白星花金龜幼蟲(chóng)腸道中纖維素降解菌的篩選及其作用
發(fā)布時(shí)間:2021-05-31 21:13
在自然界中,許多昆蟲(chóng)以木質(zhì)纖維素為食,其腸道中往往存在能夠降解木質(zhì)纖維素的微生物源轉(zhuǎn)化系統(tǒng)。白星花金龜(Protaetia brevitarsis)幼蟲(chóng)以植物根部、雜草等為食,其腸道中存在豐富的纖維素降解微生物,對(duì)纖維素降解菌及其優(yōu)質(zhì)纖維素酶的篩選有著很大的潛力。本論文通過(guò)纖維素酶活性、濾紙降解活性誘導(dǎo)測(cè)定等方法,從白星花金龜幼蟲(chóng)中、后腸道中篩選得到了90株細(xì)菌、5株真菌。其中細(xì)菌菌株h9具有內(nèi)切葡聚糖酶(CMC)活性和較強(qiáng)的濾紙降解活性,其誘導(dǎo)CMC酶活可高達(dá)0.19 U/mL菌液,且可以徹底降解濾紙。通過(guò)16S rDNA分析,初步確定菌株h9屬于纖維單胞菌屬(Cellulomonas),將菌株命名為Cellulomonas sp.h9。對(duì)其進(jìn)行全基因組測(cè)序并分析,確定其具有20個(gè)與纖維素降解相關(guān)的基因,包括6個(gè)內(nèi)切β-1,4-葡聚糖酶(EC 3.2.1.4)基因,12個(gè)β-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.21)基因,2個(gè)外切β-1,4-葡聚糖酶(EC 3.2.1.91)基因。選取了1個(gè)內(nèi)切β-1,4-葡聚糖酶基因和4個(gè)β-葡萄糖苷酶基因進(jìn)行了克隆表達(dá),分別命名為Cen137和Bgl3...
【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
白星花金龜(Protaetiabrevitarsis)幼蟲(chóng)(a)及腸道(b)
?攴擲?Classificationsaccordingto16SrRNAgeneCMCXYNh1510.778.05—寡養(yǎng)單胞菌Stenotrophomonash97.00—++++纖維單胞菌屬Cellulomonash35.584.75+*假單胞菌屬PseudomonasH44.885.00+*芽孢桿菌屬BacillusH63.90——纖維菌屬Cellulosimicrobium注:“—”示無(wú)明顯變化,“+”示濾紙邊緣膨脹,“++++”示濾紙成糊狀!*”效果為14d培養(yǎng)誘導(dǎo)。Note:“—”meansnosignificantchange,“+”meansdeformationonedgeofthefilterpaper,“++++”meanscompetepasteform.“*”meanstheeffectwas14dayscultureinduction.圖2-2不同菌株在羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)基上的水解圈Fig.2-2TransparentcircleontheCMCmediumofdifferentstrains圖2-3菌株對(duì)濾紙7天的降解效果Fig.2-3Degradationeffectofstrainstofilterpaperfor7days表2-3h9菌株濾紙降解效果Table2-3Degradationeffectofh9tofilterpaper.時(shí)間(天)Time(d)菌株編號(hào)StrainNo.1234567h9—++++++++++++++注:“—”示無(wú)明顯變化,“+”示濾紙邊緣膨脹,“++”示濾紙整齊膨脹并下彎,“+++”示濾紙不定形,“++++”示濾紙成糊狀。Note:“—”meansnosignificantchange,“+”meansdeformationonedgeofthefilterpaper,“++”meansuniformdeformationandbending,“+++”meansabnormalformandalmostinpasteform,“++++”meanscompetepasteform.
.00—++++纖維單胞菌屬Cellulomonash35.584.75+*假單胞菌屬PseudomonasH44.885.00+*芽孢桿菌屬BacillusH63.90——纖維菌屬Cellulosimicrobium注:“—”示無(wú)明顯變化,“+”示濾紙邊緣膨脹,“++++”示濾紙成糊狀!*”效果為14d培養(yǎng)誘導(dǎo)。Note:“—”meansnosignificantchange,“+”meansdeformationonedgeofthefilterpaper,“++++”meanscompetepasteform.“*”meanstheeffectwas14dayscultureinduction.圖2-2不同菌株在羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)基上的水解圈Fig.2-2TransparentcircleontheCMCmediumofdifferentstrains圖2-3菌株對(duì)濾紙7天的降解效果Fig.2-3Degradationeffectofstrainstofilterpaperfor7days表2-3h9菌株濾紙降解效果Table2-3Degradationeffectofh9tofilterpaper.時(shí)間(天)Time(d)菌株編號(hào)StrainNo.1234567h9—++++++++++++++注:“—”示無(wú)明顯變化,“+”示濾紙邊緣膨脹,“++”示濾紙整齊膨脹并下彎,“+++”示濾紙不定形,“++++”示濾紙成糊狀。Note:“—”meansnosignificantchange,“+”meansdeformationonedgeofthefilterpaper,“++”meansuniformdeformationandbending,“+++”meansabnormalformandalmostinpasteform,“++++”meanscompetepasteform.
