家蠶是一種重要的經(jīng)濟(jì)昆蟲(chóng),在栽桑養(yǎng)蠶的過(guò)程中容易受到感染,給蠶絲產(chǎn)業(yè)帶來(lái)影響。先天免疫是昆蟲(chóng)唯一的防護(hù)屏障,明確家蠶先天免疫的分子機(jī)制是蠶病防治的關(guān)鍵。肽聚糖識(shí)別蛋白作為先天免疫中重要的免疫因子,在識(shí)別病原物、激活Toll通路和IMD通路、調(diào)節(jié)昆蟲(chóng)體內(nèi)免疫應(yīng)答等反應(yīng)中起關(guān)鍵性作用。本研究為了明確家蠶肽聚糖識(shí)別蛋白Bm PGRP-L4,在家蠶先天免疫反應(yīng)中的作用,采用分子生物學(xué)技術(shù)手段對(duì)Bm PGRP-L4的功能進(jìn)行了初步的探究。本研究利用RT-PCR和TA克隆技術(shù)克隆Bm PGRP-L4基因完整開(kāi)放閱讀框,并對(duì)其基因序列以及其編碼的氨基酸序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析。采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)Bm PGRP-L4基因的表達(dá)譜。將革蘭氏陰性菌大腸桿菌和革蘭氏陽(yáng)性菌金黃色葡萄球菌分別喂食和注射感染家蠶5齡第3天幼蟲(chóng),通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR分析感染后,Bm PGRP-L4基因在不同組織不同時(shí)間點(diǎn)相對(duì)表達(dá)水平的變化。采用RNA干擾技術(shù),向5齡家蠶體內(nèi)注射雙鏈RNA,通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR分析Bm PGRP-L4基因在不同組織不同時(shí)間點(diǎn)相對(duì)表達(dá)水平被抑制的情況。構(gòu)建Bm PGRP-L4表達(dá)載體,表達(dá)Bm PG... 

【文章來(lái)源】：廣州大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：96 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

家蠶示意圖

肽聚糖結(jié)構(gòu)示意圖(Vollmeretal.,2008)

果蠅先天性免疫Toll通路和IMD通路示意圖(李國(guó)輝等,2015)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]蛻皮激素對(duì)家蠶脂肪體中BmATG8蛋白亞細(xì)胞定位與細(xì)胞核皺縮的調(diào)控[J]. 張淑堯,戴易晨,吳坤鐘,李暑燕,曹陽(yáng),鄧小娟,田鈴.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2019(05)
[2]家蠶幼蟲(chóng)BmToll9基因?qū)﹄木厶呛徒瘘S色葡萄球菌的響應(yīng)表達(dá)[J]. 黃燕玲,黃詩(shī)怡,李樹(shù)強(qiáng),何艷影,陳澤敏,劉吉升.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2019(04)
[3]淺談蠶常見(jiàn)病的防治技術(shù)[J]. 董輝.  農(nóng)民致富之友. 2018(11)
[4]家蠶Met1基因的表達(dá)與組織定位分析[J]. 易文瑾,馬瓊,溫眾杰,劉琳,馮啟理,鄧惠敏.  蠶業(yè)科學(xué). 2017(05)
[5]脂多糖對(duì)家蠶幼蟲(chóng)Toll樣受體基因BmToll9-2表達(dá)的影響[J]. 廖文麗,卜曉玲,江婉儀,劉吉升.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2017(04)
[6]RNAi技術(shù)控制害蟲(chóng)的機(jī)制與應(yīng)用[J]. 閘雯俊,李三和,周雷,劉凱,徐華山,陳志軍,楊國(guó)才,劉凱,李培德,游艾青.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2017(07)
[7]昆蟲(chóng)RNA干擾中雙鏈RNA的轉(zhuǎn)運(yùn)方式[J]. 劉吉升,朱文輝,廖文麗,卜曉玲,江婉儀.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2016(06)
[8]果蠅先天免疫分子機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 李國(guó)輝,周倩,胡朝陽(yáng),唐琦,邱立鵬,姚勤.  生命科學(xué)研究. 2015(06)
[9]昆蟲(chóng)肽聚糖識(shí)別蛋白研究進(jìn)展[J]. 陳康康,呂志強(qiáng).  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2014(08)
[10]PGRP和Cecropin基因在家蠶中腸和脂肪體中的免疫模式研究[J]. 王傳旭.  山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2014(02)

博士論文
[1]家蠶中腸免疫轉(zhuǎn)錄組分析及家蠶肽聚糖識(shí)別蛋白-S5的功能研究[D]. 陳康康.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]家蠶表皮蛋白基因的表達(dá)譜分析及表皮蛋白BmorCPT1的功能研究[D]. 梁九波.西南大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3240462