煙草青枯病是煙草種植中一種典型的土傳根莖類病害,此病害發(fā)生范圍廣,防治困難,一旦大面積發(fā)生便會對煙草生產(chǎn)造成巨大的影響,在發(fā)生嚴(yán)重地區(qū),烤煙甚至絕收,是如今限制煙草生產(chǎn),阻礙煙草行業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展的主要因素之一。在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)煙草生產(chǎn)過程中,防治煙草青枯病的方法有輪作、抗病品種選育等,但主要防治手段還是依賴于化學(xué)防治。生物防治是近年來在根莖類病害防治上應(yīng)用廣泛的一種防治手段,生防微生物因其在自然界中分布廣泛、容易獲得等優(yōu)點越來越受到研究者的青睞,相較于化學(xué)防治,生物防治本身具有綠色無污染,安全,成本低廉等優(yōu)點。本研究主要通過在煙草青枯病發(fā)病區(qū)域的健康地塊健康煙株采集根際土壤,采用稀釋涂布的方式分離純化獲得一株生防菌哈茨木霉TMN-1,評估了分離菌株對煙草生長及煙草青枯病的生物活性,并結(jié)合室內(nèi)及田間防治青枯病發(fā)病情況,通過軟件統(tǒng)計,從而明確了分離菌株對誘導(dǎo)煙草抗青枯病的機(jī)理及效果。為生防菌株哈茨木霉TMN-1在煙草根莖病害防治上的應(yīng)用提供理論依據(jù)和實踐方法。1.分離、純化、鑒定出一株哈茨木霉菌株,明確了該菌株的生物學(xué)特性采用稀釋涂布平板法及選擇性培養(yǎng)基分離得到了實驗菌株,通過光學(xué)顯微鏡對分離... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1分離菌株菌落形態(tài)與顯微結(jié)構(gòu)A：初期菌落在PDA培養(yǎng)基上的特征（3d）；B：

圖 2-1 分離菌株菌落形態(tài)與顯微結(jié)構(gòu) A：初期菌落在 PDA 培養(yǎng)基上的特征（3d）；B：后期菌落在 PDA 培養(yǎng)基上的特征（5d）；C：分生孢子梗（3d）；D：瓶頸結(jié)構(gòu)（5d）；E：分生孢子。 Fig. 2-1 . Characteristics and microstructure of trichoderma on PDA medium； A，B: Colony appearance on PDA；C and D：Conidiophore ；E：Conidia. 2.2 分子生物學(xué)鑒定 分離菌株基因組 DNA 提取后并以此為模板進(jìn)行 ITS 序列的 PCR 擴(kuò)增，得到 ITS 序列長度約為 560bp 的條帶，經(jīng)測序后，序列于 NCBI 上進(jìn)行 BLAST 比對，選取同源序列較高的ITS 序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建如圖 2 所示。

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文18圖2-3不同濃度的木霉孢子懸浮液對煙草種子的影響（a：不同濃度的木霉孢子懸浮液對煙草種子發(fā)芽勢和發(fā)芽率的影響；b：不同濃度的木霉孢子懸浮液對煙草種子發(fā)芽指數(shù)的影響）Fig.2-3.Effectsofdifferentconcentrationsoftrichosporesuspensionontobaccoseeds（a：Effectsofdifferentconcentrationsoftrichosporesuspensiononthegerminationpotentialandgerminationrateoftobaccoseeds；b：Effectsofdifferentconcentrationsoftrichosporesuspensionongerminationindexoftobaccoseeds）注：TC1：木霉孢子懸浮液1×108孢子數(shù)/mL浸種；TC2：木霉孢子懸浮液1×106孢子數(shù)/mL浸種；TC3：木霉孢子懸浮液1×104孢子數(shù)/mL浸種；CK：無菌水浸種。Note：TC1:1×108spores/mLofTrichodermasporesuspension;TC2:1×106spores/mLofTrichodermasporesuspension.TC3:1×104spores/mLofTrichodermasporesuspension;CK:sterilewaterimmersion.2.2哈茨木霉TMN-1對煙草生物學(xué)性狀的影響溫室中，煙株根部灌根使用菌株TMN-1孢子懸浮液后，能顯著地促進(jìn)烤煙平均株高、最大葉長、最大葉寬和最大根長的增長（圖2-4b），30天后處理組各項農(nóng)藝性狀比照組高1.57、1.22、1.16、2.48倍；地上部鮮重、地上部干重、地下部鮮重、地下部干重處理組比對照組高1.79、2.17、3.73、2.94倍（圖2-4a）。圖2-4盆栽條件下哈茨木霉TMN-1菌株對煙草生物學(xué)性狀的影響Fig.2-4EffectsofTrichodermaharzianumstrainTMN-1onbiologicalcharactersoftobaccounderpotculture

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]哈茨木霉與綠色木霉對杉木種子萌發(fā)和幼苗生長的影響[J]. 李艷娟,劉博,莊正,尚天赦,劉青青,朱晨曦,王正寧.  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報. 2017(09)
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[5]木霉-植物互作機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 徐文,黃媛媛,黃亞麗,賈振華,宋水山.  中國生物防治學(xué)報. 2017(03)
[6]2種木霉菌對楊樹葉枯病致病菌的抑菌活性研究[J]. 梁丹,沈威,劉璐,楊子健,先文娟,殷嬌,熊靜.  防護(hù)林科技. 2017(01)
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[10]哈茨木霉菌（Trichoderma harzianum）TR409誘導(dǎo)辣椒防御酶活性變化及防治疫病效果[J]. 薛春生,何瑞玒,肖淑芹,孫佳瑩,鈕夢燕,馮輝.  沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2016(04)

博士論文
[1]有機(jī)酸類根系分泌物影響煙草青枯病發(fā)生的機(jī)制研究[D]. 李石力.西南大學(xué) 2017

碩士論文
[1]接種叢枝菌根真菌對煙草生長及煙草青枯病的影響[D]. 劉先良.西南大學(xué) 2014
[2]東莨菪內(nèi)酯誘導(dǎo)煙草對青枯病的抗性及其作用機(jī)理研究[D]. 崔偉偉.西南大學(xué) 2014
[3]茄科蔬菜青枯病菌的PCR檢測及遺傳多樣性分析[D]. 國嬌嬌.浙江農(nóng)林大學(xué) 2013
[4]貪噬菌CGMCC 4969植物促生特性及其降解丙烯酰胺的研究[D]. 曹玉敏.南京師范大學(xué) 2013
[5]幾種殺菌劑與IBA混配對煙草青枯病的控制作用研究[D]. 杜根平.西南大學(xué) 2011



本文編號：3291339