基于RNA干涉技術(shù)的新型番茄抗枯萎病生物制劑開發(fā)
發(fā)布時(shí)間:2021-04-15 17:10
番茄是全世界重要的蔬菜作物之一,由鐮刀菌屬真菌番茄尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.Lycopemsici,FOL)引起的番茄枯萎病是一種番茄生產(chǎn)中主要的病害,給全球番茄農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。miRNA是內(nèi)源基因編碼的長(zhǎng)度約為20-24個(gè)核苷酸的非編碼單鏈RNA分子,參與轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)調(diào)控。本研究用FOL/H20處理具有相似遺傳背景的番茄感病品種Moneymaker和抗病品種Motelle,取處理24 h后的番茄根部材料構(gòu)建四個(gè)文庫(kù):MMH2O,MMFOL,MotH2O和MotFOL。(1)利用高通量測(cè)序技術(shù)挖掘到一個(gè)參與番茄-病原菌互作過程的尖孢鐮刀菌內(nèi)源特異miRNA:folmiR1。(2)結(jié)合Northern blot和qRT-RCR驗(yàn)證,確認(rèn)folmiR1在番茄尖孢鐮刀菌侵染番茄植株中富集;為了排除被侵染番茄根系材料中番茄尖孢鐮刀菌自身miRNA的干擾,通過分離被侵染番茄根系原生質(zhì)體,利用qRT-PCR的方法檢測(cè)到folmiR1,證實(shí)番茄尖孢鐮刀菌folmiR...
【文章來源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.1番茄枯萎病的防治方法[9]
堿基序列特異性識(shí)別并調(diào)控植物-病原菌相互作用相關(guān)基因的表達(dá)[26,27]。在植物和一些微??生物中,RNAi通過轉(zhuǎn)錄后基因沉默(PTGS)或轉(zhuǎn)錄基因沉默(TGS)調(diào)節(jié)參與植物-病原體??相互作用和植物免疫途徑中重要基因的表達(dá)(圖1.2)?[26,28]。??3??
〇?InhlWtoiofCWOC?(B??fm〇fUrf??〇?Twwrtpttonfector/MHKthmof?0?rss??圖1.2植物免疫途徑。??Figure?1.2?Plant?immune?pathway.??1.3。遥危?(sRNA)在植物抗病過程中的功能??1.3.1?sRNA的功能和分類??大多數(shù)。遥危?(sRNA)由RNaselll型核糖核酸酶Dicer樣(DCL)蛋白加工,成熟??的sRNA與Argonaute?(AGO)蛋白結(jié)合,通過堿基互補(bǔ)的方式,在轉(zhuǎn)錄后水平剪切或降解??mRNA,或抑制翻譯過程,調(diào)劑靶基因的表達(dá)[29-33]。基于它們的前體結(jié)構(gòu)和生物發(fā)生,??51^八可以分為111化1'〇1^八(111丨1^八)和5111311丨1^兩11^咖八(5丨1^八)。111丨1^八來自發(fā)夾??結(jié)構(gòu)前體,不依賴于RNA依賴性RNA聚合酶(RDR)或RNA擴(kuò)增機(jī)制,而內(nèi)源性siRNA??(endo-siRNA)是由長(zhǎng)雙鏈RNA(dsRNA)的反義轉(zhuǎn)錄或植物特異性RNA聚合酶(如RNA??聚合酶(Pol)?IV和RDR)的活性產(chǎn)生[34-36]。??成熟miRNA由20-24個(gè)核苷酸組成,其由具有獨(dú)特莖環(huán)結(jié)構(gòu)的單鏈初級(jí)miRNA加工??[37]。miRNA通過與特定靶基因的開放閱讀框或非翻譯區(qū)(UTR)結(jié)合而負(fù)調(diào)節(jié)基因表達(dá)??[38]。在植物中,miRNA參與發(fā)育過程,如器官分離,葉片發(fā)育,極性建立,側(cè)根形成,??花器官特性和繁殖的發(fā)展[39-43]。??1.3.2?miRNA在植物-病原菌互作過程中的功能研究進(jìn)展??在病原菌侵染條件下
