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根中優(yōu)勢表達啟動子的篩選和GhCPK33在棉花抗黃萎病中的功能研究

發(fā)布時間:2021-08-13 01:17
  植物的生長和抗性通常處于對立的地位,植物免疫系統(tǒng)的激活通常影響生長發(fā)育,從而影響作物的產量,因此抗病基因在抗病育種上的應用需要有精確的時空表達調控元件,一方面可以使作物獲得抗性,另一方面不影響作物的產量。組織特異型啟動子使抗性基因僅在特異的組織中表達,從而使植株獲得抗性的同時能夠正常生長。依賴于鈣離子的蛋白激酶(calcium-dependent protein kinases,CDPKs)不僅在生長發(fā)育中具有重要作用,在植物的免疫系統(tǒng)中也具有重要的作用。前期工作是對棉花參與JA合成的Gh OPR3(1,2-氧-植物二烯酸(OPDA)還原酶)酵母雙雜交結果進行分析,獲得一個與Gh OPR3互作的蛋白,同源比對分析后發(fā)現(xiàn)該蛋白的編碼基因與Gh CPK33like相似度度最高,因此命名為Gh CPK33。本研究開展了棉花根優(yōu)勢表達啟動子的分離與鑒定,并對Gh CPK33的在棉花抗病方面的功能進行了初步探究,取得的主要結果如下:1.我們通過海島棉組織表達數(shù)據(jù)庫分析,篩選到22個可能在根中優(yōu)勢表達的基因,并克隆了這些基因。通過PCR擴增,獲得了2個根優(yōu)勢表達的啟動子,構建了表達載體分別轉化擬南... 

【文章來源】:華中農業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

根中優(yōu)勢表達啟動子的篩選和GhCPK33在棉花抗黃萎病中的功能研究


植物免疫的‘Z’型模式圖

序列,結構特點,自抑制,手型


.2 CDPKs、CRKs、CCaMKs 和 CaMKs 的結構特點[37]。.1.2 The structural features of CDPKs, CRKs, CCaMKs and CaMKs[37].這些蛋白激酶具有相似的結構域(圖 1.2),N 端的可變區(qū),絲氨酸/蘇氨酸的蛋酶區(qū),對底物起催化作用。與之相連的是自抑制區(qū),自抑制區(qū)中含有一個擬底列,該序列可與激酶區(qū)的活性位點結合,從而起自抑制作用。當 Ca2+存在時,制區(qū)是一個能與鈣調素類似區(qū)相結合的位點,在 Ca2+存在時,鈣調素類似區(qū)與點結合,從而解除酶的自抑制作用,進而使蛋白激酶的活性被激活[38]。接著是素類似區(qū),CDPKs 含有四個 EF 手型結構,主要用于與 Ca2+的結合,CRKs 含是退化了的 EF 手型結構,CCaMKs 含有三個 EF 手型結構和一個 Visinin-like,而 CaMKs 只有相關的一些結構域。與鈣調素類似區(qū)相連的是可變區(qū),但是目功能還不清楚[36]265-266。近年來 CDPKs 的功能不斷被挖掘,越來越多的研究表明其功能的廣泛性。目前多研究發(fā)現(xiàn) CDPKs 不光參與植物的生長發(fā)育,包括氣孔開閉,水稻小穗的結實

棉花,胚珠,纖維


? 天胚珠和 5 天的纖維等各個組織中的 RPKM 值結果如圖3.1。圖 3.1 部分根中優(yōu)勢表達基因在棉花各個組織中 RPKM 值的結果。Fig.3.1 The RPKM results of some genes expression in different tissues of cotton those aredominant expression in root.


本文編號:3339445

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