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]外源纖維素酶對(duì)發(fā)酵全混合日糧營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、發(fā)酵品質(zhì)和酶活性的動(dòng)態(tài)影響[J]. 陳光吉,吳佳海,尚以順,張蓉,何廷章,吳彥,婁芬,熊俊,甘小波,陳蔭瓊,王普昶,韓永芬,李世歌,舒建虹. 草業(yè)學(xué)報(bào). 2019(09)
[2]蠼螋腸道中堿性內(nèi)切葡聚糖酶基因的克隆表達(dá)及功能分析[J]. 陳俊梅,李文鵬,趙素雅,黃冰紛,王博文,惠豐立,尹曉燕,牛秋紅. 微生物學(xué)報(bào). 2019(09)
[3]響應(yīng)面法優(yōu)化鏈霉菌S10A09發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶條件[J]. 霍光明,張李陽(yáng),朱枳穆,俞麗娜. 生物加工過(guò)程. 2019(02)
[4]臺(tái)灣乳白蟻纖維素降解菌的分離和鑒定[J]. 陳志超,易弋,趙東玲,黃翠姬,伍時(shí)華. 中國(guó)釀造. 2019(01)
[5]黑胸散白蟻體內(nèi)產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌的篩選及其纖維素酶基因的鑒定與原核表達(dá)[J]. 王智偉,周小敏,楊雨鑫,陳玉林. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2018(08)
[6]象白蟻腸道中一個(gè)纖維素降解菌群的分離和特性研究[J]. 李丹紅,徐榮,張坤迪,朱崇梅,李福利,楊紅. 生物資源. 2017(04)
[7]東亞飛蝗腸道內(nèi)高產(chǎn)纖維素酶菌株篩選及鑒定[J]. 徐沖,鐘麗娟,陳麗媛,陳杰,孫翠煥,朱巍巍,關(guān)艷麗. 微生物學(xué)雜志. 2016(03)
[8]產(chǎn)黃纖維單胞菌CR-14菌株誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 楊繼業(yè),崔冠慧,習(xí)彥花,李亞冰,張根偉,張麗萍,程輝彩. 農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境學(xué)報(bào). 2016(03)
[9]櫟黃掌舟蛾幼蟲(chóng)腸道好氧菌群分析及產(chǎn)纖維素酶菌的篩選[J]. 文竹,姜義仁,黃伶,王斌赫,鐘亮,王勇,秦利. 環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2015(06)
[10]基于白星花金龜幼蟲(chóng)轉(zhuǎn)化玉米秸稈的微循環(huán)農(nóng)牧場(chǎng)模式研究[J]. 劉玉升,張大鵬. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(31)
博士論文
[1]基于生物強(qiáng)化技術(shù)的再生纖維造紙廢水有機(jī)物降解過(guò)程與效果研究[D]. 曹英楠.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]暗黑鰓金龜不同發(fā)育階段腸道微生物及糖苷水解酶多樣性研究[D]. 圣平.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]暗黑鰓金龜幼蟲(chóng)腸道微生物分子多態(tài)性及纖維素降解菌多樣性研究[D]. 黃勝威.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
碩士論文
[1]白蟻和共生細(xì)菌由來(lái)木質(zhì)纖維素降解酶基因的異源表達(dá)[D]. 杜嬌.山東大學(xué) 2019
[2]原等跳成蟲(chóng)腸道細(xì)菌的分離鑒定及降解纖維素細(xì)菌的篩選[D]. 王立秀.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[3]Cellulomonas bogoriensis的三種糖苷水解酶的基因克隆、異源重組表達(dá)及酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 侯晶.東北師范大學(xué) 2018
[4]白蟻及其腸道微生物來(lái)源木質(zhì)纖維素酶基因的克隆與表達(dá)[D]. 寧娜.山東大學(xué) 2017
[5]松墨天牛腸道細(xì)菌多樣性和粘質(zhì)沙雷氏菌木質(zhì)素降解特性的研究[D]. 傅慧靜.福建農(nóng)林大學(xué) 2017
[6]竹蟲(chóng)(Omphisa fuscidentalis)腸道微生物多樣性及纖維素酶學(xué)特性研究[D]. 劉松.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[7]里氏木霉的復(fù)合誘變及酶系優(yōu)化[D]. 王芳.中南林業(yè)科技大學(xué) 2015
