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番茄斑萎病毒N基因的VIGS載體構建

發(fā)布時間:2021-06-08 07:13
  番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt orthotospovirus,TSWV)嚴重危害多種經(jīng)濟作物和園藝植物,其N基因與病毒的侵染力密切相關,將N基因直接構建到VIGS載體上研究其致病功能目前鮮見報道。本研究將TSWV N基因構建到pTRV-PTV00載體上,注射本氏煙,通過qRT-PCR定量分析發(fā)現(xiàn)先接種TSWV后注射沉默載體的植株抗TSWV效率達57.60%,先注射沉默載體后接種TSWV的植株抗TSWV效率達99.14%。結果表明先注射載體后接種TSWV的N基因沉默效率更高。TSWV N基因VIGS載體的構建可為研究N基因在病毒致病等方面的功能提供前期材料,并為TSWV抗病育種和田間綠色防控提供一定的理論依據(jù)。 

【文章來源】:植物病理學報. 2020,50(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 本氏煙葉片總RNA提取及N基因序列擴增
    1.3 VIGS載體構建
    1.4 農(nóng)桿菌注射
    1.5 qRT-PCR檢測N基因的沉默效率
    1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
2 結果與分析
    2.1 N基因片段克隆及測序結果分析
    2.2 N基因的 VIGS 重組載體構建與鑒定結果
    2.3 N基因qRT-PCR標準曲線的建立
    2.4 TRV-N誘導的基因沉默在本氏煙中抗TSWV效率
3 結論與討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]Virus-induced Phytoene Desaturase(PDS) Gene Silencing Using Tobacco Rattle Virus in Lilium × formolongi[J]. Hua Xu,Leifeng Xu,Panpan Yang,Yuwei Cao,Yuchao Tang,Guoren He,Suxia Yuan,Jingyi Lei,Jun Ming.  Horticultural Plant Journal. 2019(01)
[2]非洲菊花瓣瞬時表達和病毒誘導的基因沉默(VIGS)系統(tǒng)的建立[J]. 唐宜,李凌飛,王小菁.  植物生理學報. 2017(03)
[3]VIGS載體在果樹中的應用研究進展[J]. 張新華,季娜娜,閔德棟,邵淑君,李富軍.  果樹學報. 2017(04)



本文編號:3217934

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