玉米（Zea mays L.）是世界上產(chǎn)量最高的糧食作物,是中國的主要農(nóng)作物之一,在糧食和能源供應(yīng)、社會(huì)經(jīng)濟(jì)與生命科學(xué)研究方面都占有重要地位。研究表明,玉米穗腐病致病菌種類繁多,復(fù)雜多變;生產(chǎn)上玉米品種大多表現(xiàn)感病,育種上缺乏有效抗源和可供利用的抗性基因,是穗腐病普遍發(fā)生的重要因素�；诖�,本文研究了我國黑龍江省玉米穗腐病致病鐮孢菌種群構(gòu)成及分布情況,進(jìn)一步對中國16個(gè)省市鑒定的優(yōu)勢致病鐮孢菌進(jìn)行了遺傳多樣性群體結(jié)構(gòu)分析,同時(shí)以掖478為母本,齊319為父本構(gòu)建的重組自交系群體為材料,進(jìn)行人工接種精準(zhǔn)鑒定,在多個(gè)環(huán)境中檢測與擬輪枝鐮孢穗腐病抗性相關(guān)的數(shù)量性狀基因座（QTL）,發(fā)掘?qū)Νh(huán)境鈍感的抗性基因位點(diǎn)并進(jìn)行候選基因分析,以期為育種生產(chǎn)提供抗性基因資源。結(jié)果如下:1.明確了黑龍江玉米穗腐病致病鐮孢的復(fù)雜性,禾谷鐮孢復(fù)合種與藤倉鐮孢復(fù)合種為主要致病種。在黑龍江省21個(gè)玉米主產(chǎn)區(qū)縣采集的143份病樣中檢測到以鐮孢菌為主的6屬真菌,根據(jù)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法鑒定出12種鐮孢種,包括禾谷鐮孢、擬輪枝鐮孢、亞黏團(tuán)鐮孢、層出鐮孢、布氏鐮孢、溫帶鐮孢、新知鐮孢、變紅鐮孢、擬枝孢鐮孢、早熟禾鐮孢、集群... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章黑龍江省玉米穗腐病致病鐮孢菌分離鑒定11股份有限公司進(jìn)行測序，測序拼接結(jié)果在NCBI的BLAST模塊進(jìn)行比對分析。2.2.4鐮孢菌產(chǎn)毒化學(xué)型分析通過采用產(chǎn)毒基因分子方法對分離鐮孢菌進(jìn)行產(chǎn)毒化學(xué)型的分子檢測，選用的引物Tri13P1/2：5’-CTCSACCGCATCGAAGASTCTC-3’/5’-GAASGTCGCARGACCTTGTTTC-3’，退火溫度為58°C，15-AcDON化學(xué)型的菌株擴(kuò)增片段為583bp，3-AcDON化學(xué)型的菌株擴(kuò)增片段為644bp，NIV化學(xué)型的菌株擴(kuò)增片段為859bp（WANGetal.,2008）。對鐮孢菌分離物檢測產(chǎn)伏馬毒素fum1基因的引物序列為Fum5F/Fum5R：5’-GTCGAGTTGTTGACCACTGCG-3/5’-CGTATCGTCAGCATGATGTAGC-3’，退火溫度為62°C，菌株擴(kuò)增片段為644bp。擴(kuò)增程序：94°C預(yù)變性3min，進(jìn)入循環(huán)，93°C變性45s，62°C復(fù)性lmin，72°C延伸1min，共35個(gè)循環(huán)，再72°C延伸10min，4°C保存（ZAINUDINetal.,2011）。2.3結(jié)果與分析2.3.1玉米籽粒攜帶真菌分析在143份玉米穗腐病病樣中，分離到鐮孢菌屬、曲霉屬（Aspergillus）、腐霉屬（Pythium）、青霉屬（Penicillium）、木霉屬（Trichoderma）以及黑附球菌（Epicoccumnigrum）等，分離頻率分別為80.95%、5.76%、2.91%、1.19%、0.74%和0.01%。禾谷鐮孢特異性PCR產(chǎn)物見圖2-1。圖2-1禾谷鐮孢特異性PCR產(chǎn)物Fig.2-1SpecificPCRproductsofF.graminearum(280bp)M：DNAMarker，DL2000；1-8：禾谷鐮孢F.graminearum2.3.2鐮孢菌的分離頻率及分布ACDEB

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章黑龍江省玉米穗腐病致病鐮孢菌分離鑒定12圖2-2部分鐮孢菌分生孢子圖Fig.2-2ConidiaofsomeFusariumspp.A：禾谷鐮孢F.graminearum；B：變紅鐮孢F.incarnatum；C：集群鐮孢F.commune；D：早熟禾鐮孢F.poae；E：擬輪枝鐮孢F.verticillioides；F：擬枝孢鐮孢F.sporotrichioides；G：層出鐮孢F.proliferatum；H亞黏團(tuán)鐮孢F.subglutinans；I新知鐮孢F.andiyazi；J溫帶鐮孢F.temperatum表2-2玉米穗腐病鐮孢菌的分離頻率及分布Table2-2IsolationfrequencyanddistributionofFusariumspp.causingmaizeearrot菌名分離頻率%分布地區(qū)Fusariumspp.IsolationFrequencyAreas禾谷鐮孢30.00除肇東、林甸縣外另19個(gè)采集地均有擬輪枝鐮孢16.00除綏化外，另20個(gè)采集地均有亞黏團(tuán)鐮孢13.00肇源、安達(dá)、富拉爾基區(qū)、穆棱、雙城區(qū)、密山、嫩江縣、林甸縣、富錦、五常層出鐮孢13.00肇源、安達(dá)、北安、龍江、虎林、雙城區(qū)、五常、寧安、穆棱、肇東、富拉爾基區(qū)、密山、肇州、尚志、鶴崗布氏鐮孢12.50安達(dá)、肇源縣、依安縣、穆棱、饒河縣、密山、肇州、雙城區(qū)、寧安溫帶鐮孢7.50饒河縣、富拉爾基區(qū)、虎林、穆棱、哈爾濱雙城區(qū)、鶴崗新知鐮孢2.50肇源、饒河縣變紅鐮孢2.00安達(dá)、鶴崗擬枝孢鐮孢1.00安達(dá)早熟禾鐮孢1.00富錦集群鐮孢1.00饒河縣亞洲鐮孢0.50穆棱從143份樣品中共分離得到200株單孢分離物，共鑒定出12種鐮孢種，分別為禾谷鐮孢、擬輪枝鐮孢、亞黏團(tuán)鐮孢、層出鐮孢、布氏鐮孢（F.boothii）、溫帶鐮孢（F.temperatum）、新知鐮孢、變紅鐮孢、擬枝孢鐮孢（F.sporotrichioides）、早熟禾鐮孢（F.poae）、集群鐮孢（F.commune）和亞洲鐮孢（F.asiaticum），分離頻率依次為30.00%、16.00%、13.00%、13.00%、12.50%

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3267649