本文探討了重金屬鎘在擬環(huán)紋豹蛛體內的富集規(guī)律,并通過RNA-seq技術來分析鎘脅迫下擬環(huán)紋豹蛛毒腺和腦神經節(jié)基因表達及功能的影響,主要的研究結果為:1.用濃度1.00mg/L氯化鎘配制培養(yǎng)基飼養(yǎng)果蠅,飼養(yǎng)7天時,果蠅體內鎘富集量達峰值;用飼養(yǎng)7天左右的果蠅喂養(yǎng)擬環(huán)紋豹蛛,擬環(huán)紋豹蛛體內鎘富集量隨飼養(yǎng)時間的延長而遞增,至30天時,擬環(huán)紋豹蛛體內鎘富集量達峰值（7.25μg/g）,隨后稍有下降并維持一個較為穩(wěn)定的水平。因此,本研究取富集重金屬鎘30天的蜘蛛做轉錄組分析。2.對擬環(huán)紋豹蛛毒腺進行轉錄組測序,拼接得到92778條平均長度1103.9bp的Unigene�；虮磉_分析顯示,鎘脅迫蜘蛛毒腺中相對于正常蜘蛛毒腺有237條基因顯著差異表達（FDR≤0.01,絕對值Log2foldchange>2）,其中上調107條,下調130條。對差異基因進行GO富集分析,發(fā)現(xiàn)上調差異基因主要富集在酶活性（金屬蛋白酶活性、泛素-蛋白轉移酶活性等）、離子通道方面（鈣離子通道）,表明鎘對擬環(huán)紋豹蛛細胞周期和離子穩(wěn)態(tài)造成影響;下調基因主要富集在類膽固醇激素方面,表明鎘可能影響擬環(huán)紋豹蛛生殖功能。對差異... 

【文章來源】：湖南農業(yè)大學湖南省

【文章頁數】：86 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

高通量測序流程

取消解管若干根，用硝酸浸泡過夜，使用時用自來水清洗干凈，再用蒸餾水潤洗三次過后，放入恒溫干燥箱內烘干。每個樣稱取對應動物樣品 0.3 g~0.5 g，在 50ml 消解管中用 1 %的硝酸對動物樣品進行浸泡一夜（12h），分別進行標記，記錄。再加入鹽酸 1.5 mL，硝酸 4.5 mL，放入消解儀上，90℃消解 1 h，隨后升溫到 120℃消解 2 h，待反應液完全變澄清后，150℃跑酸，待溶液剩余約為 1 mL 左右，取出，冷卻后用容量瓶定容到 50 mL，過濾后，使用電感耦合等離子光譜儀（ICP）在 228.3 nm 測定重金屬鎘含量。2.2.5 數據分析采用 Excel2003 軟件、SPSS17.0 軟件和 Origin2006 軟件對實驗數據進行處理、統(tǒng)計學分析及作圖。2.3 結果2.3.1 紅眼果蠅體內重金屬鎘富集情況

圖 2-2:不同濃度下紅眼果蠅體內鎘富集量情況Figure 2-2：Enrichment of cadmium in Drosophila melanogaster at different concentrations從圖 2-2 可知，在同一天數，紅眼果蠅體內的重金屬鎘富集情況隨著濃度的增加而增加，0.05mg/L 濃度下紅眼果蠅重金屬鎘富集情況與 0.10mg/L 和 0.50mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L 和 10.00mg/L 濃度下紅眼果蠅體內重金屬富集量均存在顯著性差異（P<0.05），并且后一濃度紅眼果蠅體內的鎘富集量與前一濃度比較均具顯著性差異（P<0.05）。2.3.2 擬環(huán)紋豹蛛體內重金屬鎘富集情況從圖 2-3 可知，擬環(huán)紋豹蛛雌成蛛體內重金屬鎘富集量隨飼養(yǎng)時間的延長逐漸增加，30 天達到最高值，之后隨之減少�？芍� 30 天的擬環(huán)紋豹蛛體中重金屬鎘富集量最高。0 天時的擬環(huán)紋豹蛛體內重金屬鎘富集量相對其他八個濃度都存在顯著性差異（P<0.05），5 天時擬環(huán)紋豹蛛體內重金屬鎘富集量相對 0 天、25 天、30 天存在顯著

【參考文獻】：
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本文編號：3269659