發(fā)布時間：2021-05-25 18:28

　　農(nóng)藥的合理使用能有效地提高農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量,促進了農(nóng)業(yè)經(jīng)濟的發(fā)展。噻呋酰胺是一種作用廣泛的含氟殺菌劑,可有效防治谷物,水果,蔬菜中的多種病害。盡管噻呋酰胺是一種低毒農(nóng)藥,它的殘留情況卻依然不容忽視。隨著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)活動中對噻呋酰胺的需求量加大的同時,人們在日常生活中與之接觸的風(fēng)險也在逐漸升高,使人類健康受到威脅。農(nóng)藥殘留情況一直是人們關(guān)注的焦點,也是食品安全問題中急需解決的重點�，F(xiàn)有的噻呋酰胺殘留的檢測方法僅僅局限于高效液相色譜法（HPLC）,氣相色譜法（GC）等化學(xué)檢測方法,此類方法不僅操作復(fù)雜,耗時耗力,而且無法擺脫對大型儀器和專業(yè)操作人員的依賴,因此有必要建立一種更為方便、迅速、靈敏、儀器要求不高的方法來對噻呋酰胺的殘留進行有效檢測,酶聯(lián)免疫吸附分析方法（ELISA）則合此要求。本研究以2-甲基-4-三氟甲基-5-噻唑甲酸為半抗原,采用活潑酯法、混合酸酐法、CDI/DMAP 法合成了 免疫原 Hapten-1-BSA 和包被原 Hapten-1-OVA-1、Hapten-1-OVA-2、Hapten-1-OVA-3;以2,6-二溴-4-三氟甲氧基苯胺為半抗原,采用重氮法合成了免疫原Hap... 

【文章來源】：華中師范大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1. 緒論
    1.1 農(nóng)藥綜述
        1.1.1 農(nóng)藥使用的經(jīng)濟效益與地位
        1.1.2 農(nóng)藥的生產(chǎn)和應(yīng)用
        1.1.3 農(nóng)藥的分類
        1.1.4 農(nóng)藥的使用存在的問題與危害
    1.2 農(nóng)藥殘留的檢測方法
        1.2.1 色譜法
        1.2.2 免疫分析法
        1.2.3 酶抑制法
        1.2.4 生物傳感器法
        1.2.5 光譜分析法
    1.3 噻呋酰胺概述
        1.3.1 噻呋酰胺的理化性質(zhì)
        1.3.2 噻呋酰胺的應(yīng)用
        1.3.3 噻呋酰胺的毒理研究
        1.3.4 噻呋酰胺的殘留與檢測
    1.4 小分子ELISA檢測方法的建立
        1.4.1 小分子人工抗原的合成
        1.4.2 小分子抗體的制備
    1.5 選題目的與意義
2. 材料與方法
    2.1 實驗材料與用品
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要溶液
        2.1.4 主要實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 噻呋酰胺人工抗原的合成
        2.2.2 噻呋酰胺人工抗原的蛋白濃度測定
        2.2.3 噻呋酰胺人工抗原的鑒定
        2.2.4 動物免疫
        2.2.5 小鼠抗血清效價的檢測
        2.2.6 抗血清對噻呋酰胺的靈敏度檢測
        2.2.7 小鼠抗血清對噻呋酰胺的的特異性檢測
        2.2.8 多克隆抗體的應(yīng)用——添加回收實驗
        2.2.9 噻呋酰胺的HPLC檢測
        2.2.10 噻呋酰胺單克隆抗體制備過程中融合細胞的制備
3. 實驗結(jié)果
    3.1 噻呋酰胺人工抗原的蛋白含量的測定
    3.2 噻呋酰胺人工抗原鑒定
        3.2.1 紫外吸收光譜掃描
        3.2.2 人工抗原的SDS-PAGE
    3.3 小鼠抗血清效價的檢測
        3.3.1 A組小鼠抗血清效價
        3.3.2 B組小鼠抗血清效價
    3.4 小鼠抗血清靈敏度的檢測
    3.5 噻呋酰胺的ic-ELISA方法的建立
    3.6 抗體特異性的檢測
    3.7 添加回收檢測
    3.8 HPLC檢測
    3.9 細胞融合
4. 討論
    4.1 噻呋酰胺人工抗原的合成
        4.1.1 半抗原的選擇
        4.1.2 噻呋酰胺人工抗原的鑒定與合成方法的比較
    4.2 噻呋酰胺多克隆抗體的制備
    4.3 多克隆抗體的特異性
    4.4 噻呋酰胺殘留檢測的ELISA方法與HPLC方法的比較
    4.5 細胞融合
5. 結(jié)論與展望
參考文獻
附錄一 主要英文縮寫詞
附錄二 攻讀學(xué)位期間論文發(fā)表情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[4]色譜技術(shù)在農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用綜述[J]. 陽仲斌,李甲枚,李偉,金晨鐘,胡軍和.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2016(14)
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[9]農(nóng)藥殘留的檢測[J]. 何艷芬,穆筱梅,郭曉麗,張曉環(huán),陳澤智.  廣東化工. 2009(03)
[10]毛細管電泳和毛細管電色譜技術(shù)在農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用[J]. 林振宇,黃露,陳國南.  色譜. 2009(01)

碩士論文
[1]乙嘧酚磺酸酯單克隆抗體的制備與性質(zhì)鑒定[D]. 張亞然.華中師范大學(xué) 2012
[2]鄰苯二甲酸二丁酯的酶聯(lián)免疫吸附分析研究[D]. 魏晨曦.華中師范大學(xué) 2011



本文編號：3205807