茶輪斑病是危害茶樹[Camellia sinensis（L.）O.Kuntze]生產(chǎn)的重要病害,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致葉片大量脫落,影響茶葉品質(zhì)和產(chǎn)量,目前在我國茶園中廣泛發(fā)生。茶擬盤多毛孢（Pestalotiopsis theae）是引起茶輪斑病的優(yōu)勢(shì)種。我們前期在田間分離獲得了一株致病力喪失的茶擬盤多毛孢菌株LI-41,其較正常菌株表現(xiàn)出菌落形態(tài)異常,菌絲生長速度緩慢。本研究是針對(duì)菌株LI-41生物學(xué)性狀發(fā)生變化的原因進(jìn)行了探索,所得結(jié)果如下:對(duì)菌株LI-41和正常菌株（TP-2-2W）的菌絲進(jìn)行雙鏈RNA（double stranded RNA,ds RNA）的提取,發(fā)現(xiàn)LI-41菌株中含有4條ds RNA片段（ds RNA1-4）,隨機(jī)克隆以及末端克隆測(cè)序顯示,其大小分別為3387、2831、2599和932 nt,分析推測(cè)每一條ds RNA分別編碼一個(gè)獨(dú)立的開放閱讀框（Open-Reading Frame,ORF）,依次命名為ORF1、ORF2、ORF3和ORF4。將獲得的4條ds RNA序列編碼蛋白采用BLASTp與登錄在NCBI中的序列比對(duì),顯示該病毒ORF1-3編碼蛋白與金色病毒... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

菌株TP-2-2W和LI-41ITS基因片段的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳分析

的觀察：相比前期保存的正常菌株 TP-2-2W 菌絲紋圈且生長速度正常（圖 3.2A）；而菌株 LI-41 菌，生長緩慢（圖 3.2A）。度的測(cè)定：根據(jù)菌絲的生長速度測(cè)定結(jié)果顯示速度較菌株 LI-41 的快，約為 9 mm/d，而菌株 LI-4 3.3A）。的測(cè)定：在有傷接種的情況下，菌株 LI-41 的致2 B），在接種 6 d 后測(cè)量得到 TP-2-2W 和 LI-41 的.18 cm，致病力顯著差異。在無傷接種的情況下，而 LI-41 的則無致病力（圖 3.2 B）。測(cè)得 TP-2-2W 病斑直徑為 0 cm。由此表明，菌株 LI-41 在有傷件下無致病力（圖 3.3 B）。

3.3 茶擬盤多毛孢 TP-2-2W 和 LI-41 的菌絲生長速度（A）和致病力柱狀圖（B）ig.3.3 Bar graphy of growth rates (A) and virulences (B) of strains TP-2-2W and LI-41株 LI-41 中核酸的分析鑒定株 LI-41 中核酸的提取及酶處理驗(yàn)證提取的菌株 LI-41 和 TP-2-2W 的核酸進(jìn)行 DNaseI、S1 核酸酶處理，瓊脂電泳后發(fā)現(xiàn)，只有菌株 LI-41 中有 4 條 dsRNA 條帶，大小在 930-3400 之別命名為 dsRNA1-dsRNA4（圖 3.4）。株 LI-41 中 dsRNA 全長 cDNA 序列的克隆與分析對(duì)菌株 LI-41 的 4 條 dsRNA 條帶瓊脂糖凝膠電泳后，對(duì) 4 條 dsRNA 條帶化回收，經(jīng)過隨機(jī)克隆以及末端克隆后，得到 4 條 dsRNA 帶的全長 cDNA

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]幾種殺菌劑對(duì)茶輪斑病菌的室內(nèi)毒力及田間藥效[J]. 郭世保,陳俊華,史洪中.  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(10)
[2]茶業(yè)可持續(xù)發(fā)展中的植保問題[J]. 陳宗懋,陳雪芬.  茶葉科學(xué). 1999(01)
[3]世界茶樹病蟲區(qū)系分析(英文)[J]. 陳宗懋,陳雪芬.  茶葉科學(xué). 1989(01)
[4]世界茶樹病原名錄[J]. 陳宗懋,陳雪芬.  茶葉科學(xué). 1988(02)

博士論文
[1]葡萄孢屬植物病原菌真菌病毒研究[D]. 吳明德.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012

碩士論文
[1]禾谷鐮刀菌AMT1基因的功能研究[D]. 王光輝.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3244278