細(xì)胞色素P450在昆蟲體內(nèi)廣泛存在,既能參與內(nèi)源物質(zhì)的合成和分解,又在外源物質(zhì)的解毒和代謝過程發(fā)揮作用,影響昆蟲的生長(zhǎng)發(fā)育。黏蟲作為農(nóng)業(yè)上重要的害蟲之一,在我國(guó)多個(gè)地區(qū)廣泛為害,造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。本研究在黏蟲轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得了一條新的P450基因,通過RT-PCR進(jìn)行序列驗(yàn)證后,將基因序列分析,對(duì)其分子特性進(jìn)行研究,并通過熒光定量PCR和RNAi技術(shù)對(duì)其功能進(jìn)行深入研究,探究其在黏蟲外源物質(zhì)的解毒和對(duì)自然環(huán)境的適應(yīng)性方面的重要作用,為P450基因分子靶標(biāo)的篩選和黏蟲的有效防治提供基礎(chǔ)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:（1）本研究獲得了一條黏蟲P450基因序列。序列總長(zhǎng)2081 bp,包含長(zhǎng)為1671 bp的開放閱讀框,編碼556個(gè)氨基酸,分子量約為63.25 kDa,等電點(diǎn)為8.43,由國(guó)際P450命名委員會(huì)命名為CYP4G200,GenBank登錄號(hào)為MG829854。進(jìn)化分析表明其與鱗翅目夜蛾科昆蟲首先聚類,與鱗翅目非夜蛾科昆蟲再聚類,與非鱗翅目昆蟲最后聚類,符合形態(tài)分類特征。（2）黏蟲CYP4G200基因在不同發(fā)育階段和不同組織中均有表達(dá),但表達(dá)量存在差異。2⁵齡... 

【文章來(lái)源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

黏蟲CYP4G200信號(hào)肽預(yù)測(cè)

有信號(hào)肽切割位點(diǎn)，說(shuō)明該蛋白可能為膜結(jié)合蛋白，見圖 3-2。橫坐標(biāo)代表 N 端前 70 個(gè)氨基酸，縱坐標(biāo)代表預(yù)測(cè)分?jǐn)?shù)。C-score 代表剪切位點(diǎn)值，S-score 代趨勢(shì)，Y-score 代表 S 值和 C 值的綜合參數(shù)圖 3-2 黏蟲 CYP4G200 信號(hào)肽預(yù)測(cè)Figure 3-2 Signal peptide prediction of CYP4G200 from M. separate過 http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/網(wǎng)站預(yù)測(cè)黏蟲 CYP4G200編碼的蛋白顯示其跨膜片段約在 13~35 bp 之間，推測(cè)膜上物質(zhì)可能與蛋白結(jié)合，見圖 3-3

結(jié)果與分析蛾科的草地貪夜蛾 Spodoptera frugiperda、棉葉蟲 Spodoptera littoralis 和甜菜夜蛾的 CYP4G75聚類，然后與棉鈴蟲 CYP4G8 聚類，與馬鈴薯甲蟲 Leptinotarsa decemlineata 的 CYP4G29、岡比亞按蚊 CYP4G16 和印度跳蟻 Harpegnathos saltator 的 CYP4G15 等非夜蛾科昆蟲親緣性較遠(yuǎn)，此結(jié)果基本符合形態(tài)學(xué)分類，見圖 3-4。ACZ97444.1 Antheraea pernyi 柞蠶100

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3232171