稻曲病菌[Ustilaginoidea virens （Cooke） Takahashi]培養(yǎng)期間菌絲生長(zhǎng)緩慢,且產(chǎn)生大量次生代謝產(chǎn)物,嚴(yán)重影響提取稻曲病菌基因組DNA質(zhì)量與效率。將一步式提取法（Rapid one-step extraction,ROSE）增加異丙醇、NaAc冷凍沉淀DNA和70%無水乙醇漂洗DNA兩個(gè)步驟,建立一種高效、快速提取高質(zhì)量稻曲病菌基因組DNA的方法,即改良ROSE法,并將該方法與稻曲病菌基因組DNA傳統(tǒng)提取方法（CTAB法、SDS法、試劑盒法和改良脲素法）在提取步驟、DNA純度與得率、PCR反應(yīng)和酶切效率等方面加以比較。結(jié)果表明,5種方法均得到稻曲病菌基因組DNA,但改良ROSE法同時(shí)具有無毒、環(huán)保、低成本、快速獲取高質(zhì)量DNA的優(yōu)點(diǎn)。改良ROSE法s可用于稻曲病菌分子標(biāo)記、遺傳圖譜構(gòu)建等需短時(shí)間內(nèi)快速獲取DNA的分子試驗(yàn)研究,也適用于稻曲病菌基因精細(xì)定位、克隆和測(cè)序等需高質(zhì)量DNA的分子試驗(yàn)。 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,51(03)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 供試菌株
        1.1.2 供試藥劑
        1.1.3 供試培養(yǎng)基
    1.2 方法
        1.2.1 菌絲收集
        1.2.2 稻曲病菌DNA提取方法
            1.2.2. 1 CTAB法
            1.2.2. 2 SDS法
            1.2.2. 3 試劑盒法
            1.2.2. 4 改良脲素法
            1.2.2. 5 改良ROSE法
        1.2.3 紫外光分光光度計(jì)檢測(cè)
        1.2.4 DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)
        1.2.5 PCR檢測(cè)
        1.2.6 Eco RⅠ限制性內(nèi)切酶酶切反應(yīng)
2 結(jié)果與分析
    2.1 不同方法提取步驟、成本、毒性、耗時(shí)比較
    2.2 不同方法提取DNA質(zhì)量比較
    2.3 DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)
    2.4 PCR檢測(cè)
    2.5 Eco RⅠ限制性內(nèi)切酶酶切檢測(cè)
3 討論與結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]四川省秈稻區(qū)水稻稻曲病菌遺傳多樣性分析及稻曲病防治技術(shù)研究[D]. 李競(jìng)生.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3180630