甘蔗黃葉病毒（Sugarcane yellow leaf virus,ScYLV）屬于黃癥病毒科（Luteoviridae）、馬鈴薯卷葉病毒屬（Polerovirus）,主要由蚜蟲傳播,能夠侵染甘蔗、玉米等多種作物,引發(fā)嚴重的植物病害。本研究將編碼ScYLV運動蛋白（Movement protein,MP）的基因連接到pDB-His-MBP原核表達載體上,轉(zhuǎn)化到大腸桿菌菌株Rosetta中,經(jīng)IPTG誘導,表達分子量大小約為70 kDa的融合蛋白,將純化后的融合蛋白制備多克隆抗血清。利用western blot檢測抗血清的效價為1∶128 000,靈敏度為1∶256,抗血清不與馬鈴薯卷葉病毒屬（Polerovirus）的其它病毒以及黃癥病毒屬（Luteovirus）病毒發(fā)生交叉反應(yīng),具有很好的特異性。本文制備的ScYLV MP抗血清可以用于ScYLV的檢測,并為深入研究ScYLV與寄主的相互作用等問題提供材料基礎(chǔ)。 

【文章來源】：植物病理學報. 2020,50(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 ScYLV MP原核表達載體的構(gòu)建
        1.2.2 ScYLV MP原核表達和純化
        1.2.3 多克隆抗血清的制備
        1.2.4 pMDC32-MPScYLV農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化和浸潤接種
        1.2.5 植物組織總蛋白提取
        1.2.6 抗血清效價檢測
        1.2.7 抗血清靈敏度檢測
        1.2.8 抗血清特異性檢測
        1.2.9 抗血清田間應(yīng)用
2 結(jié)果與分析
    2.1 構(gòu)建獲得ScYLV MP重組原核表達載體
    2.2 利用表達純化融合蛋白制備ScYLV MP抗血清
    2.3 明確ScYLV MP抗血清的效價
    2.4 明確ScYLV MP抗血清的靈敏度
    2.5 明確ScYLV MP抗血清的特異性
    2.6 模擬天然寄主甘蔗感染ScYLV的抗血清檢測
3 討論與展望


【參考文獻】：
期刊論文
[1]甘蔗黃葉病毒外殼蛋白基因原核表達研究[J]. 黃振瑞,孟巖,高三基,許莉萍,郭晉隆.  植物遺傳資源學報. 2007(01)



本文編號：3303674