水貂是重要的皮毛用經(jīng)濟動物,被毛色澤是影響皮毛品質的關鍵因素,Agouti基因主要調控偽黑素的生成,在色澤絢麗的被毛生成中具有重要作用。作為毛色形成的重要野生型位點Agouti基因以及調控色素生成的其他基因在水貂毛色中的功能研究尚處起步階段。本試驗以黑貂、咖啡貂和白貂為試驗材料對Agouti基因進行克隆、結構分析和進化研究,并對黑貂和咖啡貂皮膚組織轉錄組測序,對調控毛色合成的DCT和Tyrp1基因5’UTR區(qū)克隆和啟動子活性區(qū)域研究,為水貂皮毛色澤的遺傳基礎提供理論依據(jù),并為豐富水貂皮毛色澤的育種實踐提供指導。PCR擴增測序獲得包含全部編碼區(qū)的長25 478 bp水貂Agouti基因序列（KP981640）,發(fā)現(xiàn)其中有53.9%的轉座元件、34.5%的回文結構以及串聯(lián)重復和SSR等,形成Agouti基因復雜的二級折疊結構。水貂Agouti基因內含子3存在601 bp的SINE插入突變,缺失型為優(yōu)勢基因。黑貂該位點的基因型構成偏離哈德溫伯格平衡狀態(tài),白貂和咖啡貂均處于平衡狀態(tài)。黑貂的插入型基因頻率低于白貂和咖啡貂（P<0.05）;對SINE缺失型998 bp和插入型1605 bp片... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學河北省

【文章頁數(shù)】：135 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

毛囊結構示意圖(OsawaM,2009)[4]

水貂Agouti基因結構進化與作用機制研究3圖1-2鼠黑色素細胞發(fā)育示意圖(OsawaM,2009)[4]Fig.1-2Schematicdrawingofmelanocytedevelopmentinthemouse圖1-2顯示了鼠黑色素細胞的發(fā)育過程。9.5-10.5胚齡的鼠胚胎成黑素細胞在神經(jīng)棘出現(xiàn)，并具有DCT、Kit、MITF、Pax3、Sox10和Si的表達標記。12.5-13.5胚齡時，成黑素細胞遷移進入表皮，增殖分布到整個身體，這些遷移的成黑素細胞表達標記物增加了黑素體的蛋白成分Tyr和Tyrp1。一旦毛囊形態(tài)發(fā)生，成黑素細胞分割成兩個群體，毛發(fā)基質的黑色素細胞比遷移的成黑素細胞表達標記增加了MC1R和Oa1（GPR143），膨大部的成黑素細胞的標記物Kit、MITF、Pax3、Sox10、Tyr和TYRP1表達下調[7,8]。成黑素細胞沿背外側遷移，哺乳動物的成黑素細胞增殖遷移分布在整個表皮層，而魚停留在真皮層。如果成黑素細胞發(fā)育受阻，將導致動物毛發(fā)皮膚的斑駁、斑點等色素不足，表現(xiàn)為頭部白斑、腹部白斑和花斑等典型特征。成黑素細胞在胚胎上皮的分布不均一：頭部、頸部和尾部密度高，軀干部低。2.2黑色素細胞發(fā)育過程的調控圖1-3黑色素細胞發(fā)育過程中的調控因子Fig.1-3Regulatorsduringmelanocytedevelopment圖1-3圖示黑色素細胞發(fā)育變化的整個過程及參與其中的調控因子。多潛能神經(jīng)嵴干細胞（NCSC）在Wnt、Notch、Slug和Tfap2的信號作用下轉化為雙潛能膠質-黑素細胞干細胞，在Sox10、EDNRB、EDN3作用下轉化為胚胎成黑素細胞，Dct、Mitf、c-kit和Notch作用下轉化為成熟的黑素干細胞，其中有Dct、Pax3、Mitf和Notch的表達；繼續(xù)轉化為準黑色素細胞，

水貂Agouti基因結構進化與作用機制研究3圖1-2鼠黑色素細胞發(fā)育示意圖(OsawaM,2009)[4]Fig.1-2Schematicdrawingofmelanocytedevelopmentinthemouse圖1-2顯示了鼠黑色素細胞的發(fā)育過程。9.5-10.5胚齡的鼠胚胎成黑素細胞在神經(jīng)棘出現(xiàn)，并具有DCT、Kit、MITF、Pax3、Sox10和Si的表達標記。12.5-13.5胚齡時，成黑素細胞遷移進入表皮，增殖分布到整個身體，這些遷移的成黑素細胞表達標記物增加了黑素體的蛋白成分Tyr和Tyrp1。一旦毛囊形態(tài)發(fā)生，成黑素細胞分割成兩個群體，毛發(fā)基質的黑色素細胞比遷移的成黑素細胞表達標記增加了MC1R和Oa1（GPR143），膨大部的成黑素細胞的標記物Kit、MITF、Pax3、Sox10、Tyr和TYRP1表達下調[7,8]。成黑素細胞沿背外側遷移，哺乳動物的成黑素細胞增殖遷移分布在整個表皮層，而魚停留在真皮層。如果成黑素細胞發(fā)育受阻，將導致動物毛發(fā)皮膚的斑駁、斑點等色素不足，表現(xiàn)為頭部白斑、腹部白斑和花斑等典型特征。成黑素細胞在胚胎上皮的分布不均一：頭部、頸部和尾部密度高，軀干部低。2.2黑色素細胞發(fā)育過程的調控圖1-3黑色素細胞發(fā)育過程中的調控因子Fig.1-3Regulatorsduringmelanocytedevelopment圖1-3圖示黑色素細胞發(fā)育變化的整個過程及參與其中的調控因子。多潛能神經(jīng)嵴干細胞（NCSC）在Wnt、Notch、Slug和Tfap2的信號作用下轉化為雙潛能膠質-黑素細胞干細胞，在Sox10、EDNRB、EDN3作用下轉化為胚胎成黑素細胞，Dct、Mitf、c-kit和Notch作用下轉化為成熟的黑素干細胞，其中有Dct、Pax3、Mitf和Notch的表達；繼續(xù)轉化為準黑色素細胞，

【參考文獻】：
期刊論文
[1]美洲水貂刺鼠信號蛋白基因SNPs檢測及其與毛色表型的關聯(lián)分析[J]. 宋興超,徐超,劉宗岳,岳志剛,叢波,劉琳玲,楊福合.  畜牧獸醫(yī)學報. 2016(04)
[2]狐貍Agouti基因SNPs篩查及其與毛色關聯(lián)性分析[J]. 李英杰,劉錚鑄,鞏元芳,徐桂利,張磊,唐家明,段玲欣,劉謝榮,郭秀玲,陸奇玉.  畜牧獸醫(yī)學報. 2015(09)
[3]哺乳動物毛色形成機制與影響因素[J]. 吳宇婷.  四川動物. 2011(06)
[4]Agouti在不同顏色被毛羊駝皮膚組織中的表達[J]. 姜俊兵,趙志軍,賀俊平,謝建山,董常生.  畜牧與獸醫(yī). 2007(04)



本文編號：3282890