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硬稃稗(Echinochloa glabrescens)對五氟磺草胺的抗藥性機理研究

發(fā)布時間:2021-06-10 13:03
  硬稃稗(Echinochloa glabbrescens)是我國水稻田惡性雜草之一,近年來硬稃稗對五氟磺草胺(penoxsulam)等乙酰乳酸合酶(ALS)抑制劑類除草劑的敏感性下降。為明確水稻田硬稃稗對五氟磺草胺的抗藥性水平及抗藥性機理,本研究以采自江蘇、浙江、安徽和上海4個地區(qū)水稻田的40個硬稃稗種群為試驗材料,用整株生物測定法測定其對五氟磺草胺的敏感性,并測定了抗五氟磺草胺硬稃稗種群的交互抗性和多抗性;通過對抗五氟磺草胺硬稃稗ALS離體酶敏感性、基因序列和基因表達量的研究,未發(fā)現(xiàn)靶標酶在抗性中發(fā)揮明確作用;通過對主要代謝酶細胞色素P450氧化酶系(Cyt P450s)和谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)的研究,明確代謝酶在抗性機理中發(fā)揮重要作用。本研究主要結(jié)果如下:采用整株生物測定法測定40個硬稃稗種群對五氟磺草胺敏感性。結(jié)果表明:采自江蘇省揚州市江都區(qū)硬稃稗種群JYJD-3為敏感種群,其ED50值為1.89 g a.i..ha-1。采自上海市青浦區(qū)硬稃稗種群SHQP-6和SHQP-3為抗性種群,ED50值分別為32.10和20.89 g a.i.·ha-1,與敏感種群JYJD-3相... 

【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:87 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

硬稃稗(Echinochloa glabrescens)對五氟磺草胺的抗藥性機理研究


圖3-1乙偶姻標準曲線??Fig.3-1?The?standard?curves?of?OD530?values?to?the?concentration?of?acetion??

熔解曲線,基因擴增,基因,產(chǎn)物


硬#稗對五氟磺草胺的抗藥性機理研究??劑處理后的不同時間點(Od、Id、3d和5d)的表達量以相對于敏感種群在藥劑處理??前(Od)的表達量來表不。??2結(jié)果與分析??2.1?PCR產(chǎn)物溶解曲線和擴增效率分析??本實驗中所采用的NC內(nèi)參基因和ALS基因的熔解曲線均只出現(xiàn)一個峰(見圖??3-3),表明兩對引物的擴增產(chǎn)物只有一個,未出現(xiàn)非特異性擴增。??Dissociation?Curve??0350

曲線,效率標準,引物擴增,基因


??對cDNA進行梯度稀釋測定ALS和p-actin基因的qPCR擴增標準曲線見圖3-4。??ALS基因的標準曲線與P-actin基因的標準曲線基本平行,表明對于兩對引物的擴增??效率基本一致,可以采用比較CT值的相對定量法(即2>aCT法)進行基因表達量的??比較。??40??35?;?-actir.:y?=?-3.359x^21.234??P?R2?=?0.9957????2?20?#??^????g-actin??^?1?C??£1?ALS:y=-3.459xt?19.468?#?#ALS??K?1〇?R2?=?0.9977??5??0??0?-0.5?-1?-1.5?-2?-2.5?-3?-3.5?-4?-4.5??Log?cDNA?dilution??圖3-4擴增ALS基因和P-actin基因的引物擴增效率標準曲線??Fig.3-4?The?standard?curve?of?ALS?and?p-actin?primers?with?real-time?PCR?amplification??2.2抗五氟橫草胺硬稃稗ALS基因表達量??本研究通過比較抗性硬稃稗種群莖葉組織在藥劑處理甜和藥劑處理后的不同時間??點(Od、Id、3d、和5d)以及敏感種群在藥劑處理后的不同時間點(Od、Id、3d、??和5d)相對于敏感種群在藥劑處理前(〇d)的ALS基因表達量來確定基因表達量的??變化是否與抗藥性有關。qPCR結(jié)果如圖3-5:在藥劑處理前,SHQP-6的ALS基因表??達量是JYH3-3的1.16倍

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本文編號:3222425

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