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植物源藥物篩選及小檗堿抑制番茄早疫病菌作用機(jī)制的研究

發(fā)布時間:2021-07-11 04:46
  番茄是世界上種植面積居于第二的農(nóng)作物,番茄早疫病是番茄上的主要病害,造成全球性的番茄田間和產(chǎn)后巨大的經(jīng)濟(jì)損失。番茄早疫病的防治迫在眉睫。目前番茄早疫病的防治手段主要為化學(xué)農(nóng)藥,然而農(nóng)藥殘留造成環(huán)境污染,人畜中毒以及致病菌抗藥性增加產(chǎn)生變種等一系列問題。經(jīng)濟(jì)、安全、高效的植物源農(nóng)藥恰恰能克服化學(xué)農(nóng)藥的缺點(diǎn),植物源農(nóng)藥具有環(huán)境友好、對非靶標(biāo)生物安全、不易產(chǎn)生抗性、作用方式特異、促進(jìn)作物生長并提高抗病性、種類多、開發(fā)途徑多等特點(diǎn)。植物源農(nóng)藥有望成為代替化學(xué)農(nóng)藥的新一代藥物。本課題研究的目的是尋找代替化學(xué)農(nóng)藥的新型植物源農(nóng)藥并探究其抗菌機(jī)制,為植物源農(nóng)藥防治早疫病奠定基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與工作包括以下幾個方面的內(nèi)容:1.研究旨在尋找出防治番茄早疫病的經(jīng)濟(jì)、安全、高效的植物源藥物。此部分測定了 13種植物源藥物對番茄早疫病菌的抑制情況,小檗堿對番茄早疫病菌的抑制效果最好,對小檗堿進(jìn)一步進(jìn)行毒力測定,其EC50僅為60 μg/mL,MIC為300 μg/mL。在顯微鏡下觀察小檗堿處理前后菌絲形態(tài),發(fā)現(xiàn)小檗堿處理后,菌絲表面變形,褶皺。把番茄早疫病菌轉(zhuǎn)接到番茄上進(jìn)行活體實(shí)驗(yàn),番茄上產(chǎn)生病斑,說明此菌確實(shí)... 

【文章來源】:北京化工大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:99 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

植物源藥物篩選及小檗堿抑制番茄早疫病菌作用機(jī)制的研究


圖1-3等效線法示意圖??Fig.?1-3?Isoboles?of?diagram??

穩(wěn)定同位素標(biāo)記,親和純化,細(xì)胞培養(yǎng)


?.?associated??t?O?#擔(dān)犖琛輳犚唬海牐媯牐牽崳?unlabeled?proteome?LaDeied?proteome?In-gel-^uoresce^ce?scanning??(IGFS)??圖1-4ABPP探針結(jié)構(gòu)??Fig.?1-4?Schemic?diagram?and?the?struture?of?ABPP??注:A為ABPP結(jié)構(gòu)組成;B為ABPP工作原理??Note:?A?shows?the?structure?of?ABPP;?B?shows?the?machinism??1.7.2依賴于親和純化技術(shù)的方法??該技術(shù)原理就是把藥物分子固定在固定相上,與細(xì)胞裂解液溫育,去除沒有結(jié)??合打蛋白質(zhì),在通過洗脫等方法得到靶標(biāo)蛋白。有研宄尋找小分子藥物靶標(biāo)的方法??是將親和純化技術(shù)同細(xì)胞培養(yǎng)穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)(SILAC)相結(jié)合他們對激酶??抑制劑和免疫親和素配體結(jié)合物的靶蛋白進(jìn)行了鑒定。基本過程就是同位素標(biāo)記,??微珠篩選目的蛋白,再洗脫下小分子藥物,進(jìn)行SDS-PAGE電泳,胰蛋白酶酶解,??質(zhì)譜鑒定,即得到靶標(biāo)蛋白。此類方法的優(yōu)點(diǎn)為樣品用量少、精確、高效,但也有??工作量大的缺點(diǎn)。??Q—?A?f?8?1??U9W?黯冰\一,?,?_,NS?☆??人=?二ds?—1?I?T??w?|||?||?y?J??Heavy?SM-Beads?Legend??Small?rmlecuSe?_??Bead?〇??Proteins?|☆么??圖1-5細(xì)胞培養(yǎng)穩(wěn)定同位素標(biāo)記法(SILAC)結(jié)合親和純化法鑒定??Fig.?1-5?Target?identifi

模擬圖,功能研究,膜蛋白,模擬圖


翁??Drug?target??圖1-6?DARTS實(shí)驗(yàn)原理圖(A:?DARTS?—覽圖;B:?DARTS原理模擬圖)??Fig.?1-6?Schematic?diagram?of?DARTS?approach(A:?Schematic?of?DARTS;?B:?Theoretical?model??for?DARTS)??12??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Antibacterial Mechanisms of Berberine and Reasons for Little Resistance of Bacteria[J]. JIN Jian-ling,HUA Guo-qiang,MENG Zhen,GAO Pei-ji State Key Laboratory of Microbial Technology,School of Life Sciences,Shandong University,Jinan 250100,China.  Chinese Herbal Medicines. 2011(01)
[2]15種中藥提取物對幾種植物病原菌抑菌活性的初步研究[J]. 張應(yīng)烙,尹彩萍.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2005(S1)
[3]殺菌劑混劑的增效作用[J]. 劉學(xué)敏,李立軍.  農(nóng)藥科學(xué)與管理. 2002(05)
[4]獲取復(fù)配農(nóng)藥最佳增效配方的一種簡易方法[J]. 陳立,徐漢虹,趙善歡.  生物數(shù)學(xué)學(xué)報(bào). 2001(04)

碩士論文
[1]評價(jià)小檗堿作為天然化合物抑制挑褐腐菌[D]. 符偉輝.北京化工大學(xué) 2012



本文編號:3277367

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