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菵草對精噁唑禾草靈、甲基二磺隆的抗性及靶標突變快速檢測方法研究

發(fā)布時間:2021-04-15 08:24
  菵草(Beckmannia syzigachne)是一種常見的禾本科雜草,適于生長在潮濕的環(huán)境中,尤其是水邊,是我國長江流域稻茬麥田以及西南地區(qū)油菜田主要雜草,特別是在地勢較低、土壤比較粘重的田塊危害嚴重。精噁唑禾草靈是防治小麥田菵草等禾本科雜草最常用的除草劑,其作用靶標為乙酰輔酶A羧化酶(ACCase),作用靶標單一,由于長期連續(xù)施用,在安徽、江蘇等地區(qū)精噁唑禾草靈對小麥田菵草防效下降或防治失敗。甲基二磺隆是我國防治精噁唑禾草靈抗性雜草的主要替代除草劑,其作用靶標為乙酰乳酸合成酶(ALS)。然而,部分地區(qū)菵草等雜草也迅速對甲基二磺隆產(chǎn)生了抗性,表現(xiàn)出對精噁唑禾草靈和甲基二磺隆兩種不同作用靶標除草劑的多抗性,菵草抗藥性成為小麥生產(chǎn)中的一大威脅。因此,本研究以采自安徽、江蘇兩省的菵草種群為研究對象,研究其對精噁唑禾草靈、甲基二磺隆的抗藥性水平及產(chǎn)生抗藥性的機理,主要結(jié)果如下:1.通過對17個不同菵草種群的抗性水平測定,發(fā)現(xiàn)部分菵草對精噁唑禾草靈、甲基二磺隆產(chǎn)生了不同程度的抗性,同時也表現(xiàn)出多抗性。菵草田間種群對精噁唑禾草靈抗性倍數(shù)1.1617.9之間,對甲基二磺隆抗... 

【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

菵草對精噁唑禾草靈、甲基二磺隆的抗性及靶標突變快速檢測方法研究


菵草質(zhì)體型ACCase基因突變示意峰圖

菵草,基因


段差異位點突變,進而引起的氨基酸取代也是導(dǎo)致雜草對了明確菵草對甲基二磺隆產(chǎn)生抗性的靶標分子機理,翻譯成氨基酸序列后進行了比對分析。,所擴增的 ALS 基因片段長度為 1729 bp,編碼 5經(jīng)過 BLAST 分析,與大穗看麥娘 ALS 序列(AJ43908.1)同源性均在 96%左右,對應(yīng)的氨基酸序列同即為目標序列。對所測的 3 個抗性種群和 1 個敏感氨基酸序列一致性達 99%以上,說明菵草該片段序AHSX-1 相比,抗性種群 JSLY-1、JSDY-2、JSLS-1酸密碼子均由 CCC 突變?yōu)?CGC,導(dǎo)致脯氨酸 Pro 圖 3-2),其他種群未發(fā)現(xiàn)已知的抗性相關(guān)突變,

電泳圖譜,菵草,酶切電泳,種群


圖 3-3 菵草 JSDY-2 種群 ACCase Ile1781 位點 Fok I 酶切電泳圖Figure 3-3 The dCAPS profile for ACCase Ile1781 codon in JSDY-2 American sloughgrass population using Fok I注:1,2,3,4,7,8:野生型植株;5,6:突變雜合型植株;9,10:突變純合型植株Note: 1,2,3,4,7,8: wild type plant; 5,6: heterozygous mutant plant; 9,10: homozygous mutant plant.2AHLJ-1 種群 Trp-2027-Cys (d)CAPS 分析結(jié)果以 AHLJ-1 種群菵草基因組 DNA 為模板,引物對 2027F1/2027R1 擴增出一條 32片段,與預(yù)期結(jié)果相符。將陽性 PCR 產(chǎn)物用限制性內(nèi)切酶 Aci I 進行酶切,在電泳上,突變純合型產(chǎn)生 293 bp 和 32 bp 大小的兩個條帶(32 bp 的條帶太小,無法在圖譜上清晰顯示),野生型無法切開,只有 325 bp 大小的一個條帶,而突變雜合型產(chǎn)生上述 3 個條帶(32 bp 的條帶太小,無法在電泳圖譜上清晰顯示)。對 AH群進行分析發(fā)現(xiàn),檢測的 30 株菵草中有 15 株為突變純合型,6 株為突變雜合型, 9 株為野生型。

【參考文獻】:
期刊論文
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[6]山東省大豆田馬唐對精喹禾靈、稀禾啶抗藥性檢測研究[J]. 滕芳超,王金信.  農(nóng)藥科學(xué)與管理. 2014(03)
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博士論文
[1]小麥田耿氏硬草對精噁唑禾草靈的抗性研究[D]. 袁國徽.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]菵草(Beckmannia syzigachne Steud.)對精噁唑禾草靈的抗性研究[D]. 李凌緒.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]小麥田日本看麥娘對精噁唑禾草靈和甲基二磺隆的抗性研究[D]. 畢亞玲.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號:3138981

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