傳統(tǒng)轉(zhuǎn)Bt抗蟲(chóng)棉花的大量種植,不僅有效的控制了棉鈴蟲(chóng)等重要鱗翅目害蟲(chóng),而且有效減少了化學(xué)農(nóng)藥的使用,降低了環(huán)境污染,改進(jìn)了田間生態(tài)環(huán)境。但隨著種植棉花過(guò)程中農(nóng)藥使用的減少,多種次要害蟲(chóng)逐漸上升為主要害蟲(chóng),如半翅目的盲蝽類(lèi)、煙粉虱等。由于對(duì)半翅目昆蟲(chóng)抗殺效果較強(qiáng)的Bt蛋白資源缺乏,并且盲蝽類(lèi)害蟲(chóng)活動(dòng)敏捷,化學(xué)防控效果有限,以植物介導(dǎo)RNAi的轉(zhuǎn)基因棉花作為新型防控手段備受期待,與此同時(shí),此類(lèi)轉(zhuǎn)基因棉花的安全性評(píng)估也成為重點(diǎn)研究的問(wèn)題。南方小花蝽（Orius similis）是棉田中一種優(yōu)勢(shì)天敵昆蟲(chóng),可作為一種重要的非靶標(biāo)安全性評(píng)價(jià)生物。本研究以表達(dá)中黑盲蝽（Adelphocoris suturalis）fatty acyl-CoA reductase（FAR）基因dsRNA（dsAsFAR）的轉(zhuǎn)基因棉花為研究對(duì)象,以南方小花蝽為非靶標(biāo)評(píng)價(jià)生物,評(píng)估轉(zhuǎn)dsAsFAR棉花對(duì)南方小花蝽的安全性,研究結(jié)果如下:1.利用南方小花蝽的轉(zhuǎn)錄組獲得FAR（OsFAR）基因序列,全長(zhǎng)1852bp,開(kāi)放閱讀框共編碼517個(gè)氨基酸。系統(tǒng)發(fā)育分析表明OsFAR與AsFAR親緣關(guān)系最接近,其次為桃蚜、白蠟蟲(chóng)等。比... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

種半翅目昆蟲(chóng)FAR基因進(jìn)化樹(shù)

24圖 2 南方小花蝽與其近緣物種 FAR 氨基酸序列對(duì)比omparison of FAR amino acids sequences between the O. similis and 南方小花蝽 FAR 氨基酸；AsFAR 中黑盲蝽 FAF 氨基酸；EpFAR 白蠟蟲(chóng) FAR蚜 FAR 氨基酸R is FAR amino acids of O. similis; AsFAR is FAR amino acids of Adelphocoris sutamino acids of Ericerus pela; MpFAR is FAR amino acids of Myzus persica

華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019 屆碩士研究生學(xué)位論文3.2 基因克隆及 dsRNA 的合成3.2.1 目的基因 PCR 擴(kuò)增結(jié)果利用 Primer Blast 軟件設(shè)計(jì)特異性引物，對(duì) OsFAR 和 AsFAR 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，將 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物以 DL2000 Marker 為對(duì)照進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，結(jié)果如圖 4，擴(kuò)增產(chǎn)物條帶大小與預(yù)測(cè)大小相符，再結(jié)合公司測(cè)序結(jié)果對(duì)比說(shuō)明成功克隆目標(biāo)基因，最后通過(guò)質(zhì)粒提取獲得含有目標(biāo)基因質(zhì)粒。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]南方小花蝽大量繁殖關(guān)鍵技術(shù)及其田間釋放生態(tài)學(xué)基礎(chǔ)研究[D]. 周興苗.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[3]RNAi介導(dǎo)的Lcy基因沉默對(duì)番茄果實(shí)中番茄紅素含量的影響[D]. 萬(wàn)群.西南大學(xué) 2007

碩士論文
[1]南方小花蝽人工擴(kuò)繁飼養(yǎng)的研究[D]. 張瑜紅.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]利用宿主介導(dǎo)RNAi進(jìn)行蚜蟲(chóng)防治的研究[D]. 唐平華.重慶大學(xué) 2012
[3]Maasr1基因RNAi植物表達(dá)載體的構(gòu)建及有效性鑒定[D]. 楊超.華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[4]轉(zhuǎn)Bt基因棉對(duì)棉田非靶標(biāo)生物及次要害蟲(chóng)的影響研究[D]. 馬海芹.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



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