小麥?zhǔn)俏覈酥潦澜缛祟惖闹饕澄飦碓?小麥白粉病是目前小麥生產(chǎn)上的重要病害之一。黑麥6R染色體帶有白粉病抗性基因,目前仍具有抗性。本研究在前期獲得的抗白粉病黑麥6RL微小染色體附加系基礎(chǔ)之上,利用ND-FISH技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù),對附加系中微小染色體的結(jié)構(gòu)及減數(shù)分裂行為進行了初步分析。對6RL微小染色體附加系的輻射后代進行了大量的分子細胞學(xué)鑒定。同時對材料進行了田間白粉病抗性鑒定。獲得了以下結(jié)果:1、利用SLAF-seq技術(shù),開發(fā)1086對引物,從這些引物中,獲得黑麥Kustro來源的6RL微小染色體特異的分子標(biāo)記19對。2、對其中16對標(biāo)記的擴增產(chǎn)物進行克隆、測序,成功獲得16條序列,這16條序列長度在200-464 bp之間。利用GrainGenes數(shù)據(jù)庫中的BLAST工具,將這16條序列與黑麥基因組的Scaffold序列進行比對分析,有8條序列分別與數(shù)據(jù)庫中已登錄的5條黑麥6R Scaffolds序列有98%以上的相似度。3、這5條Scaffolds分別為Lo7_v2_scaffold₄53717 6R、Lo7

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

引物PCR擴增結(jié)果

圖 3. 將 19 對特異引物定位在黑麥 6RL 微小染色體上A：6R 染色體、6RL 染色體臂和 6RL 微小染色體的剪切圖。紅色方框所示為 6RL 微小染色體區(qū)段，該區(qū)段攜帶有白粉病抗性基因。B：19 對 6RL 微小染色體特異引物在 MTA6RLku上的定位圖。綠色表示 Oligo-pSc119.2-1 在 6RL 上的信號位點，紅色表示 Oligo-pSc200 和 Oligo-pSc250 在6RL 上的信號位點。Fig3. Localization of 19 specific molecular markers on rye 6RL minichromosomeA:Shear maps of 6R chromosome, 6RL chromosome arm and 6RL minichromosome. The red boxshows the 6RL minichromosome segment, which carries the powdery mildew resistance gene. B:Mapping of 19 6RL minichromosome-specific primers on 6RL arm. The green line indicates thesignaling site of Oligo-pSc119.2-1 on 6RL arm, and the red line indicates the signaling site ofOligo-pSc200 and Oligo-pSc250 on 6RL arm.3.2 黑麥 6RL 微小染色體特異序列克隆測序及 scaffold 序列比對分析

圖 4. 6RL 微小染色體特異片段的克隆及鑒定 微小染色體特異分子標(biāo)記 6RL-M8 的 PCR 擴增產(chǎn)物，箭頭所指為目的條帶，arker；MY11：綿陽 11；CS：中國春；MTA6RLKu：小麥-黑麥 6RL 單端體附MA7RKu：小麥-黑麥 1R 到 7R 的全套單體附加系；6RL 微小染色體：小麥-黑染色體附加系。B：菌液 PCR 鑒定，1-5 為白斑轉(zhuǎn)化菌，Marker：DNAMarkFig4. Cloning and identification of 6RL minichromosome specific fragmentamplification product of 6RL minichromosomal specific molecular marker 6RL-Med by the arrow as the target band.Marker, DNA Marker; MY11, Mianyang11; CSTA6RLKu, Wheat-rye 6RL monotelosomic addition line; MA1RKu-MA7RKu,nosomic addition line; 6RL minichromosome, Wheat-rye 6RL minichromosome B: Identification of bacterial fluid by PCR. Marker: DNAMarker.

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]小麥遠緣雜種染色體行為及相關(guān)基因研究[D]. 郝明.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015

碩士論文
[1]小麥抗白粉病基因Pm16的SSR標(biāo)記定位以及多基因累加體的分子標(biāo)記輔助選擇[D]. 羅瑛皓.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號：3317645