[8]暗黑鰓金龜腸道纖維素酶活性研究及混合菌系的構(gòu)建[D]. 許婧.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[9]白星花金龜生物學(xué)及其對(duì)玉米秸稈取食習(xí)性的研究[D]. 楊誠(chéng).山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[10]黑胸散白蟻腸道分離細(xì)菌的纖維素降解活性研究及一株疣微菌的初步鑒定[D]. 邱正勇.華中師范大學(xué) 2014
本文編號(hào):3208986
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【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
白星花金龜(Protaetiabrevitarsis)幼蟲(chóng)(a)及腸道(b)
?攴擲?Classificationsaccordingto16SrRNAgeneCMCXYNh1510.778.05—寡養(yǎng)單胞菌Stenotrophomonash97.00—++++纖維單胞菌屬Cellulomonash35.584.75+*假單胞菌屬PseudomonasH44.885.00+*芽孢桿菌屬BacillusH63.90——纖維菌屬Cellulosimicrobium注:“—”示無(wú)明顯變化,“+”示濾紙邊緣膨脹,“++++”示濾紙成糊狀!*”效果為14d培養(yǎng)誘導(dǎo)。Note:“—”meansnosignificantchange,“+”meansdeformationonedgeofthefilterpaper,“++++”meanscompetepasteform.“*”meanstheeffectwas14dayscultureinduction.圖2-2不同菌株在羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)基上的水解圈Fig.2-2TransparentcircleontheCMCmediumofdifferentstrains圖2-3菌株對(duì)濾紙7天的降解效果Fig.2-3Degradationeffectofstrainstofilterpaperfor7days表2-3h9菌株濾紙降解效果Table2-3Degradationeffectofh9tofilterpaper.時(shí)間(天)Time(d)菌株編號(hào)StrainNo.1234567h9—++++++++++++++注:“—”示無(wú)明顯變化,“+”示濾紙邊緣膨脹,“++”示濾紙整齊膨脹并下彎,“+++”示濾紙不定形,“++++”示濾紙成糊狀。Note:“—”meansnosignificantchange,“+”meansdeformationonedgeofthefilterpaper,“++”meansuniformdeformationandbending,“+++”meansabnormalformandalmostinpasteform,“++++”meanscompetepasteform.
.00—++++纖維單胞菌屬Cellulomonash35.584.75+*假單胞菌屬PseudomonasH44.885.00+*芽孢桿菌屬BacillusH63.90——纖維菌屬Cellulosimicrobium注:“—”示無(wú)明顯變化,“+”示濾紙邊緣膨脹,“++++”示濾紙成糊狀!*”效果為14d培養(yǎng)誘導(dǎo)。Note:“—”meansnosignificantchange,“+”meansdeformationonedgeofthefilterpaper,“++++”meanscompetepasteform.“*”meanstheeffectwas14dayscultureinduction.圖2-2不同菌株在羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)基上的水解圈Fig.2-2TransparentcircleontheCMCmediumofdifferentstrains圖2-3菌株對(duì)濾紙7天的降解效果Fig.2-3Degradationeffectofstrainstofilterpaperfor7days表2-3h9菌株濾紙降解效果Table2-3Degradationeffectofh9tofilterpaper.時(shí)間(天)Time(d)菌株編號(hào)StrainNo.1234567h9—++++++++++++++注:“—”示無(wú)明顯變化,“+”示濾紙邊緣膨脹,“++”示濾紙整齊膨脹并下彎,“+++”示濾紙不定形,“++++”示濾紙成糊狀。Note:“—”meansnosignificantchange,“+”meansdeformationonedgeofthefilterpaper,“++”meansuniformdeformationandbending,“+++”meansabnormalformandalmostinpasteform,“++++”meanscompetepasteform.
