大豆斑疹病菌胞外纖維素酶編碼基因的鑒定及其調(diào)控分析
發(fā)布時間:2021-08-20 18:28
植物病原黃單胞菌的胞外纖維素酶基因具有差異性和多樣性。大豆斑疹病菌(Xanthomonas axonopodis pv.glycines,Xag)具有胞外纖維素酶活性,但其編碼基因和調(diào)控特性尚不明確。為了鑒定Xag的胞外纖維素酶編碼基因,本研究從NEAU001菌株基因組內(nèi)篩選出6個候選的纖維素酶編碼基因。通過異源表達(dá)實驗發(fā)現(xiàn),engXCA和egl2基因分別編碼的蛋白EngXCA和Egl2具有水解羧甲基纖維素的能力。酶活性測定實驗表明,engXCA和egl2基因決定Xag的胞外纖維素酶活性。另外,對已知的10個毒性調(diào)控基因突變株進(jìn)行胞外纖維素酶活性測定,揭示Xag胞外纖維素酶活性受DSF(diffusible signal factor)信號通路和全局性調(diào)控子Clp(Crp-like protein)正調(diào)控。熒光定量PCR結(jié)果進(jìn)一步證實,RpfF和Clp參與正調(diào)控engXCA和egl2基因的mRNA水平。這些結(jié)果暗示,DSF信號通路可能通過Clp調(diào)控engXCA和egl2基因的表達(dá),實現(xiàn)對Xag胞外纖維素酶活性的調(diào)控。
【文章來源】:植物病理學(xué)報. 2020,50(03)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:9 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 供試材料
1.2 異位表達(dá)構(gòu)建
1.3 缺失突變體構(gòu)建及功能互補(bǔ)
1.4 纖維素酶活性測定
1.5 RNA提取及RT-PCR
2 結(jié)果
2.1 大豆斑疹病菌纖維素酶編碼基因的鑒定
2.2 engXCA和egl2基因決定大豆斑疹病菌的胞外纖維素酶活性
2.3 DSF信號和全局性調(diào)控子Clp涉及正調(diào)控大豆斑疹病菌的胞外纖維素酶活性
2.4 DSF信號和全局性調(diào)控子Clp正調(diào)控胞外纖維素酶編碼基因engXCA和egl2的mRNA水平
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大豆斑疹病菌羧基蛋白酶前體基因的功能分析[J]. 劉霞,盧娉婷,施雅思,陳余晨,王超妮,郭威. 植物病理學(xué)報. 2019(02)
[2]植物病原黃單胞菌DSF信號依賴的群體感應(yīng)機(jī)制及調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[J]. 周蓮,王杏雨,何亞文. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(14)
本文編號:3354010
【文章來源】:植物病理學(xué)報. 2020,50(03)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:9 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 供試材料
1.2 異位表達(dá)構(gòu)建
1.3 缺失突變體構(gòu)建及功能互補(bǔ)
1.4 纖維素酶活性測定
1.5 RNA提取及RT-PCR
2 結(jié)果
2.1 大豆斑疹病菌纖維素酶編碼基因的鑒定
2.2 engXCA和egl2基因決定大豆斑疹病菌的胞外纖維素酶活性
2.3 DSF信號和全局性調(diào)控子Clp涉及正調(diào)控大豆斑疹病菌的胞外纖維素酶活性
2.4 DSF信號和全局性調(diào)控子Clp正調(diào)控胞外纖維素酶編碼基因engXCA和egl2的mRNA水平
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大豆斑疹病菌羧基蛋白酶前體基因的功能分析[J]. 劉霞,盧娉婷,施雅思,陳余晨,王超妮,郭威. 植物病理學(xué)報. 2019(02)
[2]植物病原黃單胞菌DSF信號依賴的群體感應(yīng)機(jī)制及調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[J]. 周蓮,王杏雨,何亞文. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(14)
本文編號:3354010
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