家蠶作為蠶桑產(chǎn)業(yè)的重要昆蟲,有很多病原都可以感染家蠶,而家蠶微粒子蟲是其中最重要的病原之一。家蠶微粒子蟲屬于微孢子蟲大類,也是被劃分為真菌界的寄生性病原。微孢子蟲的感染范圍極廣基本能夠寄生所有動(dòng)物,甚至人類。自1857年發(fā)現(xiàn)人類歷史上第一種微孢子蟲—家蠶微粒子蟲（Nosema bombycis）以來,迄今為止已有1400多種微孢子蟲被鑒定。家蠶通過很多免疫識(shí)別分子識(shí)別病原,其中有類免疫識(shí)別蛋白名為Hemocytin,它可能在家蠶抵御家蠶微粒子蟲感染過程中起到關(guān)鍵作用。Hemocytin在家蠶血細(xì)胞（顆粒細(xì)胞）的顆粒中表達(dá),其能識(shí)別病原并啟動(dòng)宿主免疫反應(yīng)。在這項(xiàng)研究中,我們發(fā)現(xiàn)家蠶感染N.bombycis后,Hemocytin的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)量明顯上調(diào),表明Hemocytin對(duì)N.bombycis的入侵有應(yīng)答;我們?cè)偻ㄟ^間接免疫熒光檢測(cè)到Hemocytin能夠識(shí)別入侵的N.bombycis,并找到了能夠與Hemocytin互作的孢壁蛋白25;接著我們分析了Hemocytin識(shí)別N.bombycis后可以促進(jìn)血細(xì)胞凝集和黑化,同時(shí)也證明了Hemocytin可以抑制N.bombycis的增殖。主... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 昆蟲的免疫防御概述
        1.1.1 昆蟲細(xì)胞免疫
        1.1.2 昆蟲體液免疫
        1.1.3 昆蟲體內(nèi)的免疫通路
        1.1.4 昆蟲的模式識(shí)別分子/受體
    1.2 家蠶中Hemocytin及其同源物的研究進(jìn)展
    1.3 微孢子蟲概述
        1.3.1 微孢子蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)及生物學(xué)特征
        1.3.2 家蠶微粒子蟲及家蠶微粒子病
第二章 引言
    2.1 研究背景
    2.2 研究目的及意義
    2.3 主要研究?jī)?nèi)容
        2.3.1 N.bombycis感染前后血淋巴中Hemocytin的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平檢測(cè)
        2.3.2 家蠶Hemocytin與 N.bombycis的相互作用分析
        2.3.3 Hemocytin在啟動(dòng)家蠶細(xì)胞免疫中的作用分析
    2.4 研究技術(shù)路線
第三章 N.bombycis感染前后血淋巴中Hemocytin的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平檢測(cè)
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 主要試劑名稱與配方
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 N.bombycis感染前后血淋巴中Hemocytin的轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)
        3.2.2 p ET-23b(+)-Hemocytin原核表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.2.3 p ET-23b(+)-Hemocytin重組蛋白的表達(dá)及純化
        3.2.4 多克隆抗體的制備
        3.2.5 N.bombycis感染前后血淋巴中Hemocytin的蛋白水平檢測(cè)
    3.3 結(jié)論與討論
第四章 家蠶Hemocytin與 N.bombycis的相互作用分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 主要試劑名稱與配方
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 Hemocytin在天然狀態(tài)下對(duì)N.bombycis粘附和凝集作用分析
        4.2.2 Hemocytin重組蛋白對(duì)N.bombycis粘附和凝集作用分析
        4.2.3 非標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)尋找差異蛋白
        4.2.4 酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)鑒定Hemocytin與 SWP25 的互作關(guān)系
    4.3 結(jié)論與討論
第五章 Hemocytin在啟動(dòng)家蠶細(xì)胞免疫中的作用分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.2 主要試劑名稱與配方
        5.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        5.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 Hemocytin促進(jìn)家蠶血細(xì)胞凝集與黑化作用分析
        5.2.2 Hemocytin促進(jìn)血細(xì)胞對(duì)N.bombycis的包囊與黑化實(shí)驗(yàn)分析
        5.2.3 RNA干擾Hemocytin對(duì)N.bombycis增殖的影響
        5.2.4 過表達(dá)Hemocytin對(duì) N.bombycis增殖的影響
    5.3 結(jié)論與討論
第六章 全文總結(jié)與展望
    6.1 N.bombycis感染前后血淋巴中Hemocytin的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平上調(diào)
    6.2 家蠶Hemocytin與 N.bombycis的相互作用分析
    6.3 Hemocytin在啟動(dòng)家蠶細(xì)胞免疫中的作用分析
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的文章及參研課題
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]昆蟲免疫系統(tǒng)中IMD信號(hào)通路的研究進(jìn)展[J]. 楊靜,馬玉堃,付海燕,劉春光,楊峰山.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2019(24)
[2]昆蟲抗菌肽分類及在醫(yī)學(xué)中應(yīng)用[J]. 王龍,馮群,高嘉敏,孫麗娜,余運(yùn)運(yùn),夏嬙.  環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2017(06)
[3]家蠶微粒子病防控技術(shù)研究的發(fā)展現(xiàn)狀與趨勢(shì)[J]. 魯興萌,邵勇奇.  蠶業(yè)科學(xué). 2016(06)
[4]家蠶微粒子病檢驗(yàn)技術(shù)綜述[J]. 魯興萌,邵勇奇.  蠶業(yè)科學(xué). 2016(04)
[5]血管性血友病因子與不同轉(zhuǎn)移潛能人肺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究[J]. 張立,李能蓮,舍雅莉,王雅莉,駱亞莉,胡樹名.  甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2013(03)
[6]昆蟲免疫識(shí)別與病原物免疫逃避機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 寧媛媛,尤民生,王成樹.  昆蟲學(xué)報(bào). 2009(05)
[7]淺談家蠶微粒子病的發(fā)生與防治[J]. 王玉霞.  北方蠶業(yè). 2006(03)
[8]鱗翅目昆蟲內(nèi)外凝集素的研究概況[J]. 蔣蕓蕓.  華東昆蟲學(xué)報(bào). 2006(01)
[9]家蠶微粒子病流行發(fā)生的歷史和現(xiàn)狀[J]. 劉吉平,徐興耀.  中國(guó)蠶業(yè). 2000(01)

博士論文
[1]海倫微孢子蟲極管蛋白EhPTP4的鑒定及其在侵染宿主細(xì)胞過程中的作用研究[D]. 韓冰.西南大學(xué) 2017

碩士論文
[1]中國(guó)蜜蜂微孢子蟲種質(zhì)分布及侵染意蜂中腸的蛋白質(zhì)組分析[D]. 張建燕.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015



本文編號(hào)：3184332