灰葡萄孢屬病原菌（Botrytis）是世界排名第二真菌病害的病原,它具有腐生性強,寄主范圍十分廣泛等特點;由灰葡萄孢引起的灰霉病不僅是葡萄生產(chǎn)田中的常見病害,也是產(chǎn)后貯藏過程中的毀滅性病害。目前,國內(nèi)外主要采用化學(xué)防治的方法來控制灰霉病,但隨著殺菌劑的長時間和大劑量使用,灰霉菌已經(jīng)對多種藥劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性,甚至多藥抗性,因此,本研究對山東、湖北、黑龍江、山西、云南和遼寧6個省的主要葡萄產(chǎn)區(qū)灰霉菌進(jìn)行了啶酰菌胺、多菌靈、腐霉利、咯菌腈、異菌脲和嘧霉胺的抗性檢測,抑霉唑作用方式的探究,抑霉唑、福美雙與其它6種主要殺菌劑之間的交互抗性關(guān)系,并建立了基于高通量測序技術(shù)的抗性分子檢測方法用于快速檢測葡萄灰霉病菌的抗藥性。主要研究結(jié)果如下:1.2016-2017年我國葡萄灰霉病菌對主要殺菌劑EC50的測定試驗在收集到的1494株葡萄灰霉病菌中隨機選擇120株葡萄灰霉病菌株,利用傳統(tǒng)菌絲生長速率法測定灰霉菌株對多菌靈、腐霉利、異菌脲、咯菌腈、嘧霉胺、福美雙的EC50和孢子萌發(fā)法測定灰霉菌株對啶酰菌胺的EC50,結(jié)果顯示多菌靈的平均EC50最大,其對葡萄灰霉病菌的毒力最弱抗性最強,咯菌腈的平均... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 葡萄灰霉病概述
        1.1.1 葡萄灰霉病的發(fā)生與分布
        1.1.2 葡萄灰霉病的癥狀和危害
        1.1.3 葡萄灰霉病的綜合防治
    1.2 葡萄灰霉病防治中主要殺菌劑的作用機制和抗藥性研究概況
        1.2.1 苯并咪唑類殺菌劑的作用機制和抗藥性研究概況
        1.2.2 二甲酰亞胺類殺菌劑的作用機制和抗藥性研究概況
        1.2.3 苯吡咯類殺菌劑的作用機制和抗藥性研究概況
        1.2.4 煙酰胺類殺菌劑的作用機制和抗藥性研究概況
        1.2.5 苯胺基嘧啶類殺菌劑的作用機制和抗藥性研究概況
        1.2.6 咪唑類殺菌劑的作用機制和抗藥性研究概況
        1.2.7 有機硫類殺菌劑的作用機制和抗藥性研究概況
    1.3 葡萄灰霉病菌多藥抗性研究
    1.4 葡萄灰霉病菌的抗藥性檢測方法
        1.4.1 傳統(tǒng)檢測方法
        1.4.2 分子檢測方法
    1.5 本研究的目的及意義
    1.6 技術(shù)路線
第二章 我國葡萄灰霉病菌對主要殺菌劑的抗性檢測
    2.1 試驗材料
        2.1.1 供試菌株
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 主要試劑
        2.1.5 試驗藥劑
    2.2 試驗方法
        2.2.1 葡萄灰霉病菌的采集
        2.2.2 葡萄灰霉病菌的分離與純化
        2.2.3 灰霉菌種的保存和活化
        2.2.4 2012-2015年葡萄灰霉病菌對主要殺菌劑的抗藥性初測
        2.2.5 2016-2017年我國葡萄灰霉病菌對主要殺菌劑的抗藥性檢測
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 葡萄灰霉病菌對主要殺真菌劑的EC50測定
        2.3.2 2012-2015年葡萄灰霉病菌對主要殺菌劑的抗藥性檢測
        2.3.3 2016-2017年我國葡萄灰霉病菌對主要殺菌劑抗性情況
    2.4 小結(jié)與討論
第三章 抑霉唑的作用方式和抑霉唑、福美雙與其它主要殺菌劑之間交互抗性關(guān)系的探究
    3.1 實驗材料
        3.1.1 供試菌株
        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 主要培養(yǎng)基
        3.1.4 主要試劑
    3.2 實驗方法
        3.2.1 抑霉唑?qū)ζ咸鸦颐共【饔梅绞降奶骄?br>        3.2.2 葡萄灰霉病菌對抑霉唑與其他殺菌劑之間的交互抗性關(guān)系探究
        3.2.3 葡萄灰霉病菌對福美雙與其他殺菌劑之間的交互抗性關(guān)系探究
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 抑霉唑?qū)ζ咸鸦颐共【淖饔梅绞教骄?br>        3.4.2 葡萄灰霉病菌對抑霉唑與其他殺菌劑之間的交互抗性關(guān)系探究
        3.4.3 葡萄灰霉病菌對福美雙與其它殺菌劑之間的交互抗性關(guān)系
    3.5 小結(jié)與討論
第四章 葡萄灰霉病菌對主要殺菌劑的抗藥性高通量檢測方法的建立
    4.1 試驗材料
        4.1.1 供試菌株
        4.1.2 主要儀器
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 培養(yǎng)基
        4.1.5 主要試劑的配制
    4.2 試驗方法
        4.2.1 葡萄灰霉病菌DNA的提取
        4.2.2 葡萄灰霉病菌對主要殺菌劑抗藥性高通量檢測方法的建立
        4.2.3 灰霉菌抗藥性檢測程序DFRB的開發(fā)
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 高通量測序方法檢測得出的葡萄灰霉病菌對主要殺菌劑抗性頻率和抗性突變位點頻率
        4.3.2 傳統(tǒng)抗藥性檢測方法檢驗高通量測序技術(shù)的結(jié)果
    4.4 小結(jié)與討論
第五章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高通量測序技術(shù)在常見遺傳性疾病中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 周秉博,郝勝菊,閆有圣,馮喧,劉芙蓉,蔣小慧.  中國優(yōu)生與遺傳雜志. 2017(11)
[2]高通量測序技術(shù)新名詞的理解和辨析[J]. 王海.  中國科技術(shù)語. 2017(04)
[3]葡萄灰霉病生物防治研究進(jìn)展[J]. 張迪,王曉東.  中國植保導(dǎo)刊. 2017(07)
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[6]葡萄新品種 優(yōu)質(zhì)又抗病[J]. 小美.  新農(nóng)業(yè). 2016(16)
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[8]開陽縣葡萄灰霉病的發(fā)生狀況及防治藥劑篩選[J]. 汪家勝,姜于蘭,楊金燕,朱克銳.  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(09)
[9]一種有機硫殺菌劑的合成及性能評價[J]. 張磊,張迪彥.  工業(yè)用水與廢水. 2014(03)
[10]黃瓜霜霉病菌對雙炔酰菌胺的敏感基線及其抗性突變體生物學(xué)性狀研究[J]. 崔繼敏,楊曉津,趙建江,王文橋,孟潤杰,閆磊,韓秀英,馬志強,張金林,張小風(fēng).  農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 2013(05)

