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基于RNA干涉技術(shù)的新型番茄抗枯萎病生物制劑開發(fā)

發(fā)布時間:2021-04-15 17:10
  番茄是全世界重要的蔬菜作物之一,由鐮刀菌屬真菌番茄尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.Lycopemsici,FOL)引起的番茄枯萎病是一種番茄生產(chǎn)中主要的病害,給全球番茄農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟損失。miRNA是內(nèi)源基因編碼的長度約為20-24個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子,參與轉(zhuǎn)錄后基因表達調(diào)控。本研究用FOL/H20處理具有相似遺傳背景的番茄感病品種Moneymaker和抗病品種Motelle,取處理24 h后的番茄根部材料構(gòu)建四個文庫:MMH2O,MMFOL,MotH2O和MotFOL。(1)利用高通量測序技術(shù)挖掘到一個參與番茄-病原菌互作過程的尖孢鐮刀菌內(nèi)源特異miRNA:folmiR1。(2)結(jié)合Northern blot和qRT-RCR驗證,確認folmiR1在番茄尖孢鐮刀菌侵染番茄植株中富集;為了排除被侵染番茄根系材料中番茄尖孢鐮刀菌自身miRNA的干擾,通過分離被侵染番茄根系原生質(zhì)體,利用qRT-PCR的方法檢測到folmiR1,證實番茄尖孢鐮刀菌folmiR... 

【文章來源】:揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:81 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

基于RNA干涉技術(shù)的新型番茄抗枯萎病生物制劑開發(fā)


圖1.1番茄枯萎病的防治方法[9]

堿基序列,途徑,植物,病原菌相互作用


堿基序列特異性識別并調(diào)控植物-病原菌相互作用相關(guān)基因的表達[26,27]。在植物和一些微??生物中,RNAi通過轉(zhuǎn)錄后基因沉默(PTGS)或轉(zhuǎn)錄基因沉默(TGS)調(diào)節(jié)參與植物-病原體??相互作用和植物免疫途徑中重要基因的表達(圖1.2)?[26,28]。??3??

聚合酶,靶基因,植物,前體


〇?InhlWtoiofCWOC?(B??fm〇fUrf??〇?Twwrtpttonfector/MHKthmof?0?rss??圖1.2植物免疫途徑。??Figure?1.2?Plant?immune?pathway.??1.3。遥危?(sRNA)在植物抗病過程中的功能??1.3.1?sRNA的功能和分類??大多數(shù)。遥危?(sRNA)由RNaselll型核糖核酸酶Dicer樣(DCL)蛋白加工,成熟??的sRNA與Argonaute?(AGO)蛋白結(jié)合,通過堿基互補的方式,在轉(zhuǎn)錄后水平剪切或降解??mRNA,或抑制翻譯過程,調(diào)劑靶基因的表達[29-33];谒鼈兊那绑w結(jié)構(gòu)和生物發(fā)生,??51^八可以分為111化1'〇1^八(111丨1^八)和5111311丨1^兩11^咖八(5丨1^八)。111丨1^八來自發(fā)夾??結(jié)構(gòu)前體,不依賴于RNA依賴性RNA聚合酶(RDR)或RNA擴增機制,而內(nèi)源性siRNA??(endo-siRNA)是由長雙鏈RNA(dsRNA)的反義轉(zhuǎn)錄或植物特異性RNA聚合酶(如RNA??聚合酶(Pol)?IV和RDR)的活性產(chǎn)生[34-36]。??成熟miRNA由20-24個核苷酸組成,其由具有獨特莖環(huán)結(jié)構(gòu)的單鏈初級miRNA加工??[37]。miRNA通過與特定靶基因的開放閱讀框或非翻譯區(qū)(UTR)結(jié)合而負調(diào)節(jié)基因表達??[38]。在植物中,miRNA參與發(fā)育過程,如器官分離,葉片發(fā)育,極性建立,側(cè)根形成,??花器官特性和繁殖的發(fā)展[39-43]。??1.3.2?miRNA在植物-病原菌互作過程中的功能研究進展??在病原菌侵染條件下

【參考文獻】:
期刊論文
[1]農(nóng)作物枯萎病的研究進展[J]. 劉波,朱育菁,周涵韜,張賽群,謝關(guān)林,張紹升.  廈門大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2004(S1)
[2]華光霉素制劑中有效助劑的篩選及其效果[J]. 朱昌雄,蔣細良,程洪坤,邱衛(wèi)亮,李興道.  中國生物防治. 1999(03)
[3]二硝基苯胺類化合物對棉花抗枯萎病的誘導(dǎo)作用及機理[J]. 葛銀林,張元恩.  植物保護學(xué)報. 1995(01)



本文編號:3139747

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