多殺菌素高產(chǎn)菌株育種及培養(yǎng)基優(yōu)化
發(fā)布時(shí)間:2021-06-15 20:22
多殺菌素是由刺糖多孢菌有氧發(fā)酵經(jīng)次級(jí)代謝產(chǎn)生的一種微生物源殺蟲劑,因其具有使用安全、綠色環(huán)保、殺蟲活性高等優(yōu)勢(shì),成為當(dāng)前最具有開(kāi)發(fā)潛力的生物農(nóng)藥。本文針對(duì)實(shí)驗(yàn)室篩選到的一株刺糖多孢菌展開(kāi)研究,主要內(nèi)容有以下三部分。野生型刺糖多孢菌的多殺菌素產(chǎn)量較低,采用傳統(tǒng)的NTG化學(xué)誘變,旨在得到一株多殺菌素高產(chǎn)突變菌株,本實(shí)驗(yàn)采用濃度為1 mg/mL的NTG對(duì)刺糖多孢菌ASAG 36進(jìn)行誘變,初篩時(shí)得到2株多殺菌素產(chǎn)量提高20%以上的突變株和一株產(chǎn)量提高50%以上的突變株,但這3株菌的遺傳不穩(wěn)定。篩選刺糖多孢菌ASAG 36的發(fā)酵培養(yǎng)基,篩選到該菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)產(chǎn)多殺菌素的培養(yǎng)基配方,其配方為:葡萄糖50 g/L、胨化牛奶10 g/L,棉籽蛋白10 g/L,糊精15 g/L,酵母膏10 g/L,NaCl 0.5 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L,KH2PO4 0.5 g/L,CaCO33 g/L;同時(shí)對(duì)ASAG 36刺糖多孢菌進(jìn)行種子培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線的測(cè)定,結(jié)果表明,一級(jí)...
【文章來(lái)源】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省
【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
多殺菌素類化合物的結(jié)構(gòu)式[21]
圖 1-2 多殺菌素生物合成途徑[25]Fig1-2 The biosynthesis of spinosyn表 1-2 多殺菌素合成相關(guān)基因的功能Tab1-2 The function of spinosad biosynthesis linked gene基因 氨基酸數(shù)量 功能spnA 2596 聚酮鏈形成spnB 2513 聚酮鏈形成spnC 3171 聚酮鏈形成spnD 4929 聚酮鏈形成spnE 5589 聚酮鏈形成spnF 276 聚酮交聯(lián)橋形成spnG 391 鼠李糖轉(zhuǎn)移酶
圖 1-3 多殺菌素生產(chǎn)菌電鏡圖及刺狀表面掃描電鏡顯微圖1-3 Electron microscope (a) and scanning electron micrographs of Sacchaspinosa showing the spiny surface of the actinomycete(b)條件多孢菌進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)多殺菌素受到很多方面因素的限制,如培養(yǎng)基、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等)、種子培養(yǎng)狀況(種齡、種子密度等)、培養(yǎng)條氧等)等[34]。在培養(yǎng)基成分中,多殺菌素生產(chǎn)菌可利用的碳源有葡、馬鈴薯淀粉、玉米粉、果糖、蔗糖、甘露糖、半乳糖、乳糖、鼠;棉籽餅粉、酵母膏、胨化牛奶和玉米漿干粉等用作多殺菌素生產(chǎn);Na-、Mg2+、NH4+、SO42+、PO3+、Zn2+等無(wú)機(jī)鹽離子的添加能提產(chǎn)菌生長(zhǎng)所需的必要元素;另外,如乳酸鹽、檸檬酸鹽和乙酸鹽等進(jìn)刺糖多孢菌合成多殺菌素[35]。在多殺菌素發(fā)酵生產(chǎn)時(shí),添加如鐵、元素也能促進(jìn)刺糖多孢菌菌體的生長(zhǎng),并提高多殺菌素的產(chǎn)量[36]。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]植物源農(nóng)藥研發(fā)及中藥材生產(chǎn)中的應(yīng)用現(xiàn)狀[J]. 張鵬,李西文,董林林,陳士林. 中國(guó)中藥雜志. 2016(19)
[2]生物農(nóng)藥的發(fā)展現(xiàn)狀與趨勢(shì)分析[J]. 邱德文. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]殺蟲抗生素的研究進(jìn)展[J]. 陳園,張曉琳,黃穎,李曉敏. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2014(11)
[4]生物農(nóng)藥多殺菌素應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 姚瑛,李濤,李敏,高恒旭,陳九星,劉世明,謝曉輝. 精細(xì)化工中間體. 2013(06)
[5]多殺菌素產(chǎn)生菌的高通量誘變選育[J]. 陳園,熊犍,郭偉群,劉國(guó)麗,鄒球龍,張曉琳. 中國(guó)抗生素雜志. 2013(05)
[6]利用離子注入技術(shù)選育多殺菌素高產(chǎn)菌株[J]. 郭偉群,羅莉斯,李能威,張曉琳. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2012(04)
[7]新型生物農(nóng)藥-丁烯基多殺菌素[J]. 壽佳麗,裘娟萍. 農(nóng)藥. 2011(04)