博士論文
[1]柑橘綠霉菌的遺傳轉(zhuǎn)化和抑霉唑抗性分子機制研究[D]. 王繼業(yè).浙江大學(xué) 2010
[2]番茄灰霉病菌抗藥性及抗藥性控制研究[D]. 王芊.東北林業(yè)大學(xué) 2007
[3]丙烷脒殺菌劑開發(fā)研究[D]. 陳安良.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2004

碩士論文
[1]浙江省草莓灰霉病菌抗藥性檢測及抗性機制的研究[D]. 尹大芳.浙江大學(xué) 2015
[2]黃瓜霜霉病菌對雙炔酰菌胺抗性風(fēng)險及抗性機制的研究[D]. 崔繼敏.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]浙江衢州地區(qū)柑橘綠霉菌對抑霉唑和多菌靈的抗性及其抗性分子機制的研究[D]. 馮丹.浙江大學(xué) 2011
[4]馬鈴薯晚疫病菌對甲霜靈抗性治理對策研究[D]. 王麗.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[5]葡萄葉面附生微生物區(qū)系分析及葡萄灰霉病拮抗菌的篩選[D]. 靳小剛.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[6]葡萄果穗附生微生物區(qū)系分析及葡萄灰霉病拮抗菌篩選[D]. 崔欣.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[7]油菜菌核病菌對腐霉利的抗性及其機制[D]. 曹敏娟.揚州大學(xué) 2008
[8]納他霉素對灰葡萄孢的活性及作用機理研究[D]. 張鵬.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[9]番茄灰霉病菌和油菜菌核病菌對嘧霉胺的敏感性基線及番茄灰霉病菌抗藥性研究[D]. 賈曉華.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[10]番茄灰霉菌及其拮抗菌木霉的抗藥性研究[D]. 丁中.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002



本文編號：3161789