小菜蛾腸道菌群在其生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中扮演者重要的角色。本研究通過(guò)將來(lái)自于尤金袋鼠（Macropus eugenii）的抗菌肽基因WAM1導(dǎo)入擬南芥中,研究其對(duì)小菜蛾生長(zhǎng)發(fā)育及其腸道菌群的影響,取得如下成果:通過(guò)人工合成WAM1基因,并優(yōu)化其密碼子為擬南芥偏愛(ài)的,將其與植物表達(dá)載體pSR784d連接,構(gòu)建重組植物表達(dá)載體WAM1-pSR784d,并遺傳轉(zhuǎn)化根癌農(nóng)桿菌LBA4404。通過(guò)花絮侵染法遺傳轉(zhuǎn)化擬南芥,經(jīng)過(guò)除草劑Basta初步篩選獲得6株表現(xiàn)型為陽(yáng)性的植株。PCR檢測(cè),6個(gè)株系中均可檢測(cè)出WAM1基因條帶,初步確定為轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性植株,分別命名為WAM1-A、B、C、D、E、F;RT-PCR檢測(cè),WAM1基因在6個(gè)擬南芥株系中均表達(dá),其中WAM1-C表達(dá)量最高,并且極顯著高于其他株系。生測(cè)實(shí)驗(yàn)表明,取食WAM1-C的小菜蛾的第四齡期極顯著長(zhǎng)于取食其他株系的小菜蛾,在蛹期和成蟲期各處理之間無(wú)顯著差異;取食轉(zhuǎn)WAM1擬南芥的小菜蛾均降低重,其中取食WAM1-C的小菜蛾達(dá)到極顯著水平,蛹重?zé)o顯著差異。通過(guò)對(duì)小菜蛾腸道菌群的16S rDNA測(cè)序表明,小菜蛾腸道菌群優(yōu)勢(shì)菌為厚壁菌門和變形菌門,取食... 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

抗菌肽具有多功能作用（Robinsonetal.2015）

當(dāng)?shù)竭_(dá)一定的閾值時(shí)，以去污劑的作用方式破壞局部的細(xì)胞膜，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。此外抗菌肽還可以抑制mRNA的合成（Lan et al. 2010）、蛋白質(zhì)合成（Vincent et al. 2009）、蛋白質(zhì)折疊、氨基糖苷類修飾酶、細(xì)胞壁合成（Gutet al.2011）等過(guò)程（圖1-2）。4

lutella xylostella）卵，購(gòu)于河南濟(jì)源白云實(shí)業(yè)有限公司菌株 LBA4404 由西北農(nóng)林科技大學(xué)風(fēng)景園林藝術(shù)學(xué)TG1 由本實(shí)驗(yàn)室保存。Bank中收錄的M. eugenii的抗菌肽WAM1基因序列（NC的密碼子重新設(shè)計(jì)抗菌肽 WAM1 堿基序列，交由上海接于 pUC57 載體。載體 pSR784d體 pSR784d 由中國(guó)種子生命科學(xué)研究中心馬崇烈老師S 啟動(dòng)子和 Ocs 終止子的多克隆位點(diǎn)，bar 基因?yàn)榭共?腺苷�；D(zhuǎn)移酶基因，載體具有卡那霉素抗性（圖 2-1

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[9]擬南芥——一把打開植物生命奧秘大門的鑰匙[J]. 張振楨,許煜泉,黃海.  生命科學(xué). 2006(05)
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博士論文
[1]小菜蛾中腸微生物多樣性及其功能研究[D]. 夏曉峰.福建農(nóng)林大學(xué) 2014

碩士論文
[1]小菜蛾腸道共生菌多態(tài)性及與Bt協(xié)同作用研究[D]. 戴楠晶.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3143561