kozak, 2002）（圖 1-4），這種翻譯的起始機制便是滲掃描的最終結(jié)果是表達兩個相互獨立的蛋白，這兩個蛋白可以是 C 末端重開放閱讀框中的不同起始位點），可以是兩個有重疊區(qū)的 ORF（不同的也可以是兩個沒有重疊區(qū)而是順序性的開放閱讀框（Andrew E. Firth a

【參考文獻】：
期刊論文
[1]煙草叢頂病毒ORF1蛋白的多克隆抗體制備及應用[J]. 王國魯,王德亞,于成明,原雪峰.  植物病理學報. 2016(01)
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[3]ICTV第九次報告對病毒分類系統(tǒng)的一些修改[J]. 張忠信.  病毒學報. 2012(05)
[4]煙草叢頂病毒（TBTV）ORF3和ORF4的原核表達、抗血清制備及應用[J]. 龍亞芹,王萬東,左瑞娟,李凡,尹朝先,陳海如.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學報. 2011(02)
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[6]我國植物病毒學的研究現(xiàn)狀及發(fā)展策略[J]. 李大偉.  植物保護. 2010(02)
[7]煙草叢頂病研究進展[J]. 李凡,吳建宇,陳海如.  植物病理學報. 2005(05)
[8]煙草叢頂病在中國的發(fā)現(xiàn)及研究進展[J]. 秦西云.  中國煙草科學. 2005(03)
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[10]云南煙草叢枝癥病害初步研究[J]. 李凡,周雪平,蔡紅,陳海如,李德葆.  植物病理學報. 2001(04)



本文編號：3355202