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]外源纖維素酶對(duì)發(fā)酵全混合日糧營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、發(fā)酵品質(zhì)和酶活性的動(dòng)態(tài)影響[J]. 陳光吉,吳佳海,尚以順,張蓉,何廷章,吳彥,婁芬,熊俊,甘小波,陳蔭瓊,王普昶,韓永芬,李世歌,舒建虹. 草業(yè)學(xué)報(bào). 2019(09)
[2]蠼螋腸道中堿性內(nèi)切葡聚糖酶基因的克隆表達(dá)及功能分析[J]. 陳俊梅,李文鵬,趙素雅,黃冰紛,王博文,惠豐立,尹曉燕,牛秋紅. 微生物學(xué)報(bào). 2019(09)
[3]響應(yīng)面法優(yōu)化鏈霉菌S10A09發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶條件[J]. 霍光明,張李陽(yáng),朱枳穆,俞麗娜. 生物加工過(guò)程. 2019(02)
[4]臺(tái)灣乳白蟻纖維素降解菌的分離和鑒定[J]. 陳志超,易弋,趙東玲,黃翠姬,伍時(shí)華. 中國(guó)釀造. 2019(01)
[5]黑胸散白蟻體內(nèi)產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌的篩選及其纖維素酶基因的鑒定與原核表達(dá)[J]. 王智偉,周小敏,楊雨鑫,陳玉林. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2018(08)
[6]象白蟻腸道中一個(gè)纖維素降解菌群的分離和特性研究[J]. 李丹紅,徐榮,張坤迪,朱崇梅,李福利,楊紅. 生物資源. 2017(04)
[7]東亞飛蝗腸道內(nèi)高產(chǎn)纖維素酶菌株篩選及鑒定[J]. 徐沖,鐘麗娟,陳麗媛,陳杰,孫翠煥,朱巍巍,關(guān)艷麗. 微生物學(xué)雜志. 2016(03)
[8]產(chǎn)黃纖維單胞菌CR-14菌株誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 楊繼業(yè),崔冠慧,習(xí)彥花,李亞冰,張根偉,張麗萍,程輝彩. 農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境學(xué)報(bào). 2016(03)
[9]櫟黃掌舟蛾幼蟲(chóng)腸道好氧菌群分析及產(chǎn)纖維素酶菌的篩選[J]. 文竹,姜義仁,黃伶,王斌赫,鐘亮,王勇,秦利. 環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2015(06)
[10]基于白星花金龜幼蟲(chóng)轉(zhuǎn)化玉米秸稈的微循環(huán)農(nóng)牧場(chǎng)模式研究[J]. 劉玉升,張大鵬. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(31)
博士論文
[1]基于生物強(qiáng)化技術(shù)的再生纖維造紙廢水有機(jī)物降解過(guò)程與效果研究[D]. 曹英楠.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]暗黑鰓金龜不同發(fā)育階段腸道微生物及糖苷水解酶多樣性研究[D]. 圣平.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]暗黑鰓金龜幼蟲(chóng)腸道微生物分子多態(tài)性及纖維素降解菌多樣性研究[D]. 黃勝威.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
碩士論文
[1]白蟻和共生細(xì)菌由來(lái)木質(zhì)纖維素降解酶基因的異源表達(dá)[D]. 杜嬌.山東大學(xué) 2019
[2]原等跳成蟲(chóng)腸道細(xì)菌的分離鑒定及降解纖維素細(xì)菌的篩選[D]. 王立秀.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[3]Cellulomonas bogoriensis的三種糖苷水解酶的基因克隆、異源重組表達(dá)及酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 侯晶.東北師范大學(xué) 2018
[4]白蟻及其腸道微生物來(lái)源木質(zhì)纖維素酶基因的克隆與表達(dá)[D]. 寧娜.山東大學(xué) 2017
[5]松墨天牛腸道細(xì)菌多樣性和粘質(zhì)沙雷氏菌木質(zhì)素降解特性的研究[D]. 傅慧靜.福建農(nóng)林大學(xué) 2017
[6]竹蟲(chóng)(Omphisa fuscidentalis)腸道微生物多樣性及纖維素酶學(xué)特性研究[D]. 劉松.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[7]里氏木霉的復(fù)合誘變及酶系優(yōu)化[D]. 王芳.中南林業(yè)科技大學(xué) 2015
[8]暗黑鰓金龜腸道纖維素酶活性研究及混合菌系的構(gòu)建[D]. 許婧.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[9]白星花金龜生物學(xué)及其對(duì)玉米秸稈取食習(xí)性的研究[D]. 楊誠(chéng).山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[10]黑胸散白蟻腸道分離細(xì)菌的纖維素降解活性研究及一株疣微菌的初步鑒定[D]. 邱正勇.華中師范大學(xué) 2014
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