微孢子蟲(chóng)（Microsporidia）是一類(lèi)專(zhuān)性寄生于細(xì)胞內(nèi)的單細(xì)胞真核微生物,在自然界中廣泛存在。微孢子蟲(chóng)寄主廣泛,影響宿主的生長(zhǎng)發(fā)育,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致宿主死亡。家蠶微粒子（Nosema bombycis,N.b）是最早被認(rèn)識(shí)的微孢子蟲(chóng),也是Nosema屬的重要成員之一,它能夠感染重要泌絲經(jīng)濟(jì)昆蟲(chóng)家蠶（Bombyx mori）引發(fā)家蠶微粒子�。≒ébrine）,給養(yǎng)蠶業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此,對(duì)家蠶微粒子生活史的研究以及對(duì)其侵染路徑和增殖過(guò)程進(jìn)行標(biāo)記示蹤,將為家蠶微粒子的基礎(chǔ)研究和有效防控奠定基礎(chǔ)。家蠶微粒子具有嚴(yán)格的寄生生活方式,只有在宿主細(xì)胞內(nèi)才能進(jìn)行增殖,完成生活周期。目前微孢子蟲(chóng)示蹤大多采用標(biāo)記成熟微孢子蟲(chóng)的方法,而胞內(nèi)階段的未成熟微孢子蟲(chóng)很難被發(fā)現(xiàn),且不能對(duì)微孢子蟲(chóng)進(jìn)行活體標(biāo)記和實(shí)時(shí)觀(guān)察,限制了對(duì)其生活周期和侵染增殖機(jī)制的研究�？梢暬氖聚櫦夹g(shù)是研究病原入侵、增殖以及和宿主互作的有效手段,通過(guò)基因操作實(shí)現(xiàn)外源熒光蛋白活體示蹤已在其他病原中廣泛應(yīng)用,但由于缺乏微孢子蟲(chóng)遺傳操作體系,現(xiàn)階段尚未獲得活體示蹤微孢子蟲(chóng)。鑒于此,本文首先對(duì)家蠶微粒子侵染BmE-SWU1細(xì)胞的特征進(jìn)行了分... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

成熟微孢子蟲(chóng)超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖

將感染性的孢原質(zhì)通過(guò)極管注入到宿主細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)行胞內(nèi)增殖，該過(guò)有大量證據(jù)證明并普遍被人們所接受[29-31]。在對(duì)兔腦炎微孢子蟲(chóng)侵染細(xì)胞研過(guò)程中還發(fā)現(xiàn)一種通過(guò)吞噬作用的感染方式，孢子在彈出極管之前通過(guò)吞噬進(jìn)入宿主細(xì)胞，轉(zhuǎn)化為溶菌體，一些孢子在溶菌體中被消化，還有一些能夠消化之前彈出極管將孢原質(zhì)釋放到宿主細(xì)胞內(nèi)，完成入侵[32,33](圖 1.2)。無(wú)論種方式，微孢子蟲(chóng)入侵宿主都離不開(kāi)極管的彈出，這一過(guò)程包括了巨大力量累和控制釋放，是一個(gè)快速并緊密相連的級(jí)聯(lián)事件[2,34]。微孢子蟲(chóng)的發(fā)芽需要物理或化學(xué)因子的刺激，其中包括環(huán)境 pH 的變化、Ca2+、陰離子和陽(yáng)離子、壓變化、暴露于紫外輻射下或過(guò)氧化物中等條件[35-38]。這些物理或化學(xué)刺激微孢子蟲(chóng)內(nèi)部滲透壓升高。關(guān)于這種壓力產(chǎn)生的機(jī)制有兩種觀(guān)點(diǎn)，一種認(rèn)為子蟲(chóng)的孢壁上有特殊的跨膜水通道，水分可以快速特異的通過(guò)水通道蛋uaporin)運(yùn)輸?shù)芥咴|(zhì)內(nèi)，導(dǎo)致孢內(nèi)壓力增大，引發(fā)孢子的發(fā)芽[23,39]。另一種認(rèn)為，微孢子蟲(chóng)的海藻糖降解為葡萄糖和其他相關(guān)的代謝導(dǎo)致孢內(nèi)葡萄糖濃升，促使水分進(jìn)入孢子內(nèi)部，孢子內(nèi)壓升高[40]。孢子內(nèi)部具體發(fā)生了哪些分件最終導(dǎo)致極管的彈出尚未完全清楚。

蟲(chóng)的 EnP1 均含有 2～3 個(gè)糖胺聚糖的結(jié)合基序，體外實(shí)驗(yàn)表明外源1 通過(guò)自身肝素結(jié)合基序參與孢子的粘附過(guò)程，孢壁蛋白在孢子接近附過(guò)程中起著重要的作用，但具體作用機(jī)制尚不清楚[40,43]。抑制微過(guò)程會(huì)降低孢子的感染率，表明微孢子蟲(chóng)的粘附和侵染有著直接的目前認(rèn)為微孢子蟲(chóng)彈出極管侵染宿主細(xì)胞的事件分為 5 個(gè)步驟：(胞的粘附；(2)孢子發(fā)芽；(3)孢子內(nèi)部滲透壓上升；(4)極管外翻彈通過(guò)極管釋放到宿主細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中[40,41]。孢子蟲(chóng)的生活史孢子蟲(chóng)作為嚴(yán)格寄生于宿主細(xì)胞內(nèi)的微生物，只有在感染宿主細(xì)胞的生活周期。微孢子蟲(chóng)的生活周期不僅是分類(lèi)的依據(jù)也是研究侵染徑。各國(guó)學(xué)者對(duì)微孢子蟲(chóng)的生活史進(jìn)行了深入、細(xì)致的研究，從不子蟲(chóng)的生活周期進(jìn)行界定，盡管結(jié)果存在差異，但總體上可以分為期(infective phase)、裂殖增殖期(proliferative phase)和孢子增殖期(,23](圖 1.3)。


本文編號(hào)：3248533