[8]植酸的體內(nèi)抗氧化活性研究[J]. 陳園,仇農(nóng)學(xué),熊犍. 現(xiàn)代食品科技. 2011(02)
[9]刺糖多孢菌生產(chǎn)多殺菌素的研究進(jìn)展[J]. 蔡恒,王燕,萬(wàn)紅貴,蔣導(dǎo)航,王漢領(lǐng),趙宗松. 中國(guó)生物工程雜志. 2011(02)
[10]多殺菌素的提取和萃取條件研究[J]. 秦為輝,陳新,張曉琳,郭偉群,李麗,李能威. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2010(04)
碩士論文
[1]多殺菌素生物合成基因簇的克隆及異源表達(dá)載體的構(gòu)建[D]. 蘭周.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[2]多殺菌素高產(chǎn)菌株的誘變育種和發(fā)酵工藝優(yōu)化[D]. 李麗.天津科技大學(xué) 2010
[3]多殺菌素高產(chǎn)菌種的推理選育和發(fā)酵工藝的優(yōu)化[D]. 張?jiān)?浙江大學(xué) 2004
本文編號(hào):3231705
【文章來(lái)源】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省
【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
多殺菌素類化合物的結(jié)構(gòu)式[21]
圖 1-2 多殺菌素生物合成途徑[25]Fig1-2 The biosynthesis of spinosyn表 1-2 多殺菌素合成相關(guān)基因的功能Tab1-2 The function of spinosad biosynthesis linked gene基因 氨基酸數(shù)量 功能spnA 2596 聚酮鏈形成spnB 2513 聚酮鏈形成spnC 3171 聚酮鏈形成spnD 4929 聚酮鏈形成spnE 5589 聚酮鏈形成spnF 276 聚酮交聯(lián)橋形成spnG 391 鼠李糖轉(zhuǎn)移酶
圖 1-3 多殺菌素生產(chǎn)菌電鏡圖及刺狀表面掃描電鏡顯微圖1-3 Electron microscope (a) and scanning electron micrographs of Sacchaspinosa showing the spiny surface of the actinomycete(b)條件多孢菌進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)多殺菌素受到很多方面因素的限制,如培養(yǎng)基、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等)、種子培養(yǎng)狀況(種齡、種子密度等)、培養(yǎng)條氧等)等[34]。在培養(yǎng)基成分中,多殺菌素生產(chǎn)菌可利用的碳源有葡、馬鈴薯淀粉、玉米粉、果糖、蔗糖、甘露糖、半乳糖、乳糖、鼠;棉籽餅粉、酵母膏、胨化牛奶和玉米漿干粉等用作多殺菌素生產(chǎn);Na-、Mg2+、NH4+、SO42+、PO3+、Zn2+等無(wú)機(jī)鹽離子的添加能提產(chǎn)菌生長(zhǎng)所需的必要元素;另外,如乳酸鹽、檸檬酸鹽和乙酸鹽等進(jìn)刺糖多孢菌合成多殺菌素[35]。在多殺菌素發(fā)酵生產(chǎn)時(shí),添加如鐵、元素也能促進(jìn)刺糖多孢菌菌體的生長(zhǎng),并提高多殺菌素的產(chǎn)量[36]。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[4]生物農(nóng)藥多殺菌素應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 姚瑛,李濤,李敏,高恒旭,陳九星,劉世明,謝曉輝. 精細(xì)化工中間體. 2013(06)
[5]多殺菌素產(chǎn)生菌的高通量誘變選育[J]. 陳園,熊犍,郭偉群,劉國(guó)麗,鄒球龍,張曉琳. 中國(guó)抗生素雜志. 2013(05)
[6]利用離子注入技術(shù)選育多殺菌素高產(chǎn)菌株[J]. 郭偉群,羅莉斯,李能威,張曉琳. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2012(04)
[7]新型生物農(nóng)藥-丁烯基多殺菌素[J]. 壽佳麗,裘娟萍. 農(nóng)藥. 2011(04)
[8]植酸的體內(nèi)抗氧化活性研究[J]. 陳園,仇農(nóng)學(xué),熊犍. 現(xiàn)代食品科技. 2011(02)
[9]刺糖多孢菌生產(chǎn)多殺菌素的研究進(jìn)展[J]. 蔡恒,王燕,萬(wàn)紅貴,蔣導(dǎo)航,王漢領(lǐng),趙宗松. 中國(guó)生物工程雜志. 2011(02)
[10]多殺菌素的提取和萃取條件研究[J]. 秦為輝,陳新,張曉琳,郭偉群,李麗,李能威. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2010(04)
碩士論文
[1]多殺菌素生物合成基因簇的克隆及異源表達(dá)載體的構(gòu)建[D]. 蘭周.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[2]多殺菌素高產(chǎn)菌株的誘變育種和發(fā)酵工藝優(yōu)化[D]. 李麗.天津科技大學(xué) 2010
[3]多殺菌素高產(chǎn)菌種的推理選育和發(fā)酵工藝的優(yōu)化[D]. 張?jiān)?浙江大學(xué) 2004
本文編號(hào):3231705
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