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]農(nóng)作物枯萎病的研究進(jìn)展[J]. 劉波,朱育菁,周涵韜,張賽群,謝關(guān)林,張紹升. 廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2004(S1)
[2]華光霉素制劑中有效助劑的篩選及其效果[J]. 朱昌雄,蔣細(xì)良,程洪坤,邱衛(wèi)亮,李興道. 中國(guó)生物防治. 1999(03)
[3]二硝基苯胺類化合物對(duì)棉花抗枯萎病的誘導(dǎo)作用及機(jī)理[J]. 葛銀林,張?jiān)? 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 1995(01)
本文編號(hào):3139747
【文章來源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.1番茄枯萎病的防治方法[9]
堿基序列特異性識(shí)別并調(diào)控植物-病原菌相互作用相關(guān)基因的表達(dá)[26,27]。在植物和一些微??生物中,RNAi通過轉(zhuǎn)錄后基因沉默(PTGS)或轉(zhuǎn)錄基因沉默(TGS)調(diào)節(jié)參與植物-病原體??相互作用和植物免疫途徑中重要基因的表達(dá)(圖1.2)?[26,28]。??3??
〇?InhlWtoiofCWOC?(B??fm〇fUrf??〇?Twwrtpttonfector/MHKthmof?0?rss??圖1.2植物免疫途徑。??Figure?1.2?Plant?immune?pathway.??1.3。遥危?(sRNA)在植物抗病過程中的功能??1.3.1?sRNA的功能和分類??大多數(shù)。遥危?(sRNA)由RNaselll型核糖核酸酶Dicer樣(DCL)蛋白加工,成熟??的sRNA與Argonaute?(AGO)蛋白結(jié)合,通過堿基互補(bǔ)的方式,在轉(zhuǎn)錄后水平剪切或降解??mRNA,或抑制翻譯過程,調(diào)劑靶基因的表達(dá)[29-33]。基于它們的前體結(jié)構(gòu)和生物發(fā)生,??51^八可以分為111化1'〇1^八(111丨1^八)和5111311丨1^兩11^咖八(5丨1^八)。111丨1^八來自發(fā)夾??結(jié)構(gòu)前體,不依賴于RNA依賴性RNA聚合酶(RDR)或RNA擴(kuò)增機(jī)制,而內(nèi)源性siRNA??(endo-siRNA)是由長(zhǎng)雙鏈RNA(dsRNA)的反義轉(zhuǎn)錄或植物特異性RNA聚合酶(如RNA??聚合酶(Pol)?IV和RDR)的活性產(chǎn)生[34-36]。??成熟miRNA由20-24個(gè)核苷酸組成,其由具有獨(dú)特莖環(huán)結(jié)構(gòu)的單鏈初級(jí)miRNA加工??[37]。miRNA通過與特定靶基因的開放閱讀框或非翻譯區(qū)(UTR)結(jié)合而負(fù)調(diào)節(jié)基因表達(dá)??[38]。在植物中,miRNA參與發(fā)育過程,如器官分離,葉片發(fā)育,極性建立,側(cè)根形成,??花器官特性和繁殖的發(fā)展[39-43]。??1.3.2?miRNA在植物-病原菌互作過程中的功能研究進(jìn)展??在病原菌侵染條件下
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]農(nóng)作物枯萎病的研究進(jìn)展[J]. 劉波,朱育菁,周涵韜,張賽群,謝關(guān)林,張紹升. 廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2004(S1)
[2]華光霉素制劑中有效助劑的篩選及其效果[J]. 朱昌雄,蔣細(xì)良,程洪坤,邱衛(wèi)亮,李興道. 中國(guó)生物防治. 1999(03)
[3]二硝基苯胺類化合物對(duì)棉花抗枯萎病的誘導(dǎo)作用及機(jī)理[J]. 葛銀林,張?jiān)? 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 1995(01)
本文編號(hào):3139747
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