柑橘黃龍�。℉uanglongbing,HLB）是柑橘生產(chǎn)上最具毀滅性病害之一,該病目前尚無特效藥劑治療,也無抗（耐）病品種可供生產(chǎn)應(yīng)用,目前主要是通過挖除病樹消滅病原菌。黃龍病最早在中國廣東汕頭被發(fā)現(xiàn),目前已造成全球50多個國家和地區(qū)上億株柑橘樹感病或死亡,其主要依靠帶菌苗木（接穗）進行人為傳播,在自然界中的黃龍病主要傳播媒介是柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama。由于在帶菌柑橘木虱體內(nèi)黃龍病菌的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于柑橘等植物寄主細(xì)胞中黃龍病菌的含量,則在田間即使植物中存在黃龍病菌,若沒有柑桔木虱,病情也不會蔓延。因此防控柑橘木虱,從而切斷病原傳播是控制柑橘黃龍病的重要措施。由于柑橘黃龍病病原菌難以分離培養(yǎng),對柯赫氏法則驗證也尚未完成,繼而極大的限制了對柑橘木虱專性傳播黃龍病菌機制的研究。最近的研究表明黃龍病菌株存在噬菌體/原噬菌體,且發(fā)現(xiàn)噬菌體/原噬菌體序列是該病病原菌基因組動態(tài)變化的關(guān)鍵組分,直接影響細(xì)菌進化和種群的多樣性。因此對柑橘木虱體內(nèi)病原菌中原噬菌體的遺傳多樣性研究有助于進一步探討柑橘木虱專性傳菌機制。本研究分別對江西贛南柑橘產(chǎn)地中柑橘刺吸式害蟲進行了種內(nèi)鑒... 

【文章來源】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)江西省

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

COI基因PCR擴增效果電泳圖

橘刺吸式害蟲體內(nèi)黃龍病菌檢測用引物O11/O12c對提取的柑橘木虱DNA進行16S rDNA標(biāo)記基因PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃龍病菌陽性條帶，約1160bp，此結(jié)果表明天根公司DNA滿足實驗需求，也證實了引物O11/O12c可以用于黃龍病菌的檢測。柑橘木虱陽性樣品 DNA 作為陽性對照，利用引物 O11/O12c 對采集到害蟲 DNA 進行黃龍病菌檢測（圖 2.2）。凝膠電泳后其他柑橘刺吸黃龍病菌目的條帶，此結(jié)果表明在黑刺粉虱、柑桔粉虱 、矢尖盾蚧馬、茶黃薊馬、橘蚜和桃蚜等刺吸害蟲體內(nèi)中不攜帶黃龍病菌。圖 2.1 COI基因PCR擴增效果電泳圖Fig. 2.1 PCR amplification for COI gene

圖 3.1 引物 O11/O12c 對黃龍病的 PCR 擴增結(jié)果Fig. 3.1 PCR amplification with primer sets O11/O12c against HLBM: DNA Marker；+CK: 陽性對照；-CK: 陰性對照；其他泳道：不同來源地的樣品M: DNA ladder marker; +CK: positive control; -CK: negative control;other lanes: samples from Diaphorina citri 柑橘木虱體內(nèi)黃龍病菌 UF506 株系原噬菌體類型檢測利用 2 對特異性引物對已檢測到的 42 頭柑橘木虱陽性樣品進行原噬菌體類，結(jié)果顯示不同株系攜帶原噬菌體類型不同（圖 3.2, 表 3.1, 表 3.4~表 3.5）柑橘木虱樣品中發(fā)現(xiàn)單一 SC1 原噬菌體（13/42, 31%），其中贛州市 3 頭、尋、于都 4 頭、南康 2 頭、崇義 2 頭。15 頭柑橘木虱樣品中發(fā)現(xiàn)單一 SC2 原噬15/42, 36%），其中贛州市 2 頭、尋烏 6 頭、定南 3 頭、瑞金 2 頭、崇義 2 頭柑橘木虱樣品中既無 SC1 也無 SC2 類型原噬菌體（9/42, 21%），其中贛州 3 都 1 頭、定南 2 頭、瑞金 3 頭。5 頭柑橘木虱樣品中發(fā)現(xiàn)同時存在 SC1 和 SC原噬菌體（5/42, 12%），其中尋烏 2 頭、于都 1 頭、南康 2 頭。

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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